Аминокомпонент
Cтраница 1
 |
Принцип синтеза пептидов с ix. t v. [1] |
Аминокомпонент пропускается через колонки с полимерными активированными эфи-рами различных защищенных аминокислот в заданной последовательности, определяемой структурой синтезируемого пептида. [2]
В качестве аминокомпонентов используются пиперазин, эти-лендиамин, диоксиэтилэтилендиамин, N N - диметилэтилендиамин, диэтилентриамин ( основание и солянокислая соль), триэтилен-тетрамин ( основание и уксуснокислая соль), этаноламин, цикло-гексиламин или его солянокислая соль, солянокислые соли мор-фолина, пиперидина, тетраметилэтилендиамина, 1 2-диметилпро-пилендиамин, лауриламин, аминоэтансульфокислый натрий, солянокислый додециламин, 3-аминоэтиламид фталевой кислоты, гуанидин и его роданид, гликоколь и 3-пиперидопропиламин. [3]
В качестве аминокомпонентов используются пиперазин, эти-лендиамин, диоксиэтилэтилендиамин, N N - диметилэтилендиамин, диэтилентриамин ( основание и солянокислая соль), триэтилен-тетрамин ( основание и уксуснокислая соль), этаноламин, цикло-гексиламин или его солянокислая соль, солянокислые соли мор-фолина, пиперидина, тетраметилэтилендиамина, 1 2-диметилпро-пилендиамин, лауриламин, аминоэтансульфокислый натрий, солянокислый додециламин, 3-аминоэтиламид фталевой кислоты, гуанидин и его роданид, гликоколь и 3-пиперидопропиламин. [4]
Для полного ацшшрования аминокомпонента применяют двойной из-1 быток пентафторфенилового эфира А-защищенной аминокислоты, время I образования пептидной связи 0 - 30 мин, полноту реакции контролируют ТСХ. После высушивания органический растворитель удаляют в. Хлоргидрат аминокомпонента осаждают эфиром, вромывапг и cy & j пендируют в органическом растворителе, затем третичным оонованием j доводят рН раствора до 7 5 - 8 5 и весь цикл операций повторяют онова) Время одного цикла - 65 - 85 мин. Пример синтеза биологически активного пептида приведен в Приложении. [5]
 |
Основной принцип пептидного синтеза. [6] |
Вторая аминокислота Б ( аминокомпонент) атакует активированный карбоксильный компонент аминогруппой с образованием пептидной связи. Незащищенная ами-нофункция карбоксильного компонента А тоже может реагировать, что приводит ( рис. 2 - 4) к нежелательным побочным продуктам - линейным и циклическим пептидам. Из этого следует вывод, что для однозначного течения пептидного синтеза следует временно блокировать все функциональные группы, не участвующие в образовании пептидной связи. [7]
Однако лучше в качестве аминокомпонента в синтезе пептидов использовать С-защищен-ные производные, например хлоргидрат метилового эфира [2161], бромгидрат tt - нитробензилового эфира [2163] и грет-бути-ловый эфир [48] глутамина. При взаимодействии формил-ь-глутамина с фенилдиазометаном образуется бензиловый эфир формил - L-глутамина; однако попытки деформилировать это соединение оказались неудачными. Необходимо соблюдать особую осторожность при выделении свободного эфира аминокислоты из хлоргидрата метилового эфира L-глутамина перед его введением в пептидный синтез. Отмечено, что иногда при щелочном гидролизе полностью защищенных глутаминсо-держащих пептидов образуются производные изоглутамина. Очень полезным соединением для синтеза пептидов с остатком глутамина в середине цепи является трет-бутилоксикарбонилгидразид L - глутамина ( [2038]; ср. [8]
Однако лучше в качестве аминокомпонента в синтезе пептидов использовать С-защищен-ные производные, например хлоргидрат метилового эфира [2161], бромгидрат га-нитробензилового эфира [2163] и трет-бути-ловый эфир [48] глутамина. При взаимодействии формил-ь-глутамина с фенилдиазометаном образуется бензиловый эфир формил - L-глутамина; однако попытки деформилировать это соединение оказались неудачными. Необходимо соблюдать особую осторожность при выделении свободного эфира аминокислоты из хлоргидрата метилового эфира t - глутамина перед его введением в пептидный синтез. Отмечено, что иногда при щелочном гидролизе полностью защищенных глутаминсо-держащих пептидов образуются производные изоглутамина. Очень полезным соединением для синтеза пептидов с остатком глутамина в середине цепи является грет-бутилоксикарбонилгидразид L-глутамина ( [2038]; ср. [9]
Вторым продуктом реакции ДЦГК с аминокомпонентом является дицикло-гексшшочевина, которая плохо растворяется в органических растворителях и легко отделяется фильтрованием. Синтез пептидов ДЦГК-мето - дом идет с высокими выходами ( 70 - 90 %), но может сопровождаться значительной рацемизацией и нежелательными побочными реакциями. Так, реакция ацилпептидов с эфирами аминокислот или пептидов в. ДЦГК сопровождается значительной рацемизацией, а введение в полип ептзвдную цепь остатков глутамина или аспарагина часто сопровождается образованием нитрилов. [10]
Для хроматографического разделения на бумаге полиамидных гидролизатов на аминокомпоненты ( e - аминокапроновая кислота и гексаметилендиамин) в качестве растворителя оказывается пригодной смесь из 75 частей вторичного бутанола, 15 частей муравьиной кислоты ( 88 % - ной) и 10 частей воды. Аминокомпоненты определяются по флюоресценции или путем обработки реактивом Зангера, реактивом Паули или раствором нингидрина. Амино-капроновая кислота перемещается в 4 раза дальше, чем гексаметилендиамин. [11]
О, S или Se; R - остаток аминокомпонента; R, - остаток карбоксильного компонента; R2 - замешенный или незамещенный алкиловый или ариловый эфир. [12]
Применение О, И - Л - аминокиолот в качестве аминокомпонентов очень удобно, поскольку в отличие от аминокислот указанные производные хорошо растворимы в растворителях, применяемых для синтеза пептидов, а С-защитяая ТЖУ-группа легко удаляется при промывании продукта реакции растворами кислот. [13]
В то же время природа аминокислоты, используемой в качестве аминокомпонента, не столь существенна. [14]
О возможности применения натриевых солей аминокислот или пептидов в качестве аминокомпонентов указаний нет, но можно было бы ожидать выходов ниже 46 - 77 %, которые получались с эфирами аминокислот и вептидов в инертных рас творителях. [15]
Страницы: 1 2 3 4