Вирусные белок
Cтраница 1
Вирусные белки могут быть получены генно-инженерным методом, однако нужно учитывать следующие моменты. Как правило, вирусные белки состоят из нескольких полипептидных цепей, в ряде случаев химически модифицированных. Не только в бактериальной, но и в дрожжевой клетке нет структур, осуществляющих созревание таких белков. Следовательно, микробные клетки могут продуцировать только отдельные полипептидные цепи. Это резко снижает или сводит на нет их иммуногенность, которая определяется конформационными антигенными детерминантами, формирующимися в процессе образования третичной или четвертичной структуры белка. Ограниченное применение вирусных белков-антигенов относится к белкам HBS-вируса гепатита В человека и белка VPj-вируса ящура. HBS-антиген, синтезируемый дрожжевыми клетками, давал иммунный ответ, хотя и меньший по сравнению с инактивированным вирусом, однако достаточно высокий. Образовавшийся белок не секретировался из клеток, а в процессе их разрушения и выделения антигена выход его значительно снижался, что ставило под сомнение всю технологическую схему. [1]
Препараты вирусных белков, полученные с использованием методов дифференциального центрифугирования или адсорбции на куриных эритроцитах, всегда содержат значительное количество примесей, обнаруживаемых при помощи электрофореза на бумаге и другими описанными выше методами. Такие препараты содержат низкомолекулярные вещества в виде солей, углеводов, аминокислот и пептидов, которые обычно удаляют с помощью диализа в целлофановых мешках, проводимого в течение трех суток. При этом удавалось достигнуть того же эффекта, что и при диализе, но всего лишь за 30 мин. В процессе обессоливанпя вируса на колонке сефадсксом Г-25 не наблюдалось сколько-нибудь заметного повреждения вирусной частицы даже таких сравнительно легко разрушаемых вирусов, как вирусы гриппа. [2]
Для синтеза вирусных белков используют клетки высших эукариот, имеющих полноценный аппарат созревания сложных белков. [3]
Идентифицируют конформационные антигенные детерминанты вирусных белков с целью создания иммуногенных полипептидных фрагментов и затем синтетических вакцин. Как показали исследования ряда авторов, синтетические пептиды могут реагировать с антителами против целой вирусной частицы. Целенаправленный синтез таких пептидов, содержащих аминокислотные последовательности, характерные для фрагментов тех или иных вирусных белков, является перспективным направлением для создания эффективных синтетических вакцин. [4]
Проблема удаления или инактивирования вирусных белков в препаратах, предназначенных для лечебных целей ( например, в плазме крови или в ее фракциях), сложна, так как большинство методов, применяемых для разрушения вирусов, приводит к одновременному денатурированию других белков. [5]
РНК этих вирусов, которые при синтезе вирусных белков выступают в роли мРНК, реплицируются в клетке-хозяине под действием ферментов, называемых РНК-зависимыми РНК-полиме-разами, или РНК-репликазами. Эти ферменты обычно отсутствуют в клетках E. [6]
Основной механизм их действия сводится к нарушению синтеза некоторых вирусных белков, в частности, М - белка вируса гриппа, а также к подавлению процессов вирусной адсорбции на клетках хозяина. В результате нарушается сборка этого вируса. [7]
Положение о четвертичной структуре высокомолекулярных белков было подкреплено исследованиями вирусных белков, расположение субъединиц которых оказалось упорядоченным в еще большей степени. В вирусе табачной мозаики 2000 совершенно идентичных субъединиц, по размерам приблизительно равных молекуле миоглобина, расположены по спирали, обвивающей стержневую молекулу нуклеиновой кислоты. Полиэдральные формы вирусов обязаны своими правильными очертаниями упорядоченному поверхностному расположению белковых субъединиц. [8]
Полученные результаты свидетельствуют, что гипорамин оказывает подавляющее действие на накопление вирусных белков при добавлении его к клеткам перед адсорбцией вируса на них, при этом непосредственно на синтез вирусспецифических белков в клетках, а также на накопление клеточных белков гипорамин никакого влияния не оказывает. [9]
Научные работы посвящены получению в чистом виде и изучению природы энзимов и вирусных белков. Заложил ( начиная с середины 1930 - х) основы вирусологии. [10]
Представленные результаты исследований совпадают с данными, полученными при изучении действия гипорамина на накопление вирусных белков и в совокупности с ними дают возможность предположить влияние препарата на один из ранних этапов вирусной репродукции - адсорбцию вирусных частиц на поверхности клеток. Однако, для того чтобы сделать окончательные выводы, необходимо изучить влияние гипорамина непосредственно на связывание вирионов с клеточными рецепторами известными в настоящее время молеку-лярно-биологическими методами. [11]
Сходные результаты были получены в других лабораториях, где были созданы трансгенные растения, синтезирующие антисмысловые РНК-копии генов вирусных белков оболочки, и проверено, смогут ли эти растения противостоять вирусной инфекции. Во всех случаях растения проявляли устойчивость к инфекции, только если титр используемого инокулята был мал. Общий вывод, который можно сделать из подобных экспериментов, состоит в следующем: антисмысловые РНК-копии генов вирусных белков оболочки обеспечивают гораздо худшую защиту трансгенных растений от вирусных инфекций, чем смысловые копии генов белков оболочки вируса. [13]
На каких матрицах в клетке, инфицированной онкогенным вирусом, происходит синтез: а) новых молекул вирусной РНК; б) вирусных белков. [14]
На основании этих косвенных данных можно предположить, что не исключена возможность подавления под действием радиации синтеза мРНК, ответственной за синтез ранних вирусных белков, в частности некоторых ферментов, участвующих в синтезе вирусной ДНК. Для проверки этого предположения было испытано действие рентгеновского облучения на активность тимидин - и тимидилаткиназы в культурах, инфицированных вирусом герпес. В опытах был испытан лишь один срок - 1 час после заражения, показавший наибольшие изменения в синтезе вирусной ДНК и быстрометящейся РНК. [15]
Страницы: 1 2 3 4