Cтраница 3
Витамин Bi2 [ или цианокобаламин ( 1а) ] принадлежит к семейству соединений, называемых корриноидами. Последние являются производными коррина ( 2), ядра структуры цианокоб-аламина. Нумерация атомов углерода и азота в ( 2) соответствует принятой для порфиринового ядра за исключением того, что в корпине отсутствует атом С-20. Верхние и нижние координационные места иона кобальта обозначаются соответственно аир ( ер. При наименовании корриноида с и-звестной стереохимией вначале в скобках пишут его ос-заместитель, затем без-скобок р-заместитель, за которым следует название корриноида. [31]
Содержащийся в ферментном растворе цианокобаламин очищается от примесей с применением органических растворителей путем разделительного распределения меркду двух жидких фаз, например между бензиловым спиртом и водой [153], фенолом или о-крезолом и водой [154] и другими операциями [9, 89, 141 ], затем подвергается хроматографированию на окиси алюминия и кристаллизации из ацетона или горячей воды. Для получения высокоочищенных препаратов витамина В12 используют выделение из водных растворов в виде кристаллического комплекса цианокобаламина с фенолом [157, 158] или резорцином [158] с последующим разложением. [32]
Кофермент-кобаламин в отличие от цианокобаламина относительно легко расщепляется минеральными кислотами. При действии на кофермент-ко-баламин и его аналоги разбавленных кислот отщепляется только нуклео-зидный лиганд. Гликозидная связь D-рибозы с 5 6: диметилбензимидазо-лом в нуклеотидной части молекулы, по-видимому, очень прочна. [33]
Разрушая связи в молекуле цианокобаламина и исследуя затем ее фрагменты, химики поняли, что структура этого соединения весьма сложна. И только позднее британский химик Дороти Кроуфут Ходжкин, используя метод рентгеноструктурного анализа, полностью определила структуру цианокобаламина. На основании дифракций рентгеновских луч § й кристаллами этого соединения она составила картину распределения электронных плотностей в молекуле вещества, то есть выявила зоны с большой и малой вероятностями нахождения в них электрона. Если соединить линиями зоны с равной вероятностью нахождения в них электрона то получится рисунок скелета молекулы, на основании чего можно судить о ее форме в целом. [34]
Превращение витамина Bi2 ( цианокобаламина) в аденозил - В ( кофермент), по-видимому, включает замещение СМ - - группы аденозильной группой АТР. Однако было установлено, что ферментативный путь такого превращения достаточно сложен. [35]
Фосфорный остаток нуклеотидного лиганда цианокобаламина этерифициро-ван [27], однако не полностью, так как третий гидроксил в виде аниона фосфорной группы компенсирован положительным зарядом атома кобальта, Таким образом, витамин В 2 представляет собой внутреннюю соль. [36]
Цима и Мантован [100] разделяли цианокобаламин и гид-роксокобаламин на обработанных 0 066 М буферным раствором монофосфата калия пластинках с силикагелем, элюируя пробы смесью бутанол-уксусная кислота-вода-метанол ( 20: 10: 20: 5), или на обработанных водой пластинках с силикагелем, элюируя буферным раствором. [37]
Попова и др. [103] разделяли цианокобаламин и гидроксокобаламин на нейтральном оксиде алюминия ( активность по Брокману II), элюируя пробу смесью изобутанол-изопропа-нол-вода ( 1 5: 1: 1 25), рН которой доводили до 8 5, добавляя гидроксид аммония. [38]
Метилкобаламин легче бромируется, чем цианокобаламин. [39]
Витамин В [ 2 см. Цианокобаламин транс - Влияние 353, 363 ел. [40]
Приготовление раствора Государственного стандартного образца цианокобаламина: 0 0250 г Государственного стандартного образца цианокобаламина в пересчете на 100 % вещество растворяют в 25 % спирте в мерной колбе вместимостью 250 мл и доводят объем раствора тем же спиртом до метки. [41]
Раствор, содержащий 0 05 мкг цианокобаламина в 1 мл, принимают за раст вор Государственного стандартного образца контрольной концентрации. [42]
При еще более мягком кислотном гидролизе цианокобаламина в 20 % - ной соляной кислоте при 100 в течение I ч выделен фосфорный эфир а-рибазола ( I), не обнаруживший а-гликольной группировки, способной расщепляться йодной кислотой. [43]
При культивировании с Bacterium propionicum выход цианокобаламина составляет 1 - 3 мг на 1 л питательной среды. При одновременном культивировании с молочнокислыми бактериями выход повышается до 4 3 мг на 1 л культуральной среды. Продуцирование витамина В12 стимулируется прибавлением солей кобальта [164, 165] и осколка молекулы витамина В12 - 5 6-диметилбензимидазола. [44]
Для построения калибровочного графика берут растворы чистого кристаллического цианокобаламина, содержащие 0 02; 0 025; 0 03; 0 035; 0 04; 0 045; 0 05; 0 055; 0 065 и 0 07 мг в 1 мл и определяют оптическую плотность этих растворов. [45]