Cтраница 3
Связанная в клетках пероксидаза была весьма устойчивой по отношению к теплу и очень активной. [31]
Первоначально мы приготовляли пероксидазу из тыквы путем осаждения абсолютным спиртом сока, отмытого из измельченного исходного материала, растворения полученного осадка в воде и повторного осаждения спиртом. Однако ввиду того, что сок тыквы содержит много воды, необходимо было прибавлять громадное количество спирта для осаждения пероксидазы; поэтому выходы были чрезвычайно низки. Более удачен нижеследующий способ выделения пероксидазы из корней хрена. [32]
В процессе активирования пероксидаза очень быстро и необратимо теряет свою способность активировать. [33]
В последнем случае пероксидаза проявляет свое полное действие, которое нисколько не нарушается присутствием каталазы. [34]
Окислительное действие системы пероксидаза - перекись водорода распространяется на сравнительно большое число соединений, но не производит глубокого окисления молекул. Оно ограничивается главным образом окислением подвижного водорода фенолов и ароматических аминов, а также иодистоводородной кислоты. Из числа веществ, играющих существенную роль в физиологическом отношении, сахар, например, совершенно не окисляется, по крайней мере в тех условиях, которые я исследовал. [35]
С перекисью водорода пероксидаза образует комплекс, который можно обнаружить спектроскопическим путем. В этом комплексе перекись водорода активируется и становится способной принимать водород, окисляя таким образом другие вещества. [36]
Изменение активности каталазы и пероксидазы под влиянием антнокспдантов отмечено и в эксперименте in vivo. Введение в корм крыс бутилированного гидроксианизола и бутилированного гидро-кситолуола ежедневно в дозах 0 6 и 0 5 г / кг соответственно вызвало в течение 1 - 2 мес. [37]
Раствор ферментов глюкозооксидазы и пероксидазы ( 5 - 6 мл глюкозооксидазы, соответствующих 500 - 600 ед. [38]
В присутствии каталазы, пероксидазы и кониферилового спирта из перекиси водорода образовывалось мало кислорода и весь он усваивался перксидазой даже в присутствии каталазы. [39]
Частичное отделение оксигеназы от пероксидазы можно осуществить также и путем длительной экстракции смеси обеих 30 - 50 % - ным спиртом или диализом против чистой воды. В последнем случае пероксидаза переходит в диализат. [40]
Смесь из 0.10 г пероксидазы, 0.10 г перекиси водорода и 20 см3 воды, распределенная в пяти эрлснмейеровских колбах, исследовалась через 1 - 5 дней. При этом оказалось, что при прибавлении по 1.5 г пирогаллола в 15 см3 воды только первая смесь, простоявшая один день, окрасилась в коричневый цвет; другие остались бесцветными. Таким образом, пероксидаза была почти полностью уничтожена эквивалентным количеством перекиси водорода в течение 24 часов. Для того чтобы определить остаток неразложивпгейпя перекиси в смеси, мы прибавляли к последней по 0.10 г пероксидазы и взвешивали образовавшийся пурнурогалин. [41]
Присутствие двух ферментов, пероксидазы и каталазы, характерно для мельчайших частей живого вещества. Пероксидаза ускоряет окислительное действие перекиси водорода и органических перекисей, каталаза совершенно прекращает это окислительное действие, разлагая перекись водорода на молекулярный инертный кислород и воду. О физиологическом значении этих ферментов можно еще спорить, но их биологическая повсеместная распространенность не оспаривается и неоспорима. Однако существует одно исключение. В настоящее время мы говорим, что дрожжи содержат каталазу, но не содержат пероксидазы. В течение моих исследований над окислительными ферментами я неоднократно имел случай проверять и подтвердить правильность наблюдения Шенбей-на. Мне удалось2 также привести доказательство и a contrario, установив, что незначительные количества пероксидазы, прибавленные заранее к дрожжам, легко могут быть обнаружены посредством обычных реактивов. Если растереть 1 г зимазы ( ацетоновые дрожжи) с 20 см3 воды и прибавить раствор гваякола и перекиси водорода, то смесь остается бесцветной. Если же прибавить к препарату дрожжей последовательно раствор гваякола, 1 каплю активного раствора пероксидазы и перекись водорода, то смесь немедленно окрашивается в красно-коричневый цвет. Окрашивание исчезает более или менее быстро, но вновь появляется при прибавлении перекиси водорода. С пирогаллолом и гидрохиноном получается аналогичный результат. Таким образом, если дрожжи не дают реакции на пер-оксидазу, то это потому, что в них нет этого фермента, а не потому, что реакция пероксидазы перекрывается задерживающими веществами. [42]
Этот фермент похож на другие пероксидазы при использовании таких субстратов, как гваякол, пирогаллол и аскорбиновая кислота, хотя активность хлоропероксидазы в отношении первого из этих субстратов в 10 раз ниже, чем пероксидазы хрена. Хлоропероксидаза похожа на каталазу в том отношении, что она тоже катализирует выделение кислорода из перекиси водорода, хотя и менее эффективно, чем каталаза ( активность около 2 / 6 активности каталазы при рН 4 5), а также в том, что она катализирует окисление этанола перекисью водорода в уксусный альдегид и, вероятно, в муравьиную кислоту. Таким образом, Хлоропероксидаза по своим каталитическим свойствам находится между каталазами и типичными перок-сидазами. Она несколько менее активна, чем пероксидаза хрена, при окислении таких субстратов, как гваякол, и несколько менее активна, чем каталаза, при разложении перекиси водорода. Кроме того, она катализирует реакции хлорирования, на которые каталаза и пероксидаза не влияют. [43]
Данный метод основан на способности пероксидазы катализировать окисление бензидина с образованием окрашенного соединения р-хиноидина-мида. [44]
С помощью сильных восстановителей Пероксидаза может быть восстановлена в соединение закисного железа. [45]