Моноклональные антитело
Cтраница 1
Моноклональные антитела применяют в качестве индивидуальных или комплексных терапевтических средств. Радиоактивные мкАТ, селективно взаимодействуя с рецепторами раковых клеток, тормозят или полностью подавляют их рост. Весьма перспективным представляется соединение мкАТ с противоопухолевыми цитостатиками и адресная доставка их в опухолевые клетки. Некоторые природные токсины при соответствующей модификации могут быть превращены в специфические иммунотоксины, избирательно взаимодействующие с опухолевыми клетками. Например, рицин - токсин из семян клещевины. Он состоит из двух полипептидных цепей, одна из которых ( А-цепь) обладает токсическим действием, а вторая - В-цепь, - имеющая повышенное сродство к галактозе, связывается с клеточной поверхностью. Механизм действия токсина заключается в следующем. Он взаимодействует с клеткой и присоединяется к ней при помощи В-цепи. В результате диссоциации А-цепь освобождается и, проникая в клетку, блокирует синтез белка. Заменяя В-цепь на соответствующее мкАТ, можно создать иммунотоксин, направленно воздействующий на опухолевые клетки. [1]
Моноклональные антитела могут найти применение для введения лекарственных веществ и токсинов в определенную часть тела ( например, опухоль) либо путем их непосредственного присоединения к таким веществам, либо путем связывания с поверхностью липосом, содержащих внутри такие вещества. [2]
Моноклональные антитела специфичны к определенному антигену. Их можно использовать для того, чтобы найти или идентифицировать этот антиген и, если нужно, разрушить его. Моноклональные антитела широко применяются в клинических лабораториях, и возможности их использования постоянно растут. Пока они применяются главным образом в целях диагностики. [3]
Моноклональные антитела грызунов, сходные с антителами человека, можно получить, выделив кДНК L - и Н - цепей из клеточной линии гибридомы грызунов и амплифицировав их вариабельные области с помощью ГЩР. В качестве праймеров для амплификации можно использовать олигонуклеотиды, комплементарные высококонсервативным сегментам ДНК, фланкирующим с 5 - и 3 -концов последовательность, кодирующую вариабельную область. Зная нук-леотидные последовательности кДНК вариабельных областей легкой и тяжелой цепей ( VL и VH), легко определить границы CDR, основываясь на том, что соответствующие им последовательности гипервариабельны, в то время как каркасные области относительно консервативны. [5]
 |
Схема получения мкАТ. [6] |
В биотехнологии моноклональные антитела используются в качестве лиган-дов для аффинной хроматографии. [7]
 |
Схема получения мкАТ. [8] |
В медицине моноклональные антитела применяют прежде всего для диагностики различных заболеваний. Такие бактериальные заболевания, как кокковые, паразитарные инфекции, малярия, а также грибки хламидии, при помощи мкАТ диагносцируются гораздо точнее, чем другими, традиционными методами. [9]
Для использования моноклональных антител в изучении белковых антигенов важно знать, с одной и той же или разными антигенным и детерминантами ( эпитопами) антигена связываются полученные антитела. Эпитопную специфичность антител определяют методом их конкурентного связывания. Антитела одного клона конъюгируют с пероксидазой ( с. Берут 96-луночный микропланшет для ИФА и сорбируют в лунках антиген, как обычно ( с. [10]
Из 150 диагностических моноклональных антител, применяемых в настоящее время, примерно одна треть используется для выявления беременности. Как только эмбрион достигает матки ( в пределах четырех дней после зачатия), он прикрепляется к ее стенке. Этот процесс называется имплантацией. Информация об этом поступает в яичники женщины, чтобы они могли отреагировать соответствующим образом. При поступлении такого сигнала яичники производят гормоны, поддерживающие внутренний слой матки. При этом у женщины прекращаются менструации, и эмбрион сохраняется. Сигналом для яичников служит гормон, продуцируемый ворсинками хориона - органа, с помощью которого зародыш соединяется со стенкой матки. Название этого гормона - хори-онический гонадотропин человека ( сокращенно ХГЧ, см гл. Он циркулирует в крови матери, откуда и поступает в яичники. Ко времени, когда у женщины в норме должна начаться менструация ( примерно через 14 дней после зачатия), уровень ХГЧ повышается настолько, что его можно обнаружить в моче. ХГЧ является гликопротеи-ном, и к нему можно получить антитела с помощью описанного выше метода. Современные тесты на беременность основаны на выявлении ХГЧ в пробе мочи женщины с помощью моноклональных антител. Процедура описана на рис. 12.17. Набор для тестирования в домашних условиях, с помощью которого результат получают в течение 5 мин, имеется в продаже. [11]
Область возможного применения моноклональных антител весьма обширна. Их используют в диагностике, например для быстрого и точного типирования тканей и органов, предназначенных для пересадки. [12]
Для очистки больших количеств моноклональных антител из ас-цитных жидкостей применяют хроматографию на ДЭАЭ-целлюлозе. [13]
Есть надежда, что со временем моноклональные антитела можно будет использовать для лечения болезней, а не только для их диагностики. [14]
Такие продукты, как интерферон, моноклональные антитела, антигены, вирусы и гормоны, могут извлекаться как непрерывным, так и периодическим способом. Были исследованы процессы с применением мембранных реакторов, в которых использовались панкреатические клетки для синтеза инсулина, а также для получения других белковых гормонов и энзимов. Периодический способ давно применялся для выращивания бактерий и дрожжевых клеток ферментацией. Основной стадией непрерывной ферментации является выделение токсичных продуктов. [15]
Страницы: 1 2 3 4