Исследование - структура - белок
Cтраница 2
Значительные успехи биологических наук были достигнуты в конце 19 -начале 20 в. В последние два десятилетия удалось разработать разносторонние методы исследования структуры белков, некоторые из к-рых ( простейшие) были синтезированы. Наконец, в последние годы биологи совместно с химиками и физиками значительно продвинулись в расшифровке механизма биосинтеза белков. [16]
В последние два десятилетия удалось разработать разносторонние методы исследования структуры белков, некоторые из них ( простейшие) были синтезированы. Наконец, в последние годы биологи совместно с химиками и физиками значительно продвинулись в расшифровке механизма биосинтеза белков. [17]
 |
Диаграмма электрофореза кровяной сыворотки. [18] |
В результате гидролиза белки превращаются в аминокислоты. Определение аминокислот, составляющих данный белок, является первой стадией при исследовании структуры белков. Гидролиз белков может быть осуществлен кислотами, основаниями или ферментами. [19]
Получение дальнейших сведений в указанном направлении затрудняется не только тем, что молекулы белков очень велики и имеют сложную структуру, но также и тем, что они очень нестойки. В связи с этим только небольшое число методов химического анализа может быть применено для исследования структуры белков. Лабильность белков связана с тем, что силы, обусловливающие сцепление прилегающих друг к другу пептидных цепей и внутреннюю структуру молекулы в целом, очень слабы. [20]
 |
Техника бумажной хроматографии. [21] |
Возможность разделения малых количеств веществ, простота эксперимента и разнообразие экспериментальных условий позволяют использовать бумажную хроматографию почти во всех областях химического исследования. Шире всего этот метод применяют в биохимии, например для разделения аминокислот и пептидов при исследовании структуры белков. Метод применяют также для разделения алкалоидов, стероидов и различных экстрактов из природных продуктов. Бумажную хроматографию используют для разделения радиоизотопов. Были предложены способы, позволяющие в полевых условиях обнаруживать и определять металлы в почвах и геологических образцах. [22]
Введенные в последние годы современные микрометоды, базирующиеся на ряде новых принципов ( изотопное разбавление, выращивание бактерий, хроматография), привели к кардинальным успехам в области аминокислотного анализа, и многие белки сейчас проанализированы полностью. В настоящее время имеются веские основания считать, что точность некоторых новых методов так велика, что данные по аминокислотному составу можно использовать для получения сведений, имеющих важное значение в исследовании структуры белка. [23]
Ясно, что для проведения параллельных опытов нужно иметь либо несколько автоматических установок, что с финансовой точки зрения допустимо лишь для небольшого числа лабораторий, либо большой штат. Однако во многих случаях возникает необходимость проведения большого числа анализов. Например, при исследовании структуры белка для определения полной аминокислотной последовательности белка со средним молекулярным весом требуется проделать около 3 - 4 тыс. анализов. [24]
 |
Принцип масс спектрометриче ского метода определения аминокислотной последовательности пептидов. [25] |
При ионизации полевой десорбцией масс-спектры пептидов состоят практически из одних молекулярных ионов. Шимониши был разработан метод исследования структуры белка путем непосредственного анализа смеси пептидов, получаемых после ферментативного гидролиза. [26]
Эти методы были с самого начала описаны с большой полнотой и четкостью и не претерпели до настоящего времени никаких принципиальных изменений. В то же время точность этого метода была так велика, что данные, полученные при его помощи, стало возможно с уверенностью использовать для исследования структуры белков. [27]
Применение люминесценции для аналитических целей включает широкую область использования ее для идентификации веществ, для обнаружения малых концентраций веществ, для контроля изменений, претерпеваемых веществом, для определения степени чистоты веществ. Широко применяются измерения люминесценции при изучении кинетики обычных химических реакций. Высокая чувствительность метода позволяет фиксировать малую степень превращения веществ, а иногда по люминесценции промежуточных соединений становится возможным установить механизм химической реакции. Люминесцентные методы используются в биологии, в частности для исследования структуры белков методом флуоресцентных зондов и меток. [28]
Применение люминесценции для аналитических целей включает широкую область использования ее для идентификации веществ, для обнаружения малых концентраций веществ; для контроля изменений, претерпеваемых веществом; для определения степени чистоты веществ. Широко применяются измерения люминесценции при изучении кинетики обычных химических реакций. Высокая чувствительность метода позволяет фиксировать малую степень превращения, а иногда по люминесценции промежуточных соединений становится возможным установить механизм химической реакции. Люминесцентные методы используются в биологии, в частности, для исследования структуры белков методом флуоресцентных зондов и меток. [29]
Белки HL-A должны быть олигомерными. Поэтому нет необходимости в ковалентной связи легких цепей с тяжелыми; такая связь должна - быть только между тяжелыми цепями. Диссоциация и реассоциация легких цепей не могут нарушить молекулярной специфичности. Трехмерная структура белков HL-A была предсказана на основании данных по их специфичности и известной структуре иммуноглобулинов. Таким образом, физиологические данные способствуют появлению рабочих гипотез при исследовании структуры белка. [30]
Страницы: 1 2 3