Cтраница 4
Природные свободные церамиды, получаемые из природных сфинголипидов, разделяют с помощью ТСХ на носителях, содержащих ионы серебра, на фракции с одинаковой степенью ненасыщенности, а с помощью ГЖХ - по молекулярной массе. Метод ВЭЖХ позволяет провести разделение по обоим указанным параметрам. Перед проведением ВЭЖХ церамиды предварительно фракционируют с помощью адсорбционной хроматографии по содержанию в молекуле гидроксильных групп, а затем переводят в соответствующие производные. [46]
А ( ацил - КоА), образует ц е р а м и д, представляющий собой N-ацил-сфингозин. На следующем этапе процесса биосинтеза церамид взаимодействует с цитидиндифосфохолином ( цДф - холином), являющимся донором фосфорилхолина, в результате чего образуется С. [47]
Биосинтез сфинголипидов требует вначале синтеза аминоспирта сфингозина: пальмитоил - КоА серии - сфингозин. Первая реакция синтеза происходит при участии фосфорилированного производного витамина В6 - пиридоксальфосфата и ионов марганца. Из церамида образуется сфингомиелин: церамид фосфатидилхолин - сфингомиелин диацилглицерол. [48]
ИЮПАК определяется углеводной частью молекулы. О § Охе-оли-госахаридная цепь, Сег - остаток церамида ( в общей ф-ле X Н); цифра в ниж. [49]
В состав гликосфинголипидов входят гидрофобный липидный остаток, церамид, и моно - или олигосахаридные остатки. Углеводная часть молекулы присоединена гликозидной связью к первичной гидроксиль-ной группе церамида. Как правило, в этих липидах встречается набор жирных кислот с длиной цепи от Cie до С2е - Жирная кислота связана в церамиде амвдной связью со сфингозиновым или каким-либо другим сфинголипидным основанием с большой длиной цепи. [50]
Сугита и др. [624] подобрали условия бензоилирования церамидов, содержащих обычные и гидроксилированные жирные кислоты, и показали, что эти производные можно использовать для эффективного и чувствительного анализа методом ВЭЖХ на колонке с зипаксом ( Du Pont) при элюировании 0 05 % - ным раствором метанола в н-пентане или 2 5 % - ным раствором эти-лацетата в гексане. Немодифицированные церамиды, полученные из сфингомиелинов, были разделены на 10 соединений на колонке с обращенной фазой; разделение было основано главным образом на различиях в молекулярной массе и степени ненасыщенности, причем более короткоцепочечные и менее насыщенные церамиды элюирова-лись раньше. [51]