Хроматография - белок
Cтраница 2
Оба эти случая наблюдаются при хроматографии белков на ионообменных целлюлозах, что указывает на доминирующую роль ионного обмена при элтоции белков. [16]
 |
Схемы выходных кривых при вытесни-тельно-элютивной хроматографии. [17] |
Оба эти случая наблюдаются при хроматографии белков на ионообменных целлюлозах, что указывает на доминирующую роль ионного обмена при элюции белков. [18]
Лишь немногие из известных ионообменников пригодны для хроматографии белков. Лучше всего для этой цели подходят ионообменники на сефадексной и целлюлозной основе. Катион натрия может обмениваться на другие катионы, в том числе и на катионы белковой природы. Поэтому ионообменные полимеры этого типа называют катионо-обменниками. Анионы гидроксила или хлора могут обмениваться на другие ионы, в том числе и белковой природы. [19]
Анионообменные синтетические смолы являются менее удачными сорбентами для хроматографии белков. [20]
Два последних типа представляют Собой сильные апиопообменникн и для хроматографии белков практически не используются. [21]
 |
Список ряда работ, посвященных хроматографии пептидов. [22] |
Обычные стирол-дивинилбензольные иониты, как правило, непригодны для хроматографии белков, поскольку белки легко денатурируют в результате гидрофобного взаимодействия с матрицей ионита. Для этих целей более пригодны полимеры акриловой и метакриловой кислот ( например, тонкоизмельченный амберлит ЩС-50), матрица которых менее гидрофобна. По мнению Петерсона и Соубера [148, 184], лучше всего анализировать белки на ионообменных производных целлюлозы, а По-рат и Линднер [157] предпочитают аналогичные производные полидекстрана. [23]
Колонки, наполненные целлюлозоионитами, могут быть многократно использованы для хроматографии белков. Чтобы подготовить колонку для повторных анализов, необходимо после пропускания последнего растворителя ( 1 % - ный NaOH) промыть ее водой до нейтральной реакции ( скорость вытекания жидкости из колонки должна составлять около 100 мл в час), а затем раствором фосфатного буфера до постоянной реакции. [24]
Макроретнкуляр-ные ионообмешшки на основе полистирола можно, вообще говоря, использовать для хроматографии белков, но при этом следует опасаться денатурации за счет гидрофобных взаимодействий белковых глобул с материалом матрицы. Для липофильных белков мембран такое взаимодействие, по-видимому, опасности не представляет. [25]
В работе [47] также указывается, что автоанализатор может быть использован для регистрации хроматографии белков с помощью реакции Паули, Фолина, Лоури, а также по содержанию общего азота, по Кьельдалю. [26]
Рубэл и Тэппел [45] детально описали собранный ими из отдельных частей автоматизированный прибор для хроматографии белков на сефадексе. [27]
Имеются детекторы, регистрирующие рхзменение коэффициента преломления жидкости или ее электропроводности, но для хроматографии белков и нуклеиновых кислот они широкого распространения не получили. Детекторы, регистрирующие радиоактивность препарата, выходящего в токе жидкости, были упомянуты в предыдущей книге при подробном рассмотрении методов регистрации радиоактивности. Их чувствительность невысока, так что используются они относительно редко. Детекторы флюоресценции обеспечивают очень высокую чувствительность обнаружения элюируемого вещества, поэтому в последние годы они используются все чаще. [28]
Впрочем, такое положение может в недалеком будущем измениться в связи с наметившимися возможностями распространения на хроматографию белков современных высокоэффективных методов, основанных на использовании особо мелкозернистых, гомогенных и вместе с тем крупнопористых ионообменников. [29]
Другой / аспект этой проблемы - распространение на пептиды тех методов, которые начинают оправдывать себя в хроматографии белков, - до сих пор еще мало изучен. Разрешение этой задачи, возможно, позволит осуществить хроматографическое разделение крупных пептидов, которое в настоящее время производится с мало удовлетворительными результатами. [30]
Страницы: 1 2 3