Cтраница 3
Фосфопротеиды ( казеин) имеют фосфорсодержащие группы, глюкопротеиды ( муцин, овальбумин) содержат углеводы, нуклеопро-теиды - нуклеиновые кислоты. [31]
В самое последнее время возникли сомнения в справедливости правила, что максимальное растекание протеинов имеет место в изо-электрической точке. Предварительные измерения Аскью и Даниэлян показали, что на границе между бромобензолом и водными растворами овальбумин дает в изоэлектрической точке минимум растекания. [32]
В результате такие клетки синтезировали большое число дополнительных копий продукта этого гена. Среди них можно назвать гены инсулина, гипофизарного гормона роста ( соматотропина), а - и р-глобинов, рРНК, соматостатина и овальбумина. Была осуществлена и обратная рекомбинация: бактериальные гены были введены в геном ряда эукариотических клеток. [33]
Для некоторых белков, например БСА, выход оказывается одинаковым во всех случаях ( 100 %), в то время как для овальбумина разница уровней выхода очень существенна: 35, 78, 57, 22 и 8 % соответственно. [34]
В настоящее время твердо установлено наличие О-гликозидной связи через оксиаминокислочы ( тип F) для муцинов подчелюстных желез, групповых веществ крови, комплекса гепарина с белком и др. и N-ацил-гликозиламинной связи через аспарагиновую и, вероятно, глутаминовую кислоту ( тип Е) для овальбумина, орозомукоида и других гликопротеинов. Знаменательно, что для образования указанных гликопептидных связей необходимо присутствие специфических аминокислот - оксиамино-кислот и двухосновных кислот, которые обязательно входят в состав природных гликопротеинов в количествах, иногда значительно превышающих их содержание в обычных белках. [35]
Изучение изменения интенсивности флуоресценции с изменением температуры позволяет определить энергию образования комплекса. С помощью флуоресценции легко наблюдать конформационные изменения, приводящие к изменению энергии комплексообразования. Так, раствор натив-ного овальбумина и полиглутаминовой кислоты не флуоресцирует в присутствии бланкофора ВА, но, если водный раствор прокипятить и быстро охладить до комнатной температуры, появляется интенсивная флуоресценция. Этот метод может быть использован для изучения обратимых а-р-превраще-ний в полипептидах и нуклеиновых кислотах. [36]
Гепарин и хондроитинсульфат, которые ранее считали полисахаридами, соединены с белками щелсчелабильными связями. В то же время многие углевод-пептидные полимеры имеют стабильную к щелочи связь углеводов с аминокислотами. Подобной деструкцией яичного альбумина ( овальбумина) [64] и овомукоида удалось получить гетеросахариды, соединенные только с одной аспарагиновой кислотой. Связь этой аминокислоты с остатком углевода устойчива в щелочной среде и более устойчива в кислой среде, чем гликозидные связи. После частичного кислотного гидролиза такого гетеросахарида, связанного с остатком аминокислоты, удалось получить низкомолекулярный фрагмент, состоящий из аспарагиновой кислоты и N-ацетилглюкозамина. При кислотном гидролизе этого соединения выделяются аммиак, аспарагиновая кислота и 2 - ами1НО - 2-дезоксиглю копираноза. [37]
При градиентном элюировании у-глобулина человека был получен очень широкий пик в зоне от 0 005 до 0 13 М фосфата при рН 7 0 в присутствии 0 2 М раствора NaCl. При рехроматографии отдельных частей зоны получены небольшие пики в предполагаемых местах. Были изучены также другие белки, например овальбумин, лизоцим, протаминсульфат и гемоцианин улитки. На колонках из фосфата кальция очищены каталаза печени [7] ( мол. Описан интересный опыт по отделению лактальбумина от других белков. [38]
