Определение - первичная структура
Cтраница 1
 |
Сверхспирализация двухцепочечной кольцевой ДНК под действием ДНК - гиразы. 1 - кольцевая форма ДНК. 2-сзерхспирализованная форма.| Участок РНК бактериофага. [1] |
Определение первичной структуры ( секвенироианне) Н.к. Секвенирование Н.к. позволяет определить в одном эксперименте последовательность нуклеотидов в ДНК или РНК, содержащих неск. Методы основаны на общем принципе-определении с помощью высоко-разрешающего электрофореза в полиакриламидном геле с точностью до одного нуклеотида длины всех возможных фрагментов секвенируемого участка Н.к., содержащих на одном конце одну и ту же последовательность нуклеотидов ( гомогенный фрагмент), а на другом-один и тот же нуклео-тид. Такие фрагменты получают двумя разл. [2]
 |
Цепь ДНК. [3] |
Определение первичной структуры нуклеиновой кислоты представляет несравненно большие трудности, чем определение первичной структуры белка. Первичная структура нуклеиновой кислоты состоит в последовательности азотистых оснований. До сих пор не расшифрованы последовательности нуклеотидов в ДНК. [4]
Определению первичной структуры предшествует денатурация и разрыв поперечных дисульфидных связей в белке. [5]
Для определения первичной структуры отдельной, химически гомогенной полипептидной цепи в первую очередь методами гидролиза выясняют аминокислотный состав, точнее, соотношение каждой из 20 аминокислот в образце гомогенного полипептида. Затем приступают к определению химической природы концевых аминокислот полипептидной цепи, содержащей одну свободную NH2 - rpynny и одну свободную СООН-группу. [6]
После определения первичной структуры алкилирование цистеина было изучено повторно. С помощью методик выделения пептидов с высоким выходом было показано, что при восстановлении и алкилировании в присутствии фенилпропионата реагирует тот или иной из остатков 138 и 161, но не оба сразу. [7]
 |
Необратимая денатурация белка. [8] |
Дайте определение первичной структуры пептидов и белков. [9]
Для определения первичной структуры белков наибольшее значение имеют два последних метода. [10]
 |
Фрагменты частичного гидролиза 5 -меченого олигонуклеотида фос-фодиэстера 1пй змеиного яда. [11] |
Для определения первичной структуры коротких олигонуклеоти-дов ( до 15 - 20 звеньев) обычно используют метод блуждающего пятна, или сэнгерпринта. Меченный по одному из концов олиго-нуклеотид гидролизуется экзонуклеазой с противоположного конца в условиях неполного расщепления, так что образуется набор всех возможных фрагментов. При расположении полученных таким путем олигонуклеотидов в порядке возрастания длины каждые два соседних продукта будут отличаться друг от друга на одно концевое звено. [12]
При определении первичной структуры белков и нуклеиновых кислот ( см. § 7.7 и 7.8) необходимо расщепление исходных молекул на фрагменты меньшего размера, причем для получения гомогенных фрагментов нужно провести расщепление по строго определенным точкам. Это в основном достигнуто в случае белков вследствие применения специальных протеаз, таких, как трипсин, химотрипсин, эластаза, а в случае нуклеиновых кислот - с помощью специальных эндонуклеаз-рестрикции. Химический синтез генов позволяет достигнуть полинуклеотидов длиной в несколько десятков или одной-двух сотен нуклеотид-ных остатков. [13]
Общая стратегия определения первичной структуры белка включает несколько этапов. Необходимо: ( а) провести количественный анализ гидролизата для того, чтобы определить мольное соотношение имеющихся аминокислот ( см. разд. А / - конец) и карбоксильную группу ( С-конец) ( см. разд. [14]
ЭДМАНА ДЕГРАДАЦИЯ, определение первичной структуры белков и пептидов путем последоват. [15]
Страницы: 1 2 3 4