Cтраница 3
В гидролизованной моче с раздельно введенными добавками кокаина, БЭ и МЭ по 50 мкг / мл каждого соединения найден Э в концентрации 48 5 нг / мл ( 0 097 % превращения), 135 нг / мл ( 0 27 %) и 560 нг / мл ( 1 12 %) соответственно. Таким образом Э может быть определен в моче людей, употреблявших кокаин, после процедуры химического гидролиза. [31]
Интересным вариантом частичного расщепления является ацетолиз гликозидных связей, осуществляемый путем обработки полного ацетата олигосахарида раствором серной кислоты в уксусном ангидриде. Соотношения скоростей расщепления различных гликозидных связей при гидролизе и ацетолизе достаточно различны, в связи с чем эти методы в известной мере дополняют друг друга. Наибольшее применение ацетолиз находит в химии полисахаридов, но используется также и при изучении олигосахаридов. Помимо химического гидролиза для частичного расщепления олигосахаридов применяют также ферменты, расщепляющие гликозидные связи - гликозидазы ( см. стр. Ферментативный гидролиз гликозидных связей протекает в чрезвычайно мягких ( физиологических) условиях. Применение специфических глико-зидаз позволяет производить избирательное расщепление олигосахаридов по вполне определенным типам связей. Кроме того, отношение данной гликозидной связи к ферменту, субстратная специфичность которого известна, позволяет сделать заключение о конфигурации этой связи, размере цикла моносахаридного остатка, его структуре и абсолютной конфигурации. Рассмотрим в качестве иллюстрации ферментативный гидролиз раффинозы. [32]
При недостаточно низкой температуре хранения количество микроорганизмов в масле возрастает. При этом в масле возникают различные процессы порчи. Осали-ванио и прогоркание масла часто связано с деятельностью некоторых аэробных бактерий ( Bact. Oidium lactis, Penicillium, Cladospo-rium) или дрожжей; иногда этот порок является результатом химического гидролиза жира и окисления продуктов гидролиза. [33]
Действие мирозиназы было бы проще всего объяснить, считая, что при ферментативном расщеплении образуется только горчичное масло и что нитрил получается только при чисто химическом гидролизе глюкозида. Именно такую точку зрения выдвинул Гадамер, чтобы объяснить свои результаты и данные Гофмана ( см. стр. Если считать, что фермент не участвует в образовании нитрила, то кажется странным, что полное расщепление глюкозида может происходить при комнатной температуре. Возможно, однако, что чисто химический гидролиз может катализироваться ионами водорода бисульфата калия. С накоплением этой соли в процессе реакции прекращается, как утверждают, действие фермента. Образование винилуксусной кислоты при кислотном гидролизе синигрина, установленное Этлингером и Ландином ( соответствующий нитрил был, вероятно, промежуточным продуктом в этой реакции), подтверждает такой взгляд на роль бисульфата калия. [34]
Часто перед исследователями встает задача селективного выделения из суммарного гидролизата белка пептидов, несущих определенные функциональные группы. Для этих целей может быть эффективно использована хемоспецифическая, или ко валентная, хроматография, основанная на образовании ко валентной связи пептида с носителем. Чаще всего метод ковалентной хроматографии применяют для селективного аыделения иистеинсодержащих пептидов. При этом пептиды, не содержащие остатков цистеина, не саязываются с носителем и удаляются при промывании соотаетстаующим буфером. Цистеинсодержащие пептиды выделяют далее восстановлением дисульфидных связей при рН 8 0 избытком меркаптоэтанола или дитиотреита. Более селективного разделения тиолсодержащих и тиолнесодержащих пептидов можно достигнуть, если проводить ферментативный или химический гидролиз белка, предварительно иммобилизованного иа нерастворимом носителе. В качестве носителя в обоих случаях используется тиол-сефароэа 4В, которая содержит в качестве активированной группы смешанный дисульфид, образующийся при обработке глу-татион-сефарозы 2 2 -дипиридилдисульфидом. [35]