Cтраница 3
Гель-хроматографию проводят, как правило, в хроматографических колонках. Тем не менее кажется целесообразным кратко рассмотреть проверенное на практике оборудование, составляющее в сборе единую систему ( фиг. Разделение смеси осуществляется в колонке ( 4) при промывании геля элюентом. [31]
Гель-хроматографию особенно целесообразно применять в тех случаях, когда необходимо очень быстро отделить высокомолекулярные компоненты от низкомолекулярных. На специально подготовленной колонке ( 3X6 см) с сефадексом G-25 ( грубым) Эрлан-деру [25] удалось всего за 2 мин полностью отделить рибонуклеазу от воды, содержащей тритий. Этот быстрый аналитический метод позволяет изучить кинетику обмена трития и на этом основании сделать выводы о степени спирализации растворенного белка. [32]
Гель-хроматографию следует рассматривать как один из видов распределительной хроматографии. [33]
![]() |
Типичная хроматограмма трехкомпонентного образца. [34] |
В гель-хроматографии скорость движения молекул образца по колонке обусловлена их размером: большие молекулы не могут проникнуть в поры частиц стационарной фазы ( геля) и быстро перемещаются по колонке подвижной фазой, молекулы небольшого размера проникают внутрь частиц геля и задерживаются в колонке. [35]
В гель-хроматографии применяются наполнители различных марок, отличающиеся размером пор. [36]
![]() |
Типичная хромаю грамма трехкомпонентного образца. [37] |
В гель-хроматографии скорость движения молекул образца по колонке обусловлена их размером: большие молекулы не могут проникнуть в поры частиц стационарной фазы ( геля) и быстро перемещаются по колонке подвижной фазой, молекулы небольшого размера проникают внутрь частиц геля и задерживаются в колонке. [38]
В гель-хроматографии коэффициент емкости определяется как отношение общего числа молей растворенного вещества, находящегося в застойной жидкой фазе внутри частиц, к числу молей этого вещества в текущей жидкой фазе. [39]
![]() |
Схематическое изображение общего V и наружного Vo объемов и. [40] |
В гель-хроматографии пробу вводят в колонку всегда в виде раствора. [41]
Для гель-хроматографии выпускается набор мелкозернистых стекол ( МПС) с разными размерами пор: МПС-250 ГХ, МПС-750 ГХ, МПС-1150 ГХ, МПС-1600 ГХ и МПС-2000 ГХ. [42]
В гель-хроматографии особое значение имеет заполнение колонки гелем. Метод заполнения зависит от типа применяемого геля. Если используются мягкие гели, то гель предварительно набухает в растворителе, применяемом для разделения. Набухший гель помещают в колонку, частично заполненную растворителем. Гель оседает в колонке до тех пор, пока не образуется слой требуемой длины. Затем избыток растворителя медленно сливают, открыв нижний кран на колонке. Если высота слоя геля недостаточна, а колонка не вмещает следующие порции геля, то растворитель сливают через кран и в колонку вносят следующую порцию геля. Так повторяют до достижения требуемой высоты слоя геля. [43]
В гель-хроматографии за Vs принимают объем пор материала V m соответствует объему между частицами материала в колонке. [44]
В гель-хроматографии ( ситовая хроматография) происходит разделение компонентов по размерам в результате того, что поры в зернах геля способны пропускать лишь молекулы меньше критического размера. [45]