Cтраница 2
Такегами и др. [25] сообщили, что при обработке этилового эфира сс-бромпропионовой кислоты раствором КСо ( СО) 4 в толуоле при 0 в атмосфере СО ( 1 атм) и расщеплении образующегося продукта иодом получают оба ожидаемых эфира - этиловый эфир метилмалоновой кислоты и возникший в результате перегруппировки диэтиловый эфир янтарной кислоты, причем последний в меньшем количестве. Однако при 25 преобладает эфир янтарной кислоты. [16]
Не возможна изомеризация без метилмалонил - КоА - мутазы. При отсутствии этого фермента в моче, крови и тканях накапливается метилмалоновая кислота. В результате нарушается состав крови, происходят патологические изменения в пищеварительном тракте, наблюдается заболевание центральной нервной системы. И еще, об этом говорилось в самом начале этой части, может быть летальный исход, если нарушен транспорт витамина В12 в кровеносную систему самого организма. [17]
Метилдодекановая кислота была получена по методике Кэйзона, Аллингера и Уильямса3 следующим образом. В делительную воронку наливают 383 г ( 2 2 моля) диэтилового эфира метилмалоновой кислоты, который в течение 20 мин. [18]
Метиловый эфир 2-карбэтокси - 4-метил - 3-фенилглутаро-боы - 0 ] 8 кислоты. В соответствии с приведенной ниже методикой Михаэля и Росса [1], 20 г метилового эфира метилмалоновой кислоты добавляют к суспензии этилата натрия ( приготовленного из 2 6 г натрия) в сухом эфире. Затем к смеси прибавляют 20 г этилового эфира коричной кислоты и всю смесь нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 6 час. Смесь охлаждают, прибавляют раствор 1 г уксусной кислоты в 50 мл воды и эфирный слой отделяют. Водный слой экстрагируют эфиром и соединенные вместе эфирные экстракты промывают 10 % - ным раствором соды и водой. [19]
Такого рода обработка служит для удаления неизменившегося малонового эфира. Михаэльг показал, что такая обработка полностью удаляет неизменившийся малоновый эфир и почти совсем не затрагивает этиловый эфир метилмалоновой кислоты. В случае применения бромистого метила в качестве метилирующего агента этилового эфира диметилмалоновбй кислоты не образуется. [20]
У больного с клиническими проявлениями ацидоза ( снижение рН крови и мочи) в моче были обнаружены значительные количества метилмалоновой кислоты. Известно, что при скармливании здоровым животным метилмалоновой кислоты она превращается в янтарную кислоту. [21]
Оксиизобутирил-кофермент А, по-видимому, превращается в р-оксиизомасляную кислоту, которая может переходить в полуальдегид метилмалоновой кислоты. Для последнего соединения возможно переаминирование с образованием р-аминоизомасляной кислоты ( являющейся также продуктом распада тимина) или окисление в метилмалоновую кислоту. [22]
У жвачных основным источником энергии является не глюкоза, а низшие жирные кислоты - уксусная, пропионовая, в меньшей степени масляная и др., образуемые микрофлорой рубца в процессе сбраживания корма. Поскольку путь метаболизма пропионовой кислоты лежит через образование метили ал онил - СоА, то в отсутствие витамина Bi2 она вместе с метилмалоновой кислотой накапливается в крови и вызывает у жвачных потерю аппетита и истощение, столь характерные для дефицита кобальта. Содержание этих кислот в моче жвачных может служить надежным признаком недостаточности кобальта еще задолго до наступления клинических признаков акобальтоза. Таким образом, у жвачных высокая потребность в витамине Bi2 сочетается с низкой эффективностью его синтеза и усвоения, делающими их особенно восприимчивыми к дефициту кобальта по сравнению с другими видами животных. [23]
Неочищенный сложный эфир ( около 300 г) встряхивают точно в течение 1 мин с холодным раствором 10 г едкого натра в 30 мл воды; щелочной слой отделяют, а эфир промывают разб. Михаэль показал, что такое экстрагирование обеспечивает полное удаление не вступившего в реакцию малонового эфира и при этом почти не затрагивается диэтиловый эфир метилмалоновой кислоты. [24]
