Cтраница 3
Раствор 1 47 г C6H5HgOH в 20 мл метилового спирта добавлен к раствору 1 3 г тиокарбонильного соединения в 15 мл того же растворителя. При смешении растворов образуется светло-желтая эмульсия и появляется запах фенилизотиоцианата. Реакционная смесь свободно упарена, оставшаяся смесь масла и твердого вещества несколько раз извлечена гептаном. [31]
Изотиоцианаты, или горчичные масла, встречаются в растениях в свободном состоянии или в связанном с сахарами виде как гликозиды. Гликозиды гидролизуют с помощью ферментов, а выделившиеся горчичные масла отделяют от других растительных материалов экстракцией растворителем или отгонкой с паром. К горчичным маслам, встречающимся в природе, относятся аллилизотиоцианат, 3-бутенилизотиоцианат, фенилизотиоцианат и бензилизотиоцианат. Кьяэр и Гмелин [27] выделили L ( -) - 5-метилсуль-финилпентилизотиоцианат из зерен Alyssuum argenteutn, в которых он находится в виде агликона глюкоалиссина. [32]
Химические реакции белков отличаются от реакций аминокислот и тем, что большинство реагентов на белок взаимодействуют более чем с одной функциональной группой. Например, кетен, который применяется для ацетилирования аминогрупп белка, реагирует не только с ними, но и с фенольными, и сульф-гидрильными группами. Для предотвращения этих побочных реакций обработку желательно вести либо в 1 М растворе кислоты, либо при рН 10, что не всегда благоприятно сказывается на биологической активности ряда белков. Недостаточно специфически реагируют с аминогруппами и такие реагенты, как дини-трофторбензол, азотистая кислота и фенилизотиоцианат, причем специфичность каждого из них оказывается различной для различных белков. Поэтому для каждого белка часто приходится подбирать такие условия, в которых специфичность реакции была бы максимальной. При этом для каждого белка необходимо испытать несколько различных реагентов. [33]
Ароматические изоцианаты и изотиоцианаты по характеру распада под действием ЭУ различаются коренным образом. Первые обладают очень стабильными М, распад которых происходит путем выброса СО, НСО, а также HCN CO. При наличии алкильного заместителя в бензольном кольце изоцианаты распадаются подобно алкилбензолам. В противоположность этому М ароматических изотиоцианатов легко выбрасывают радикал NCS. Например, в спектре фенилизотиоцианата пик иона [ М - NCSJ является наиболее интенсивным среди пиков фрагментных ионов. [34]
Небольшая прямоугольная полоска бумаги ватман № 1 ( 1 X 5см) снабжается меткой на одном конце, прикрепляется с помощью зажимов к стеклянной палочке и слегка обдувается воздухом. На каждую из шести ( или более) бумажных полосок наносят 0 05мл раствора, содержащие 1 - 3 мг белка, равномерно покрывая нижние четыре пятых площади полосы. Можно наносить более разведенный раствор повторно, всякий раз подсушивая бумагу. Белки, нерастворимые в воде, следует растворять в солевом растворе, в слабой кислоте или щелочи. После подсыхания бумаги на нее наносят 0 05 мл 20 % - ного раствора фенилизотиоцианата в свободном от перекисей диоксане, и бумажную полоску оставляют на 2 - 3 час при 40 в атмосфере, насыщенной пиридином, диоксаном и водой. [35]