Cтраница 2
![]() |
Энергетический профиль реакции гидратации фумаровой кислоты до яблочной кислоты под действием фумаразы. [16] |
Гидролазы, катализуют гидролитические реакции. К ним принадлежат эстеразы, гликозидазы, пептидазы, фосфатазы. [17]
Агликоном амигдалина является гидроксинитрил бензальдегида. Под действием фермента fi - гликозидазы амигдалин гидролизуется с выделением цианово-дородной кислоты, чем объясняется его отравляющее действие. [18]
По сравнению с простейшими катализаторами для ферментов характерна высокая специфичность их действия, которая не всегда одинаково выражена у различных ферментов. Наряду с ферментами высокоспецифичными, такими как гликозидазы, ускоряющими гидролиз только определенных дисахаридов, или таким, как уреаза, расщепляющая только мочевину, имеются и ферменты, не обладающие строгой специфичностью, как, например, пептидгидролазы, ускоряющие гидролиз целого ряда соединений, построенных по общему типу, начиная от некоторых простейших дипептидов и кончая высокомолекулярными белковыми веществами. [19]
Горький миндаль, давший красивую цветную реакцию, содержит сложное вещество, которое называется амигдалином. И в этом же миндале есть фермент гликозидаза, который способен разлагать амигдалин в присутствии воды на более простые вещества. Именно он с последней каплей хлорида железа и дает такое яркое окрашивание. [20]
Наличие у прокариот разнообразных гидролитических ферментов позволяет им использовать в качестве источников углерода и энергии многие органические вещества, в том числе полимеры разного типа. Было обнаружено, что многие бактерии способны в больших количествах вырабатывать ферменты ( гликозидазы, про-теазы, липазы и др.), гидролизующие все типы полимерных молекул. Отрицательные последствия гидролиза собственных молекул ( самопереваривание) очевидны. Становится понятна необходимость изолирования этих ферментов от цитоплазматического содержимого. Грамположительные бактерии выделяют гидролитические ферменты во внешнюю среду у грамотрицательных они локализованы в периплазматическом пространстве. Там же содержатся и водорастворимые белки, участвующие совместно с другими ферментными белками в активном транспорте веществ. [21]
Весьма ценный метод определения конфигурации гликозидных связей заключается в исследовании отношения гликозидов к гликозидазам - ферментам, расщепляющим гликозидные связи ( см. гл. Поскольку действие всех известных гликозидаз стереоспецифично, способность определенного фермента катализировать гидролиз исследуемого гликозида позволяет установить конфигурацию гликозидной связи последнего. Однако гликозидазы специфичны не только к конфигурации гликозидной связи, но и к стереохимии глико-зильного остатка, и, кроме того, чувствительны к природе агликона. Поэтому неспособность данного соединения к гидролизу под влиянием того или иного фермента не может служить окончательным доказательством конфигурации его гликозидной связи. С другой стороны, при работе с гликозидазами необходимо постоянно считаться с возможным присутствием примесей других ферментов ( например, примесь ( 3-глюкоз ид азы в а-глюкозидазе), способных исказить результаты гидролиза ( см. также стр. [22]
В такой реакции, называемой трансгликозилированием, или перегликозилированием, исходное соединение обычно называют донором гликозильного остатка, а соединение, подвергающееся гликозилирова-нию, - акцептором. Частным случаем трансгликозилирования, в котором акцептором служит молекула воды, является ферментативный гидролиз олигосахаридов. Таким образом, гликозидазы являются одним из видов трансгликозилаз. В принципе донором могут служить О-гликозиды любого типа, а акцептором - любое гидроксилсодержащее соединение. [23]
Из многих природных источников выделены ферменты, катализирующие расщепление гликозидных связей - гликозидазы. Гликози-дазы широко распространены; их извлекают обычно из желудочно-кишечного тракта животных и из семян растений. Многие микроорганизмы вырабатывают внеклеточные гликозидазы, выделяя их в окружающую среду. Можно добиться последовательной индукции различных гликозидаз, что было остроумно ксполь-зовано для установления последовательности концевых моносахарид-ных остатков в сложных углеводсодержащих биополимерах124 ( см. гл. [24]
Синтезы олигосахаридов из свободных Сахаров при помощи карбогидраз известны очень давно. Так, при действии дрожжей ( а-гликозидазы) на концентрированный раствор глюкозы еще в 1902 г. была получена мальтоза. При помощи fl - гликозидазы эмульсина на концентрированные растворы моноз были получены дисахариды с 3-гликозидной связью. [25]
В ряде случаев удается обратимо отделить К. Не все ферменты требуют для своего действия присутствия К. Многие ферменты, относящиеся к классу гидро-лаз ( пептидазы, эстеразы, гликозидазы, фосфатазы и др.), являются простыми белками, не нуждающимися для проявления своих ферментативных функций в к. Однако большинство ферментов и среди них прежде всего ферменты, относящиеся к классу трансферам ( дегидрогеназы, оксидазы, цитохромы, аминоферазы, фосфокиназы, ацилферазы и др.), активны лишь при наличии соответствующих К. [26]
В ряде случаев удается обратимо отделить К. Не все ферменты требуют для своего действия присутствия К. Многие ферменты, относящиеся к классу гидро-лаа ( пептидазы, эстеразы, гликозидазы, фосфатазы и др.), являются простыми белками, не нуждающимися для проявления своих ферментативных функций в к. Однако большинство ферментов и среди них прежде всего ферменты, относящиеся к классу трансфераз ( дегидрогеназы, оксидазы, цитохромы, аминоферазы, фосфокиназы, ацилферазы и др.), активны лишь при наличии соответствующих К. [27]
![]() |
ИК-спектры. глюкоманнанов различных видов. [28] |
Выделенные из него Р - глюкоманнаназы были разделены на активности эндоглюкоманнаназу и олигогликозидазу. По-видимому, расщепление глюкоманнанов ( как и крахмала) происходит в 2 стадии: вначале глюкоманнан расщепляется эндоглюкозидазой, а затем уже действуют гликозидазы, расщепляющие олигосахариды. [29]
По механизму действия различают след. Первые отщепляют от олигомерных субстратов концевые невосстанавливающие остатки моносахаридов. Для нек-рых из них доказан механизм, включающий промежут. Как гликозидазы, так и эидогликаназы расщепляют гликозидную связь с сохранением конфигурации аномерного атома углерода ( Са в циклич. Известны также эн-догликозидазы, катализирующие отщепление олигоса-харидных остатков от углеводных цепей гликопрогеинов. [30]