Cтраница 4
Подобный катализ ионами водорода должен иметь большое значение и в реакциях нуклеофильных реагентов с фосфорсодержащими соединениями, имеющими биологическое значение. Наибольшей гидролитической устойчивостью при рН 7 0 обладает этиловый эфир, наименьшей - ацетилфосфат. Возможно, что уксусный ангидрид будет гидролизоваться с большей скоростью, чем ацетилфосфат при рН 7 0, но сравнительные данные отсутствуют. [46]
Электростатические эффекты в водном растворе являются малыми и изменчивыми, поскольку вода обладает исключительной способностью сольватировать заряды. Гидролиз сложных эфиров фосфорной кислоты протекает лишь при продолжительном кипячении их в концентрированной щелочи, а ацильная группа дианиона ацетилфосфата значительно более стойка по отношению к атаке анионом тиола, чем другие ацильные группы. [47]
Реакции монозамещенных фосфатов подвержены нуклеофильному катализу в значительно меньшей степени, чем реакции ацилпроизводных. Это обусловлено тем, что монозамещенные фосфаты относительно слабо различаются по своей чувствительности к действию различных нуклеофильных реагентов, а фосфорилзамещенное промежуточное соединение не обнаруживает достаточной избирательности по отношению к различным акцепторам фосфорильной группы, в результате чего вместо реакции переноса фосфо-рильной группы преобладает реакция гидролиза. В 1 было указано на нуклеофильный катализ имидазолом в ферментативных и неферментативных реакциях. Проведение реакции в присутствии фторида позволяет зафиксировать промежуточное соединение реакции ацетилфосфата с триэтилендиамином в виде фторфосфата. [48]
Он был также обнаружен в продуктах бактериального дегидрирования ацетальдегида или расщепления ацетоуксус-ной кислоты. Стэдмен и Баркер [36] показали, что ацетилфосфат совершенно неактивен в подобной реакции и, следовательно, неидентичен активной уксусной кислоте. Однако было найдено, что ацетилирование холина и сульфаниламида, протекающее соответственно в экстрактах из органов животных и из печени голубя в присутствии активной уксусной кислоты, может происходить и в ее отсутствие, когда добавлена смесь ацетата и аденозинтрифосфата. Поэтому возможно, что в ферментных системах, встречающихся в организмах животных, ацетилфосфат не обладает активностью донора ацетильной группы, а аденозинтрифосфат ( являющийся, по-видимому, источником фосфатной группы) в сочетании с ацетатом такую активность проявляет. [49]
Для осуществления этого синтеза другие бактерии нуждаются в предварительно синтезированном пантетеине. Эти данные не только помогли выяснить структуру кофермента А, но способствовали также разработке одного из методов изучения кофакторов и других соединений, участвующих в их синтезе. Липман [75] описывают, как, выращивая дрожжи на среде, лишенной пантотеновой кислоты, они получили дрожжи, не содержащие кофермента А. Дрожжи, не содержащие кофермента А, окисляли этанол в ацетат, который у них накапливался, так как в отсутствие кофактора А скорость окисления была низкой. Эти авторы показали также, что скорость синтеза цитрата из ща-велевоуксусной кислоты и ацетилфосфата, катализируемого бесклеточными экстрактами, меняется при добавлении кофермента. [50]