Cтраница 4
Более лабильные фенильные сложноэфирные группы [112] применяют для защиты концевой карбоксильной группы в присутствии чувствительных к щелочи структур. С другой стороны, С-кон-цевая защита может быть снята, и ступенчатый синтез начинается со свободной аминокислотой в качестве аминокомпоненты. [46]
Выоокий выход и чиотота оннтезируешго пептида позволяют наращивать аолнпептиднув цепь без выделения промежуточного пептида. Полноту реакции ацвлировании проверяют ТСХ; после обработки плаотинкн флуореокамином интеноивность пятна сравнивает визуально о таковой свечения стандартных количеотв аминокомпонента ж, если необходимо, ацилирование проводят повторно. После окончания реакции и разложения избытка смешанного ангидрида непрореагировавшая / - защищенная аминокислота удаляется водным раствором KHCOg, а защищенный пептид в органичеоком растворителе сушится, деблокируется я вводится в конденсацию о новым карбоксильным компонентом. [47]
Этот метод обычно применяется для соединения пептидных фрагментов, заканчивающихся либо оптически неактивным остатком ( глицином), либо устойчивым к рацемизации пролином или же остатками аминокислот с уретановой защитой. При этом, чтобы обеспечить быстрое и почти количественное протекание реакции, используют более одного эквивалента смешанного ангидрида; после завершения ацилирования аминокомпоненты избыток реагента разлагают водной щелочью. [48]
Азидный метод особенно ценен тем, что в общем случае он свободен от рацемизации при проведении реакции только в мягких щелочных условиях, а также поскольку количество защитных групп в полифункциональных боковых радикалах сведено к минимуму. Гидроксигруппы ( серина, треонина и тирозина) и боковые цепи ( аспарагиновая и глутаминовая кислоты), а также концевые кар-боксигруппы аминокомпоненты в процессе пептидного синтеза, проводимого в частично водной среде, могут оставаться незащищенными. [49]
Карбоксизащитные группы этого типа могут применяться для пептидных синтезов только в определенных условиях, так как аминокомпоненты с активированными карбоксильными группами могут вступать в реакцию не только с карбоксильными компонентами, но и давать нежелательные побочные продукты в результате внутри - и межмолекулярной самоконденсации. Для того чтобы обеспечить однозначное течение реакции, в пептидном синтезе применяют карбоксильные компоненты, имеющие более высокий потенциал ацилирования, чем активированная карбок-сизащитная группа аминокомпонента. [50]
Y - N-защитная группа, R - остаток боковой цепи, В - третичное основание, R; - радикал алкилугольной кислоты, R2 - остаток аминокомпонента. [51]
Это существенно упрощает методику выделения в пептидном синтезе. Как говорилось выше, крайне высокая реакционная способность и малая склонность к рацемизации сложных эфиров такого типа связана, вероятно, с образованием стабилизованного водородной связью промежуточного комплекса типа ( 91) с аминокомпонентом. Как можно ожидать, реакции конденсации с участием сложных эфиров n - нитро - и 2 4 5-трихлорфенола ускоряются добавками соединений типа гидроксисукцинимида и гидроксибензотриазола, что, возможно, связано с возникновением сложных эфиров гидроксисукцинимида и гидроксибензотриазола. [52]