Пептидные карты

Cтраница 2

Для упрощения переноса исследуемого материала из одной системы разделения в другую предложен прием пришивания, который используют при электрофорезе на бумаге, анализируя пептидные карты. Участок фильтровальной бумаги, содержащий фракцию исследуемого материала, выделенную хроматографией или электрофорезом, вырезают и затем пришивают на швейной машине к новому листу фильтровальной бумаги. Этим приемом устраняется необходимость элюирования, которое обычно сопровождается нежелательными потерями материала. Фактически можно ограничиться элюи-рованием только на конечном этапе очистки. [16]

Разметка листа бумаги и результаты разделения пептидов методом двухмерной хроматографии. [17]

Электрофорез аминокислот и пептидов на бумаге проводили методом Михля с охлаждением инертными жидкостями [69], который может быть успешно использован даже для получения пептидных карт. [18]

Полученные гидролизаты анализируют различными методами: гель-хроматографией, ионообменной хроматографией, электрофорезом и хроматографией на бумаге и в тонком слое, электрофорезом в поли-акриламидном геле, методом пептидных карт на бумаге или в тонком слое ( в одном направлении пептиды подвергаются электрофорезу, в другом - хроматографии) и др. При этом пептиды, содержащие остат ки аргинина, триптофана и гистидина, могут быть открыты с помощью специфических цветных реакций ( с. Выбор метода диктуется величиной ( молекулярной массой) и характером пептидов гидролизата. [19]

Протеиназа, найденная во фракции 4, отличалась от химотрипсино-подобных протеиназ, образуемых этим актиномицетом. Пептидные карты, полученные при действии на лизоцим протеиназы 4 и панкреатического трипсина, оказались также почти полностью тождественными. [20]

Предложен [201] метод оценки качества пищевых продуктов путем анализа пептидных карт, полученных на тонких слоях целлюлозы. Пептидные карты получают хроматографией проб на пластинке в одном направлении в системе янбутанол - уксусная кислота - пиридин - вода и электрофореза в пиридин-ацетатном буфере при рН 6 5 в перпендикулярном направлении. [21]

Пептидные карты позволили идентифицировать дефектные пептиды и точно установить природу аминокислотных замещений в большом числе различных ауксотрр-фов по триптофану. Когда это было сделано, оказалось, что мутациям, локализованным очень близко друг к другу, соответствовали аминокислотные замещения в непосредственно ( или очень близко) прилегающих друг к другу участках полипептидной цепи. [22]

При сравнении полученных пептидных карт различных Б оказывается, что все идентичные пептиды располагаются в определенных ( одних и тех же) местах, за исключением пептидов, по к-рым Б отличаются друг от друга Этим методом впервые обнаружено, что при замене одного остатка глутаминовой к-ты в молекуле гемоглобина на остаток валина образуется серповидноклеточный гемоглобин, встречающийся при одном из видов анемии. Методом пептидных карт изучают генетич. [23]

Наиболее четкая картина пептидных карт получается на бумаге Ватман 3 ММ. [24]

Пептидные карты трипсиновых пептидов гемоглобина А и гемоглобина S. На карте гемоглобина S смещено положение всегр одного пептида ( показанного красным цветом, содержащего генетически измененную аминокислоту. [25]

Исследователи сделали вывод, что гемоглобин S должен содержать несколько меньше отрицательно заряженных R-групп, чем гемоглобин А, Позднее Верной Инграм придумал довольно простой экспериментальный способ, позволяющий более точно локализовать различия в полипептидных цепях гемоглобина S и гемоглобина А. Предложенный им метод пептидных карт и поныне широко используется для выявления генетических разновидностей не только гемогло-бинов, но и других белков. Инграм обработал оба гемоглобина, S и А, трипсином, который разрывает только те пептидные связи, в которых карбоксильная группа принадлежит остаткам аргинина или лизина ( разд. Это привело к образованию пептидных фрагментов 28 сортов, поскольку в а - и р-цепях содержится в общей сложности 27 остатков лизина и аргинина. Смесь пептидов, полученных при расщеплении каждого гемоглобина, была нанесена на фильтровальную бумагу, смоченную буферным раствором, и подвергнута электрофорезу, в результате чего пептидные фрагменты разделились, хотя и не полностью, на отдельные зоны. После того как фильтровальная бумага была высушена, через нее пропустили буферный раствор с другим значением рН для хроматографиче-ского разделения пептидных фрагментов в направлении, перпендикулярном направлению электрофореза ( разд. Когда бумага была снова высушена и в прогретом состоянии обработана нин-гидрином ( разд. Как видно из рис. 8 - 22, гемоглобин S отличается от гемоглобина А по положению на пептидных картах только одного пятна, из чего следует, что в гемоглобине S содержится всего лишь один пептид, отличающийся по своему заряду от соответствующего пептида гемоглобина А. [26]

Высокий процент в большинстве белков лизина и аргинина приводит при гидролизе трипсином к появлению сравнительно большого числа относительно мелких пептидов. Их анализируют методом пептидных карт на бумаге или в тонком слое, а также с помощью хроматографии на колонках и электрофорезом. [27]

Количество р-липопротеидов в сыворотке крови крыс и удельная радиоактивность ( 72 ч после облучения в дозе 309 6 мКл / кг. [28]

Другим компонентом а-глобулиновой фракции, наиболее подверженным постлучевым изменениям, является гаптоглобин. Анализ аминокислотного состава, пептидных карт ферментативных гидролизатов, углеводных компонентов и иммунных свойств позволил прийти к выводу о том, что первичная структура таптоглобина и его физико-химические свойства при лучевом поражении не меняются. Возрастание концентрации этого белка в сыворотке крови, по мнению А. В. Поспеловой, обусловливается усилением его синтеза клетками печени. [29]

Некоторые мутантные гемогло-бины человека1. [30]

Страницы: 1 2 3