Несмотря на большое количество примеров, когда секреторные и внутримембранные белки синтезируются с отщепляемой сигнальной N-концевой последовательностью, это, по-видимому, не есть общее правило. Некоторые белки, как оказалось, тоже синтезируются на мембраносвязанных рибосомах, но без отщепления N-концевой или какой-либо иной сигнальной последовательности. К ним относится такой типичный секреторный белок, как овальбумин, а также мембранные белки цитохром Р-450, эпоксидгидратаза, ретинальный опсин, гликопротеид РЕа вируса Синдбис. В этих случаях растущая полипептидная цепь тоже, по-видимому, имеет сигнальную последовательность, индуцирующую присоединение транслирующей рибосомы к мембране эндоплазматического ретику-лума и ко-трансляционный транспорт белка в мембрану, но без сопутствующего процессинга. Для цитохрома Р-450 показано, что его N-концевая последовательность гидрофобна и напоминает сигнальную, но она сохраняется у зрелого белка. Однако N-концевые последовательности овальбумина и опсина не похожи на обычную сигнальную последовательность. Возможно, что либо сигнальную роль здесь выполняют специальные внутренние гидрофобные участки растущего полипептида, либо не столь гидрофобная N-концевая последовательность тоже в каких-то случаях может служить сигналом для присоединения к мембране. Как и в других случаях, взаимодействие с мембраной возможно лишь в течение трансляции; но не после нее; очевидно, сворачивание завершенной цепи как-то блокирует ( экранирует) сигнальную функцию соответствующего участка. [39]
Было предложено также использовать яйцо с его высоким содержанием белка в качестве источника белковых продуктов, использующихся в фармацевтической промышленности. Экспрессия трансгена в клетках репродуктивного пути курицы, где обычно секретируется большое количество овальбумина, может способствовать накоплению соответствующего белкового продукта в яйце, откуда его можно затем выделить. [40]
В результате такого нагревания он коагулирует, образуя нерастворимый коагулят кирпично-крас-ного цвета. Большинство других белков также денатурируется при нагревании приблизительно до такой же температуры. При нагревании его раствора примерно до 65 С и выдерживании в течение некоторого времени при этой температуре овальбумин денатурируется, давая нерастворимый белый коагулят. Это явление наблюдается при варке яиц. [41]
Для того чтобы ликвидировать некоторые недостатки радио-иммуноанализа, такие, как нестабильность радиоактивно-меченных белков или денатурацию белков при введении метки, Хайман и Бломмен [466] применили флуоресцентную антисыворотку или антиген вместо радиоактивных. Первый тип изучен с использованием иммуноглобулина G человека и иммуноглобулина М мыши, а также последнего с овальбумином. В качестве меток применялись флуоресцеин или тетраметилродаминизотиоциа-нат. [42]
Линейные полимеры по своей природе обладают двумя функциональными группами на цепь независимо от ее длины Linear polymers by their very nature possess two functional groups per chain, independent of its length. Независимо oi природы активности метакрилата, она легко уничтожается атомами водорода и молекулами иода, а активность хлоропре-на уничтожается кислородом. Whatever its nature, the activity of methacrylate is readily destroyed by hydrogen atoms and iodine molecules, and that of chloroprene by oxygen Препараты овальбумина и АСТН не адсорбировались независимо от рН первоначального буфера. [43]
Аминокислотный состав альбуминов разнообразен и характеризуется очень низким содержанием или полным отсутствием глицина и сравнительно высоким содержанием ци-стина и метионина. Растворимы в воде и осаждаются из растворов при нейтральной реакции лишь при полном насыщении сернокислым аммонием. К ним относятся: лактальбумин, овальбумин, серум альбумин, миоальбумин и миоген. [44]
Важнейшие фибриллярные белки животных - это кератин и коллаген; белок кератин входит в состав волос, ногтей, мышц, рогов, игл и перьев; коллаген - структурный компонент сухожилий, кожи, костей, соединительной ткани. При кипячении коллаген гидролизуется и образует растворимый в воде белок, называемый желатиной. В теле человека имеются растворимые белки, именуемые глобулярными белками. Альбумины, такие, как сывороточный альбумин, получаемый из крови животных, овальбумин яичного белка, лактальбумин молока, растворяются в холодной воде и слабом растворе соли. Глобулины, например глобулины плазмы крови, фибриноген, глобулин яичного белка, глобулин молока, растворяются в разбавленных растворах солей, но не в холодной воде. [45]