Этот фермент осуществляет одну из стадий удивительной последовательности реакций, необходимых для поддерживания нормального состояния организма человека. Таким путем пропионил - СоА, возникающий, в частности, в результате деградации жиров, связывается посредством сукцинил - СоА с циклом Кребса, а накапливание токсичной метилмалоновой кислоты предотвращается. В случае редкого наследственного заболевания у детей, метилмалонилкацидурии [120], нормальное функционирование метилмалонил - СоА - мутазы нарушается. В случае одной из форм болезни ( чувствительной к Bi2) имеет место недостаток кофактора фермента в силу повреждения биосинтеза AdoCbl. Имеется также другая разновидность заболевания, нечувствительная к лечению кобаламином, возникающая из-за дефекта в структуре фермента. [25]
Метилдодекановая кислота была получена по методике Кэйзона, Аллингера и Уильямса3 следующим образом. В трех-горлую колбу, снабженную механической мешалкой с затвором, капельной воронкой и эффективным обратным холодильником, помещают 1 4 л абсолютного этилового спирта, затем при перемешивании постепенно прибавляют маленькими кусочками 48 3 г ( 2 1 г-атома) металлического натрия - В делительную воронку наливают 383 г ( 2 2 моля) диэтилового эфира метилмалоновой кислоты, который в течение 20 мин. [26]
У больного с клиническими проявлениями ацидоза ( снижение рН крови и мочи) в моче были обнаружены значительные количества метилмалоновой кислоты. Известно, что при скармливании здоровым животным метилмалоновой кислоты она превращается в янтарную кислоту. [27]
Как в этом, так и в аналогичных 5М случаях конденсация проводится так же, как и при простом алкилировашш малонового эфира. Однако иногда реакция проходит ненормально, и получаются изомеры ожидаемого вещества. Если к горячему спиртовому раствору 82 г эфира метилмалоновой кислоты и этилата натрия из 10 8 г металла прилить 92 г нагретого эфира с-бромизомаслянсй кислоты и смесь кипятить до исчезновения щелочной реакции, то образуется с выходом 44 % теоретического количества эфир 1 3-диметилнропан - 1, 3, 3-трикарбоновой кислоты686 вместо ожидаемого эфира триметилэтенилтрикарбоновой кислоты. [28]
Именно так обстоит дело в организме животных с аланином, валином, лейцином и изолейцином. При этом наблюдаются некоторые отклонения от стандартной последовательности стадий ( 3-окислеиия, характерной для жирных кислот ( рис. 9 - 1); например, в случае валина эта последовательность реакций соблюдается лишь до стадии присоединения воды с образованием р-оксипроизводного. Последнее превращается в свободный 3-оксиизобутират, дальнейшим окислением которого в полуальдегид метилмалоновой кислоты процесс р-окисления завершается. [29]
Витамин В12 служит коферментом для некоторых ферментов, например для фермента, катализирующего реакцию изомеризации метил-малоновой кислоты НООССН ( СН3) СООН до янтарной. Некоторые дети заболевают метилмалоновой аценурией, при которой концентрация ме-тилмалоновой кислоты в крови и моче становится очень большой. Это является следствием генетического дефекта - в организме образуется недостаточное количество необходимого фермента, а следовательно, не осуществляется превращение метилмалоновой кислоты в янтарную кислоту. Возможное объяснение данного эффекта заключается в следующем: больной вырабатывает неполноценные апоферменты, характеризующиеся очень малой константой скорости реакции соединения с коферментом, в результате чего при равновесии лишь небольшая доля поступающего с пищей апофер-мента превращается в активный фермент. Между прочим, из уравнения (14.4) следует, что количество апофермента, превращающегося в активный фермент, возрастает с увеличением концентрации кофермента. [30]