Cтраница 1
Порошкообразная целлюлоза, как и следовало ожидать, по своим хроматографическим свойствам очень похожа на фильтровальную бумагу, однако, согласно данным работы [40], этот сорбент обеспечивает лучшее разрешение близкородственных соединений. Смеси целлюлозы с си-ликагелем, использованные для разделения антоцианов [41] и фенолкарбоновых кислот [42], обладают многими достоинствами обоих сорбентов. [1]
Порошкообразная целлюлоза имеет ряд преимуществ. [2]
Немодифицированные порошкообразные целлюлозы для ТСХ и синтеза аффинных обменников в лабораторных условиях выпускает целый ряд фирм. Аналогичная целлюлоза для колоночной хроматографии выпускается под маркой GG 31, а волокнистая - под. Перечень весьма популярных ионообменннков на основе целлюлозы той же фирмы приведен в гл. Хорошо известны также различные марки хроматографической бумаги, выпускаемые этой фирмой, однако мы их не приводим, поскольку в настоящее время хроматография на бумаге практически уступила свое место ТСХ на пластинках. Фирма Sigma ( США) выпускает три типа волокнистой целлюлозы. Sigmacell ( 100, 50 и 20) для ТСХ; цифры указывают средний размер зерен в микронах. [3]
Использование порошкообразной целлюлозы в производстве Na-КМЦ дает возможность значительно уменьшить расход всех видов сырья по сравнению с классическим методом, увеличить содержание основного вещества в техническом продукте, повысить производительность оборудования. [4]
Применяя распределительную хроматографию на порошкообразной целлюлозе или на кремнеземе, удалось выделить более 12 компонентов. Метод противоточного распределения Крэйга менее пригоден для препаративного разделения, но очень ценен для установления однородности препаратов, полученных после хроматографической очистки. [5]
Обычно применяют колонку с порошкообразной целлюлозой. Используется растворимость нитрата уранила в органических растворителях. [6]
Матографии носителем в большинстве случаев является порошкообразная целлюлоза или тонко размолотый ешгакагель. Бели эти носители необходимо пропитать слабополярной фазой, как это имеет место в хроматографии с обращенной фазой, то носитель следует гидрофобизовать, например, обработкой диметилдихлор-силаном. [7]
Липиды отделяют от нелипидных соединений на колонке из порошкообразной целлюлозы следующим образом: из порошкообразной целлюлозы стандартного сорта Ватман готовят суспензию в смеси хлороформа и метанола ( 2: 1, по объему) и помещают ее в колонку размером 30 X 2 см. Колонку промывают растворителем ( около 200 мл) до прекращения элюирования мелких частиц. Не более 500 мг липида вводят в колонку при максимальном объеме смеси хлороформа с метанолом 5 мл. Липиды элюируют примерно 250 мл растворителя. Элюат упаривают почти досуха и остаток метанола удаляют двухкратным добавлением небольших количеств петролейного эфира и испарением почти досуха. Добавляют петролейный эфир, доводя объем экстракта до 15 мл. [8]
Наряду с описанной выше хроматографией на колонке с порошкообразной целлюлозой пользуются и препаративной хроматографией на бумаге, причем на стартовую линию бумажной полоски наносят не точечное пятно раствора, а целую линию. После хроматографии полученное пятно вырезают и выделенное вешество элюируют подходящим растворителем. Агликоны быстро вымываются 95 % - ным спиртом; гликозиды и флавоны с гидроксилированной боковой цепью - 40 - 7О % - ным спиртом; антоцианины в кислых элюируюпшх агентах - 20 % - ной уксусной кислотой. Для спектрофотометрических определений необходимо тем же способом элюировать и чистую бумагу, чтобы получить раствор для сравнения. [9]
Некоторые из них были выделены на колонке с порошкообразной целлюлозой при помощи системы трет-бутлиол - уксусная кислота - вода ( 2: 1: 1) ( Картер), например ( 3 е-диам 1шоканроловая кислота. [10]
Колонки наполняют инертным пористым материалом, таким, как порошкообразная целлюлоза, насыщают раствором, полностью осаждающим все полисахариды смеси, и затем наносят на колонку раствор смеси веществ в подходящем растворителе. При движении вдоль колонки полисахариды осаждаются на пористом материале. Различные полисахариды вымываются затем из этого осадка за счет ступенчатого или плавного изменения состава элюирующего растворителя. Таким образом, фракционное осаждение заменяется фракционным элюированием. [11]
Наиболее часто используется и вместе с тем наиболее чиста порошкообразная целлюлоза фирмы Ватман. Часто пользуются также порошком фирмы Браун компани под названием Солка-Флок. Она содержит значительные загрязнения, но после очистки обладает хорошими свойствами. Ее можно изготовить из обычной фильтровальной бумаги действием соляной кислоты ( Прохазка; частично гидролизованная бумага в сухом виде очень хрупка и легко может быть измельчена; ее можно также измельчить перемешиванием водной суспензии) или но способу Гирдза и сотрудников ( П16), которые применяли колонки из смеси целлюлозы и гидратцеллюло-зы. [12]
При заполнении колонки рекомендуется смешивать гидроцеллюлозу с равным количеством порошкообразной целлюлозы для увеличения скорости потока растворителя. Заполненную колонку предварительно промывают растворителем в течение 2 дней, затем разделяют исследуемую смесь. Элюаты из колонки отбирают в пробирки при помощи коллектора, из каждой пробирки берут на бумагу каплю элюата, проявляют анилинфталатом и таким образом устанавливают распределение углеводов в элюате. [13]
Для хроматографии фенольных соединений на колонке пользуются полиамидом, силикагелем, порошкообразной целлюлозой и ионообменными смолами. [14]
Как и при получении КМЦ, сульфатирование более эффективно протекает при использовании порошкообразной целлюлозы. На эффективность реакции также влияют состав реакционной смеси: максимальная степень замещения достигается при содержании 55 вес. [15]