Пептидные карты

Cтраница 1

Разделение пептидов методом i ь фильтрации. [1]

Пептидные карты удобно применить также для выделения радиоактивно или флуоресцентно меченных пептидов. [2]

Пептидные карты НЬА и HbS, полученные таким образом, различаются очень мало - лишь положением пятна, соответствующего одному из пептидов. [3]

Метод пептидных карт на одном листе бумаги сейчас следует рассматривать скорее как аналитический, чем как препаративный. При препаративном разделении пептидов в тех же условиях обычно смесь пептидов последовательно разделяется методами электрофореза и хроматографии в несколько приемов, каждый раз нанося пробу во всю ширину бумаги. После проведения электрофореза вырезают полосы бумаги таким образом, чтобы в середине и по трем краям оставались узкие полоски бумаги. После проявления этих полосок нингидрином вырезанные полосы вставляются обратно, и на них карандашом отмечаются пептидные зоны. Подобные трудоемкие операции связаны с необходимостью иметь достаточное количество вещества для дальнейшего анализа. [4]

Метод пептидных карт представляет собой сочетание бумажной и тонкослойной хроматографии с высоковольтным электрофорезом. В качестве носителей используют силикагель или порошок целлюлозы. Вначале проводят хроматографию, для чего пробу наносят в точку вблизи одной стороны бумаги или пластинки, а затем под углом 90 проводят высоковольтный электрофорез. Метод применяют для разделения смеси низкомолекулярных соединений. [5]

Методика получения пептидных карт или отпечатков пальцев очень полезна при определении идентичности полипептидных цепей. Согласно этой методике, белок обрабатывают трипсином, который избирательно гидролизует пептидные связи, образованные карбоксильными группами основных аминокислот, аргинина и лизина. Образующаяся смесь пептидов разделяется с помощью хроматографии и электрофореза. Эквивалентный вес полипептидной цепи рассчитывают по количеству аргинина и лизина в белке и числу разных пептидов, получаемых при трипти-ческом гидролизе. [6]

Метод составления пептидных карт, получивший образное название метод отпечатков пальцев, используется при определении сходства или различия гомологичных белков по первичной структуре. Белок инкубируют с каким-либо протеолитическим ферментом. Часто порции белка инкубируют как с пепсином, так и с трипсином. [7]

При сравнении полученных пептидных карт различных Б оказывается, что все идентичные пептиды располагаются в определенных ( одних и тех же) местах, за исключением пептидов, по к-рым Б отличаются друг от друга Этим методом впервые обнаружено, что при замене одного остатка глутаминовой к-ты в молекуле гемоглобина на остаток валина образуется серповидноклеточный гемоглобин, встречающийся при одном из видов анемии. Методом пептидных карт изучают генетич. [8]

Рассмотрим теперь метод пептидных карт. [9]

Предложен [201] метод оценки качества пищевых продуктов путем анализа пептидных карт, полученных на тонких слоях целлюлозы. Пептидные карты получают хроматографией проб на пластинке в одном направлении в системе янбутанол - уксусная кислота - пиридин - вода и электрофореза в пиридин-ацетатном буфере при рН 6 5 в перпендикулярном направлении. [10]

Более быстрым методом разделения пептидов энзиматиче-ского гидролизата является метод пептидных карт ( отпечатка пальцев, или фингерпринта), сочетающий высоковольтный электрофорез и хроматографию на бумаге. С помощью этого метода возможно сопоставление пептидных смесей, получаемых при расщеплении различных белков, и выявление столь малых различий в аминокислотном составе отдельных пептидов, как замещение единичной аминокислоты какой-либо другой. Такие различия имеют большое значение при сравнительном изучении гомологичных белков различных видов растений и животных, а также при определении генетических изменений в структуре белка, возникающих в результате точечной мутации. [11]

Авторы работы [40] указывают, что за день можно приготовить 8 пептидных карт. На рис. 21 представлена пептидная карта триптического гидролизата миозина. [12]

Дальнейшие доказательства структурных различий между трансферрином и лактоферрином были получены в результате исследования пептидных карт, полученных путем протеолитического расщепления этих белков. [13]

Камера для тонкослойного электрофореза. [14]

Большой интерес представляет тонкослойная модификация [40] бумажного фингерпринта по Инграму, позволяющая в десять и более раз сократить время получения пептидных карт ( фингер-принтов) и существенно уменьшить количество анализируемого триптического гидролизата. [15]

Страницы: 1 2 3