Cтраница 2
Основное назначение ситовой хроматографии - разделение молекул по размерам, хотя во всех рассмотренных до этого системах возможен эффект исключения. Например, исключение может происходить в полярных элюентах, когда у относительно небольших молекул образуется настолько большая сольватная оболочка, что они не могут войти в поры, хотя этого нельзя ожидать, если исходить только из величины их молекул. [16]
В гель-хроматографии ( ситовая хроматография) происходит разделение компонентов по размерам в результате того, что поры в зернах геля способны пропускать лишь молекулы меньше критического размера. [17]
Итак, в ситовой хроматографии для хорошего разделения нужны достаточно длинные колонки. Вследствие того что коэффициент К не может превышать 1, при величине объема элюирования, равной у у в колонке не остается вещества. Поэтому можно подобрать время ввода образцов таким образом, чтобы избежать частичного перекрывания предыдущей и последующей проб и разделять на одной колонке одновременно несколько образцов. [18]
Неподвижные фазы для ситовой хроматографии были рассмотрены в гл. Некоторые сильносшитые полимеры, например ц-стирагель 500 или гель полиакрилэтиленгликоля, еще пригодны для работы при давлениях до примерно 50 атм. [19]
Главной областью применения ситовой хроматографии остается определение молекулярно-массового распределения полимеров. [20]
![]() |
Разделительная способность колонки длиной 3 6 М, заполненной. [21] |
Хотя в основном ситовую хроматографию применяют для разделения полимеров, ее также используют для разделения низкомолеку - лярных соединений. [22]
Иногда метод называют поровой, ситовой хроматографией. [23]
В распределительной, а также ситовой хроматографии наблюдается значительная диффузия как в неподвижной, так и в подвижной фазе. В адсорбционной хроматографии следует рассматривать диффузию в подвижной фазе и на поверхности. Гиддингс / 5 / говорит о необходимости изучения диффузии на поверхностях. Он считает, что скорости поверхностной диффузии, вероятно, должны быть близки к скоростям диффузионных процессов в жидкостях. [24]
Кривая элюирования, получаемая в ситовой хроматографии, искажается размыванием пика. Можно ввести поправку на этот эффект, но это сделать не просто. Большинство опубликованных методов внесения поправок требуют сложных расчетов и хорошей воспроизводимости и пригодны отнюдь не для всех образцов. [25]
Такой ограниченный диапазон коэффициентов распределения характерен для ситовой хроматографии. Это означает, что все компоненты элюируются при пропускании от F0 до F0 Fs объемов растворителя. Очевидно, что число компонентов, которые можно разделить, связано с эффективностью колонки. В других видах хроматографии коэффициент К может превышать 1, и рассмотренное выше ограничение в таких случаях не применяется. [26]
В настоящее время наиболее развиты две теории ситовой хроматографии: теория исключенного объема и теория ограниченной диффузии. В теории исключенного объема допускается, что при элюировании макромолекулы достаточно быстро диффундируют в поры носителя и весь процесс можно считать равновесным. Пористый носитель характеризуется более или менее размытым распределением пор по размерам. Поэтому он содержит некоторое количество пор, в которые из-за стерических затруднений не способны проникать макромолекулы больше определенного размера. Теоретический расчет коэффициента распределения макромолекул делается на основании разных геометрических моделей пор и макромолекул. [27]
В отличие от описанных выше методов разделения для ситовой хроматографии характерен один-единственный механизм разделения. Если взаимодействия между пробой и поверхностью в определенной степени исключены, то порядок элюирования или объем элюирова-ния определяется только величиной молекулы ( см. гл. [28]
![]() |
Влияние размывания полос на разделение пиков. [29] |
В распределительной жидкостной хроматографии коэффициент разделения называют коэффициентом распределения, в хроматографии исключения ( ситовой хроматографии) - коэффициентом исключения, в адсорбционной жидкостной хроматографии - коэффициентом адсорбции, в ионообменной хроматографии и гель-проникающей хроматографии - коэффициентом разделения. [30]