Иммобилизованный фермент

Cтраница 2

Ферментные электроды ( по М. Тривену. [16]

На основе иммобилизованных ферментов получают электроды многократного действия. Электродом, изготовленным с помощью растворимого фермента, можно провести около 50 измерений, а с помощью химически иммобилизованного на нерастворимом носителе несколько сотен измерений. [17]

В обозримом будущем иммобилизованные ферменты могут быть использованы для следующих целей. [18]

Константы Михаэлиса нативного и иммобилизованного трипсинаа. [19]

Как и активность иммобилизованных ферментов, их стабильность также в значительной степени зависит не только от свойств самого фермента, но и от природы носителя и типа связи между ферментом и матрицей. Вообще говоря, можно утверждать, что носители, содержащие гидрофобные группы, могут денатурировать белки, аналогично тому, например, как происходит денатурация гидрофобными растворителями. [20]

Ряд примеров применения иммобилизованных ферментов в аффинной хроматографии приведен в гл. В табл. 11.1 перечислены ферменты, функционирующие как аффинные лиганды при выделении ряда веществ. [21]

На основе использования иммобилизованных ферментов в настоящее время разработаны некоторые принципиально новые промышленные методы получения веществ. Речь в первую очередь идет о синтезе новых лекарственных препаратов. [22]

Некоторые биотехнологи предпочитают иммобилизованным ферментам иммобилизованные клетки. Действительно, выделение, очистка и иммобилизация ферментов являются трудоемким и дорогостоящим процессом. Однако во многих случаях цель оправдывает средства, и иммобилизованные ферменты все больше находят применение в биотехнологии. Если клетки синтезируют ферменты, которые смогут повлиять на фермент или субстрат основной реакции, то применение иммобилизованных клеток нецелесообразно. И напротив, при отсутствии факторов, мешающих катализу основной реакции, иммобилизация микробных клеток возможна и целесообразна. [23]

К свободному или иммобилизованному ферменту в 1 мл воды или разбавленного 0 02 М буфера добавляют по 1 мл нингидринового реагента ( 250 мг нингидрина в смеси 6 мл 90 % - ной муравьиной кислоты и 4 мл конц. Приготовленные таким образом смеси в закрытых колпачками пробирках инкубируют в водяной бане при 100 С в течение 20 мин, охлаждают и отбирают из каждой пробирки по 1 мл; пробы разбавляют 9 мл 95 % - ного спирта. [24]

При работе с иммобилизованными ферментами не - обходимо постоянно перемешивать реакционную смесь в процессе измерения активности, так как в противном случае по мере оседания частиц носителя активность будет уменьшаться. [25]

Углеродные материалы с иммобилизованным ферментом гидрогеназа были использованы [216] для ускорения процесса электроокисления водорода. В качестве медиатора - переносчика электронов с активного центра гидрогеназы на электрод был использован метилвиологен. [26]

Круг использования ферментов расширяют иммобилизованные ферменты. Иммобилизованные ферменты практически нерастворимы. Это новый тип катализаторов с повышенной устойчивостью, использование которых становится экономически эффективным. [27]

Наиболее важным промышленным использованием иммобилизованных ферментов в пищевой промышленности является, по-видимому, производство кукурузного сиропа с высоким содержанием фруктозы, где используется иммобилизованная глюкозонзомераза, превращающая D-глюкозу в D-фруктозу. В процессе, осуществляемом фирмой Clinton, Corn Processing ( США), 93 % - ный раствор глюкозы изомеризуется в 42 % - ную фруктозу с производительностью 227 тыс. тонн в год. Продукт экономически конкурентоспособен с инвертируемым сахаром, получаемым из сахарного тростника и сахарной свеклы. Другим промышленным применением иммобилизованных ферментов является производство сиропа с высоким содержанием фруктозы из крахмала с использованием трехферментного процесса, включающего а-амилазу, глкжоамилазу и глюкозоизомеразу. [28]

Последний из аспектов применения иммобилизованных ферментов, упомянутых Мосбахом [38], является органический синтез в исследовательских лабораториях для различных небольших по масштабу синтезов. [29]

Вначале суспензии агарозы с иммобилизованным ферментом промывают 0 1 М Na-фосфатным буфером, рН 7 4, затем небольшим объемом 8 М мочевины, после чего добавляют двойной объем раствора мочевины и оставляют на 1 ч при комнатной температуре ( или на ночь при 4 С), используя для перемешивания магнитную мешалку. Удаляют раствор мочевины и вновь промывают сначала небольшим объемом 8 М мочевины, а затем указанным выше буфером. Отсутствие мочевины в пробах контролируют с помощью реактива Несслера. Белок в суспензии определяют описанным выше способом. Снижение концентрации белка в суспензии вызвано диссоциацией субъединиц фермента, не образовавших ковалентных связей с группами носителя. [30]

Страницы: 1 2 3 4