Определение - первичная структура
Cтраница 3
Реакция с Os04 может использоваться для установления положения тим иди новых звеньев при определении первичной структуры ДНК методом Максама - Гилберта. [31]
Эдманом с использованием этих принципов прибор и применение масс-спектрометра в сочетании с ЭВМ позволяют полностью автоматизировать процесс определения первичной структуры макромолекул. [32]
В главе Белки наряду с подробным изложением физико-химических свойств, методов анализа и разделения цитируются также новые работы по определению первичной структуры и конформации белков. После этого следует описание некоторых важных представителей белков, причем за основу классификации их выбрана биологическая функция. [33]
 |
Разделение пептидов методом ионообменной хроматографии.| Разделение пептидов методом пептидных карт. [34] |
Разделение смеси пептидных фрагментов, образовавшихся при расщеплении полипептидной цепи белка ферментативными или химическими методами, является одним из наиболее сложных и ответственных этапоа в процессе определения первичной структуры. Успех иа этом этапе во многом зависит от опыта, знаний, изобретательности исследователя и его искусства. [35]
БСИ, детально исследованный группой Вйткопа, применяется для решения различных задач [68-72], а именно: а) для расщепления соседней с остатком триптофана пептидной связи при определении первичной структуры белков; б) для определения содержания триптофана; в) для классификации различных состояний остатков триптофана. В соответствующих условиях [73] этот реагент лишь частично модифицирует остатки триптофана в белках. [36]
В последнее десятилетие молекулярная биология и генетика переживают бурзшй период развития, связанный с появлением высокоэффективных методов исследования генетических макромолекул ( ДНК, РНК и белков), включая быстрые методы определения первичных структур, высокоразрешающие методы определения пространственных структур и разнообразные технологии работы с реком-бинантной ДНК. [37]
Ионообменная хроматография на колонках применяется в трех очень важных областях: 1) для качественного и количественного аминокислотного анализа пептидов и белков, дающего ценную характеристику молекул; его можно использовать как средство обнаружения некоторых специфических различий среди белков; 2) для определения аминокислотного состава биологических жидкостей, который дает не только существенную информацию о наличии свободных аминокислот, но и позволяет проследить за изменениями, происходящими в организме под воздействием многих факторов, таких, как окружающая среда, физиологическое состояние и генетическая конституция; 3) для определения первичной структуры белков - чрезвычайно важной задачи биохимии сегодняшнего дня. Многие исследователи занимаются определением аминокислотной последовательности большого числа разнообразных белков. Это дает возможность установить их химическую структуру и изучить ее взаимосвязь с функцией. [38]
Эту процедуру ступенчатого расщепления пептида с N-конца можно повторять многократно, идентифицируя последовательно одну аминокислоту за другой. Метод Эдмана используется в качестве химической основы для определения первичной структуры белков и пептидов. Он реализован в специальном приборе-секвенаторе ( от англ, sequence - последовательность), работающем в автоматическом режиме и позволяющем определить последовательность аминокислот с N-конца пептида до 50 - 60 аминокислотных остатков. [39]
Дисульфидные группы выполняют важные функции по поддержанию нативной конформации белковой молекулы. Локализация положений дисульфидных связей является обязательным этапом при определении первичной структуры белков. [40]
В дополнение к этим препятствиям задача очистки и разделения грубых смесей полинуклеотидов на однородные по молекулярному весу фракции полностью не решена, хотя в этом направлении достигнуты значительные успехи. До тех пор, пока не станут доступными совершенно гомогенные препараты, нельзя достичь большого успеха в определении первичной структуры нуклеиновых кислот. Тем не менее эти проблемы, без сомнения, будут решены, и ряд разрабатываемых в настоящее время методов, как, например, радиоактивная метка концевых групп для повышения чувствительности их обнаружения, облегчит их разрешение. [41]
Главными областями применения аминокислотного анализа ( наряду с идентификацией отдельных аминокислот) являются установление аминокислотного состава белковых гидролизатов, определение первичной структуры белков, а также аналитический контроль пептидного синтеза. [42]
Достижения в области изучения первичной структуры нуклеиновых кислот непосредственно связаны с развитием методов фракционирования олигонуклеотидов. Ускорению этих исследований способствовало наличие очищенных препаратов РНК и рибонуклеаз, специфически расщепляющих одноцепочечную молекулу РНК - К настоящему времени установлена полная нук-леотидная последовательность многих РНК, в том числе многочисленных тРНК, 5S - и 5 85 - РНК, информационных и рибосо-мальных РНК. Работы по определению первичной структуры ДНК начались несколько позднее, однако благодаря использованию электрофоретических методов, позволяющих быстро анализировать смеси, они вскоре достигли того же уровня, что и исследования РНК. В настоящем разделе особое внимание уделено методам электрофореза на бумаге и в геле, используемым для разделения рибонуклеотидов и дезоксирибонуклеотидов. [43]
РЕСТРИКТАЗЫ ( ферменты, рестрикции), группа бактериальных нуклеаз, специфически расщепляющих ДНК. Предохраняют бактериальные клетки от чужеродных ДНК ( напр. Широко используются при определении первичной структуры ДНК, для картирования генов и в генетич. [44]
Несмотря на значительные успехи, достигнутые в последние годы, универсальная схема исследования структуры олиго - и полисахаридов отсутствует. Как следствие, автоматизация определения первичной структуры таких биополимеров на сегодня невозможна. [45]
Страницы: 1 2 3 4