Cтраница 4
У фага Т7 встречается еще один способ временной регуляции транскрипции - образование фагоспецифической РНК-пол имеразы. Схематически геном этого вируса можно разбить на две области: меньшая ( - 20 % генома) соответствует левому концу генетической карты и транскрибируется на ранней стадии инфекции, а большая содержит поздние гены. В начале ранней области располагаются по соседству несколько мощных промоторов, узнаваемых клеточной РНК-полимеразой, а заканчивается этот район не менее мощным р-независимым терминатором. Внутри ранней области имеются, дополнительные слабые промоторы и слабые р-зависимые терминаторы, которые обеспечивают тонкую настройку работы ранних генов. [46]
Далее было показано, что во многих случаях мутации, первоначально определявшиеся чисто операционально как дискретные фенотипические признаки, обязанные своим существованием конфигурационным изменениям аллелей различных гипотетических генов, сопровождаются наблюдаемыми структурными изменениями небольших, но вполне определенных участков хромосом. Наконец, оказалось, что порядок расположения таких морфологически различающихся участков на хромосоме совпадает с порядком расположения мутантных локусов на генетической карте ( фиг. [47]
Все это является прямым следствием закона генетической рекомбинации. Поэтому данные о вероятности трансформации могут быть использованы для построения генетических карт, в частности для определения протяженности различных генетических маркеров на генетических картах. [48]
Легко видеть, что относительное расположение аминокислотных замещений в полипептидных фрагментах, выделенных из мутантных клеток, идентично относительному расположению соответствующих мутантных участков на генетической карте цистрона А. [49]
В скобках показаны маркеры, локализованные ориентировочно. Генетическая карта, построенная в единицах частот рекомбинации, хорошо согласуется с этой картой, построенной в единицах времени. Одна единица времени ( соответствующая приблизительно 106 нуклеотидным парам) равна 22 единицам рекомбинации. [50]
Первое указание на то, что клетка идет действительно по этому второму пути, было получено во время поисков того места в геноме, в котором расположены ферменты биосинтеза аргинина. Оказалось, что на генетической карте они располагаются рядом друг с другом и притом в той же последовательности, в какой один за другим включаются ферменты. [51]
Таким образом, анализ хромосом слюнных желез подтвердил результаты моргановской группы исследователей, показавших, что гены расположены в хромосомах в определенном линейном порядке. Вместе с тем было выяснено, что перекрест нельзя считать надежным критерием действительных расстояний между генами. Некоторые гены, на генетических картах лежащие близко друг к другу, оказались далеко друг от друга в хромосомах слюнных желез. [52]
Поэтому было высказано предположение, что каждая аминокислота определяется сочетанием по меньшей мере из трех нуклеотидов, которые могут дать 64 комбинации ( 43 64), что более чем достаточно для кодирования двадцати аминокислот. Крик и его сотрудники [54-56] привели весьма веские доводы в пользу триплетной теории и доказали, что участок полинуклеотида, названный ими кодоном, состоит из трех оснований. Как показал Бензер с помощью тщательно составленной генетической карты фага Т4, от одного определенного участка ДНК зависит, сможет или нет фаг заразить К-штамм Escherichia coli. [53]
Мутагенезом занимаются обычно на мужских клетках, так как они могут передать свое измененное свойство женским клеткам при конъюгации, обратное же невозможно. Следовательно, наш мутант имеет генетический шифр HfrP-Sms. Чтобы изучить его положение на генетической карте по вероятностям рекомбинации, скрещиваем его с женским штаммом F-P Smr. Образуются женские клетки-рекомбинанты с цистроном Р -, полученным от изучаемого мутанта. [54]