Cтраница 2
Определение аминокислотного состава пептида проводится после полного гидролиза вещества, в ходе которого все пептидные связи разрушаются, и пептид превращается в смесь аминокислот, составлявших его. Полученный гидролизат подвергают количественному анализу с помощью ионообменной хроматографии и таким образом устанавливают, какие аминокислоты и в каких соотношениях входят в исследуемый пептид. [16]
Полученный гидролизат собирали в сборники, вытесняя его трехкратной промывкой остатка водой. [17]
Определение аминокислотного состава пептида проводится после полного гидролиза вещества, в ходе которого все пептидные связи разрушаются, и пептид превращается в смесь аминокислот, составлявших его. Полученный гидролизат подвергают количественному анализу с помощью ионообменной хроматографии и таким образом устанавливают, какие аминокислоты и в каких соотношениях входят в исследуемый пептид. [18]
Например, на гидролиз взято 50 мл фильтрата ржаной бражки. Объем полученного гидролизата разбавлен до 100 мл. Из разбавленного раствора взято 2 5 мл для определения Сахаров. На титрование пошло 0 65 мл стандартного раствора глюкозы. [19]
Для облегчения фильтрования продукта гидролиза его коагулируют. С этой целью полученный гидролизат разбавляют 4 - 5-кратным объемом дистиллированной воды, нагретой до 60 С. Разбавленную суспензию сгущают отстаиванием, сливают осторожно сифоном воду и осадок фильтруют на воронке Бюхнера, промывая его горячей дистиллированной водой. Можно фильтровать суспензию без предварительного отстаивания, но в этом случае процесс фильтрования замедляется. [20]
В микрохимическую пробирку вводят 5 капель полученного гидролизата нуклеопротеида. Добавляют по каплям 10 % - ный водный раствор гидрата окиси аммония до щелочной реакции на лакмус и 5 капель аммиачного раствора серебра ( заранее приготовленного - стр. [21]
Сахароза же под влиянием инвертазы распадается на глюкозу и фруктозу и полученный гидролизат даст положительные реакции восстановления металлов за счет появления свободных карбонильных групп. [22]
Таким образом, гидролизаты представляют собой растворы различных моносахаридов, продуктов их распада и других веществ, которые перешли в раствор при гидролизе растительной ткани. При выборе оптимального режима гидролиза руководствуются количеством моносахаридов, найденных в полученных гидролизатах. [23]
Фильтр и промывные воды количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1 л, объем раствора доводят до метки, прибавляя дистиллированную воду, и тщательно перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл вливают 50 мл ( отмеривание пипеткой) полученного гидролизата и осторожно по каплям при постоянном перемешивании прибавляют 10 мл 20 % - ного раствора едкого натра для нейтрализации серной кислоты. После охлаждения нейтрализованного раствора до комнатной температуры его объем доводят до метки, прибавляя дистиллированную воду. Раствор хорошо перемешивают и анализируют на содержание редуцирующих веществ эбулиостатическим методом. [24]
Из методов гидролиза растительного сырья концентрированной серной кислотой наибольший практический интерес представляет рижский способ с применением малого кислотного модуля. Этот процесс основан на растирании сухого измельченного растительного сырья с небольшим количеством концентрированной серной кислоты с последующим разбавлением смеси водой, инверсией полученного гидролизата путем превращения целлодекстринов в глюкозу в присутствии лигнина и отделением лигнина фильтрацией. [25]
Казеин технический, 10 % - ный казеиновый кислый гидролизат. В колбу вместимостью 1 л помещают 100 г размолотого казеина, добавляют 500 мл 20 % - ной соляной кислоты и перемешивают. Из полученного гидролизата под вакуумом отгоняют соляную кислоту до получения густого сиропа. Для более полного извлечения соляной кислоты к сиропу в колбе прибавляют 300 мл дистиллированной воды и снова отгоняют до получения густого сиропа. Полученный раствор осветляют активированным углем. Осветленный раствор фильтруют на воронке Бюхнера под вакуумом. Если фильтрат желтый, то осветление повторяют с новой порцией активированного угля до получения бесцветного или бледно-желтого раствора. Осветленный гидролизат разливают в колбы вместимостью 100 мл, стерилизуют в автоклаве при давлении 0 1 МПа ( 1 кгс / см2) в течение 20 мин, охлаждают и в каждую колбу вливают по 5 мл толуола. [26]
Приготовление 10 % казеинового кислотного гидролизата: 100 г казеина размолотого смешивают в колбе вместимостью 1 л с 500 мл 20 % раствора хлористоводородной кислоты. Первые 5 - 8 ч до растворения казеина нагревание проводят на кипящей водяной бане, а затем на, электроплитке с асбестовой сеткой. Из полученного гидролизата при пониженном давлении отгоняют хлористоводородную кислоту. К густому остатку прибавляют 300 мл воды, перемешивают и снова отгоняют до получения густого сиропа. К раствору прибавляют 20 г угля активированного осветляющего, встряхивают в течение 1 ч, затем фильтруют на воронке Бюх-нера с отсасыванием. Обработку углем повторяют еще раз и получают бесцветный или светло-желтый раствор, который разливают в колбы по 100 мл и стерилизуют насыщенным паром под давлением в паровом стерилизаторе при 1 ати ( 0 1 МПа) 20 мин. [27]
При получении спирта из древесины перед гидролизом древесину размельчают до стружек следующих размеров: толщина 3 мм, ширина 10 - 70 мм и длина 25 мм. Реакция среды полученного гидролизата кислая, рН 1 8 - 2 2, поэтому гидролизат нейтрализуют известковым молоком, в котором содержится 1 1 - 1 2 кг / л извести; в гидро-лизате сравнительно мало азота и фосфора, поэтому предварительно к каждому кубическому метру гидролизата добавляют 0 3 кг суперфосфата и 0 15 кг сульфата аммония. [28]
Далее проводят их хроматографическое разделение, причем для выявления зон, содержащих аминокислоты, хроматограмму прокрашивают нингидрином. Эти операции могут проводиться на специальных приборах - аминокислотных анализаторах. В этом случае полученный гидролизат наносят на хроматографическую колонку и затем элюируют по стандартной программе, обеспечивающей разделение всех аминокислот, входящих в состав белков. Перед регистрацией выходящего элюата к нему примешивают нингидрин и смесь пропускают через специальный термостат, время прохождения через который и температура подобраны таким образом, чтобы процесс (VII.1) полностью завершился. После выхода из термостата окрашенные зоны проходят через кювету фотометра, в котором проводится количественное измерение содержания красителя, а тем самым и содержания аминокислоты. Так как каждая аминокислота в этой системе имеет определенное время выхода из колонки, то идентификация аминокислот, соответствующих окрашенным зонам, не вызывает затруднений. [29]
![]() |
Содержание аминокислотных компонентов, входящих в состав частиц в бытовых сточных водах. [30] |