Cтраница 4
Необратимые ингибиторы химически модифицируют важные для активности функциональные группы ферменте. Естественно, что после удаления свободного ингибиторе путем диализа активность модифицированного ферменте не восстанавливается. Эффективность действия необратимого ингибитора характеризуется константой скорости процессе ингибироеения. В ряде случаев активность модифицированного фермента можно восстановить, удална присоединившийся необратимый ингибитор путем соответствующей химической реакции; этот процесс принято называть реактивацией. [46]
Здесь имеется равновесие между ферментом и ингибирующим веществом. При действии же необратимых ингибиторов равновесие не устанавливается и восстановить активность диализом не удается. [47]
По-видимому, исторически сложилось так, что применение величины / во для характеристики необратимых ингибиторов было некритически заимствовано из опыта исследования обратимых ингибиторов. Возможно, что при этом важную роль играла недостаточная изученность механизма действия необратимых ингибиторов и стремление провести аналогию с действием обратимых ингибиторов. Позднее накопился большой экспериментальный материал по характеристике необратимых ингибиторов с использованием / 8о в качестве меры их антиферментной активности. Любопытно, что в некоторых случаях эта мера позволяла проводить сопоставление между химическим строением и антиферментным действием в рядах родственных по строению ингибиторов. По-видимому, это объясняется тем, что в подобных случаях время взаимодействия ингибитора с ферментом в среднем у разных авторов не слишком различалось и реакция не доходила до конца. Однако при более тщательном исследовании возникли, как и следовало ожидать, явные противоречия, объясняющиеся неадэкватностью параметра / 6о для необратимых ингибиторов. [48]
Однако для судьбы свободного фермента в присутствии необратимого ингибитора) этот 1 % играет важную роль. [49]
Ингибиторы ферментативных каталитических реакций часта подразделяют на обратимо и необратимо действующие. Эта классификация основана на легкости отделения ингибитора от фермента при помощи физического метода типа диализа. Так, например, эзерин описан как обратимый ингибитор, в то время как фосфорсодержащие соединения подобно диизопропилфосфофториду ( DPF) принадлежат к необратимым ингибиторам холинэстеразы. Однако, поскольку рассматриваются механизмы ингибирования, эта классификация только вносит неопределенность, так как из нее вытекает, что обратимые и необратимые ингибиторы действуют различным образом; в действительности оба типа ингибиторов действуют, соединяясь с ферментом с образованием неактивных комплексов, обладающих весьма различными константами диссоциации. Необратимые ингибиторы образуют комплексы с очень малыми константами диссоциации и поэтому удаляются из комплекса путем диализа только очень медленно, тогда как обратимые ингибиторы образуют комплексы с высокими константами диссоциации и поэтому на всех стадиях удаления присутствует избыток несвязанного ингибитора, поддающегося диализу. Однако более полезным оказывается подразделение ингибиторов на конкурентные и неконкурентные ( хотя многие ингибиторы обнаруживают смешанное поведение), так как эти ингибиторы действуют различными путями и кинетические уравнения для них разные. [50]
При этом было установлено, что величина / so лишь в случае чисто неконкурентных ингибиторов совпадает с / G. Уже для конкурентных обратимых ингибиторов при переходе от 5о к Kt необходим учет величин константы Михаэлиса и концентрации субстрата, поскольку в системе устанавливается равновесие между Е, S и I ( стр. Что касается необратимых ингибиторов, то в этом случае использование / 8о для оценки их реакционноспособ-ности без учета времени реакции не имеет никаких оснований. [51]
Торможение может быть как обратимым, так и необратимым. Ингибиторы соответственно делят на обратимые и необратимые. При действии же необратимых ингибиторов активность фермента не восстанавливается. [52]
Торможение может быть как обратимым, так и необратимым. Ингибиторы, соответственно, делят на обратимые и необратимые. При действии же необратимых ингибиторов активность фермента не восстанавливается. [53]