Моноклональные антитело

Cтраница 4

Для проведения РИА гормонов, а также других лекарств или токсических веществ ( возможности метода весьма широкие) необходимо иметь радиоактивно меченое исследуемое соединение и смесь сывороточных гамма-глобулинов, содержащих антитела к этому соединению. Идеальным случаем является использование чистых моноклональных антител, полученных с помощью гибрид омной методики. [46]

Чувствительность в определении единичных аминокислотных замен в случае моноклональных антител значительно выше по сравнению с антисывороткой и позволяет использовать моноклональные антитела даже для детекции тонких конформационных изменений молекулы белка. Благодаря высокой чувствительности, с которой моноклональные антитела определяют антигенные детерминанты, их можно использовать для точного установления границ и структуры детерминант, а также для идентификации и выделения чистых специфических пептидных фрагментов антигена. [47]

Представления Анохина были развиты шведскими нейрохимиками X. Полетаев, используя методику так называемых моноклональных антител, подавлял у крыс функцию или только глии, или только нейронов, что позволило отделить их друг от друга. В результате ему удалось показать, что, по меньшей мере, в одном механизме - образовании памяти - в равной степени важны как клетки глии, так и нервные. Предложенная Полетаевым схема механизма памяти такова: получив какие-то сведения, сообщение, нейроны переадресуют их клеткам глии, выделяя для этого соответствующие ионы и медиаторы. [48]

Попытки выделить небольшой пептид, моделирующий активный центр молекулы, не увенчались успехом. Использование метода направленного точечного мутагенеза и моноклональных антител к определенным участкам молекулы 1L2 показало, что активный центр формируется аминокислотными остатками, находящимися на N - и С-концах молекулы, сближенных в пространственной структуре молекулы за счет дисульфид ной связи. [49]

Гибридома ( Hybridoma) Гибридная клеточная линия, полученная при слиянии нормальных антителообразу-ющих клеток ( лимфоцитов) и миеломных клеток. Обладает способностью к неограниченному росту и синтезу моноклональных антител. [50]

Созревание Т - клеток. [51]

Следует отметить наличие антигенов ( своеобразных маркеров), характерных для самих Т - клеток. Антигены Т - лимфоцитов идентифицируются при помощи моноклональных антител. В настоящее время установлено несколько десятков такого рода антигенов. Рассмотрим два из них: CD4, характерный для хелперных клеток, и CD8, локализованный в цитотоксических клетках-киллерах. Вместе с тем около 5 % зрелых Т - клеток несут как CD4, так и CD8 антигены. [52]

Перекрестные реакции могут быть причиной ложных положительных ответов, что недопустимо при скрининге суперэкотоксикантов. Однако в тщательно подобранных условиях анализа, используя моноклональные антитела, можно специфически определять исследуемые соединения. Определению веществ иммунохимическими методами мешают только очень близкие по структуре соединения. Такая ситуация, в частности, характерна для метаболитов хлорсодержащих пестицидов и диоксинов, токсичность которых зависит от числа атомов хлора в молекуле и их расположения в ней. Несмотря на очень высокую специфичность иммунохими-ческих методов в литературе все чаще упоминаются те или иные операции разделения, вводимые для предотвращения перекрестных реакций или устранения мешающего влияния других соединений. [53]

При помощи мкАТ возможно не только диагностировать опухолевые процессы, но и изучать молекулярные механизмы малиг-низации клеток. Ряд белков, кодируемых онкогенами, был выявлен при помощи моноклональных антител. Например, онкоген саркомы Рауса кодирует белок, обладающий киназной активностью. Он способен фосфорилировать белки по тирозину, подобно фактору роста эпидермиса, и индуцировать неконтролируемое деление клеток. [54]

Схематичное изображение генов к - и Н - цепей иммуноглобулинов человека. А. Строение гена к-цепи иммуноглобулина в клетках зародышевой линии. Штриховая линия - промежуточные домены, здесь не показанные. Ген функциональной к-цепи, например Ук8 - 1к4 - Ск, образуется в В-клетках в результате нескольких перестроек соответствующих ДНК-доменов. Представленная здесь комбинация - лишь одна из 500 возможных. Б. Строение гена Н - цепи иммуноглобулина в клетках зародышевой линии. Штриховая линия - промежуточные домены, здесь не показанные. Ген функциональной Н - цепи, например VH33 - DH26 - JH4 - Coc, образуется в В-клетках в результате ряда перестроек соответствующих доменов. Представленная здесь комбинация - лишь одна из 140 000 возможных. На рисунке показан только один Су-домен, хотя на самом деле их четыре ( Cyl, Су2а, Су2Ь и СуЗ. [55]

Их иммунизировали тремя разными антигенами, и в каждом случае гибридомы секретировали человеческие моно-клональные антитела, обладающие высоким сродством к антигену, которым животные были иммунизированы. Весьма вероятно, что с помощью такой трансгенной системы удастся получать человеческие моноклональные антитела для использования их в медицине. [56]

Очевидно, что такой подход пригоден и для очистки интерферона, синтезируемого бактериями-рекомбинан - там.и. Возможности применения моноклональных антител для пассивной иммунизации ограничены, во всяком случае, у больных людей, поскольку пока не удалось получить стабильные клоны на основе клеток человека. [57]

Современная микробиологическая лаборатория с ламинарным боксом. [58]

Селективная среда - это среда, в которую добавляются вещества, подавляющие рост всех организмов, за исключением одного или нескольких. Примером может служить добавление пенициллина к культуре с целью отбора устойчивых к нему организмов, или отбор гибридных клеток в процессе производства моноклональных антител ( разд. [59]

В отличие от них локус D отвечает за пролиферативный ответ культуры при смешивании лимфоцитов, хотя он может быть таким же, как в случае локуса Dr. Гены каждого локуса исключительно полиморфны: одному антигену соответствует до тридцати аллелей, Типирование HLA-комплекса у пациентов можно существенно улучшить путем применения моноклональных антител против различных антигенов комплекса HLA, так как это повышает надежность и воспроизводимость результатов. [60]

Страницы: 1 2 3 4