Плазминоген
Cтраница 3
Несмотря на кажущуюся перспективность иммунотерапии, этот метод имеет и ряд ограничений, связанных с применением моноклональных антител животных и процедурой присоединения к ним нужных молекул. Сам процесс химического присоединения весьма неэффективен, присоединение происходит случайным образом, а кроме того, при этом может снижаться ферментативная активность активатора плазминогена или других веществ, используемых в терапии. И наконец, если предполагается многократное введение препарата, необходимо использовать антитела человека, а не животных, чтобы предотвратить возникновение перекрестных иммунных реакций и сенсибилизацию пациента. [32]
Основными регуляторами фибринолиза служат сами ткани, особенно стенки сосудов. Они содержат тканевые лизокиназы, поступающие в кровь и превращающие кровяной проактиватор в активатсф, В тканях найдены также активаторы фибринолиза, которые действуют прямо на плазминоген, превращая его в плазмин. Такой путь активации называют прямым. Часть тканевых активаторов неспособна выделяться в кровь и действует локально, обеспечивая фибринолиз в тканях. Другая часть тканевых активаторов водорастворима и поступает в кровь. Особенно много тканевых лизокиназ и активаторов сосредоточено в микроциркуляторных сосудах, где они синтезируются и депонируются. [33]
Фирма Pharmacia поставляет сорбент Lysine-Sepharose 4B r в котором в качестве лиганда фигурирует закрепленный непосредственно на сефарозе через свою а-аминогруппу лизин. Этот сорбент представляет собой амфотерный обменник, несущий ионогенные группы обоих знаков, определенным образом взаимно ориентированные в пространстве. Плазминоген элюи-руют с сорбента с помощью е-аминомасляной кислоты, которая, по-видимому, выступает в качестве конкурирующего лиганда, а нуклеиновые кислоты - увеличением концентрации NaCl, что свидетельствует в пользу ионного характера их связи с остатками лизина. [34]
Ретрагированный сгусток фибрина в организме человека и животных под влиянием протеолитического фермента плазмы крови-плаз мин а подвергается постепенному рассасыванию с образованием ряда растворимых в воде продуктов гидролиза-пептидов. В норме плазмин находится в крови в форме неактивного предшественника-плаз мин о гена. Превращение плазминогена в плазмин сопровождается отщеплением от полипептидной цепи 25 % аминокислотных остатков. Ведущая роль в этом процессе принадлежит кровяным активаторам. В норме активность кровяных активаторов плазминогена очень низкая, т.е. они находятся в основном в форме проактиваторов. Весьма быстрое превращение кровяного проактиватора в активатор плазминогена происходит под влиянием тканевых лизокиназ, а также стрептокиназы. Стрептокиназа вырабатывается гемолитическим стрептококком и в обычных условиях в крови отсутствует. Однако при стрептококковой инфекции возможно образование стрептокиназы в большом количестве, что иногда приводит к усиленному фибринолизу и развитию геморрагического диатеза. [35]
Его отличительной особенностью являются длительная циркуляция в организме, медленнее выведение и отсутствие связывания с антипротеазами с последующей нейтрализацией. Он обладает значительно большим сродством к фибрину, чем к фибриногену, что обеспечивает его избирательное взаимодействие с фибрином. Таким образом, плазминоген имеет ведущее значение в растворении венозных тромбов. Плазминоген может и должен быть отнесен к фибринолитикам нового поколения. Еще одним его преимуществом является эффективность действия при гипо-плазминогенемии, когда применение активаторов типа стрептазы будет бесполезным из-за отсутствия тканевого плазминогена. Первое исследование лечебного действия плазминогена было проведено В. В. Никольской в 1985 г. в эксперименте на кроликах с созданной автором моделью тромбоза конъюнктивальных, сосудов при помощи подконъюнктивального введения тромбина. Тромбоз сосудов в зоне введения тромбина образовался через 5 мин, при этом определялось явное снижение фибринолитиче-ской активности слезной жидкости. Через 4 ч после моделирования тромбоза вводился субконъюнктивально плазминоген, который вызывал лизис тромба, что отчетливо регистрировалось пр фотографировании на щелевой лампе. [36]
 |
Экзоны ( черные прямоугольники генов Р - и 7 - кРисталлинов мыши и домены ( греческий ключ в составе полипептидной цепи. [37] |
Один из них кодирует структуру характерного белкового домена - пальца. Этот экзон обнаруживается также в гене фибронектина, где он представлен несколькими копиями, разделенными нитронами. Другой экзон гена плазминогена выявлен в гене эпидермального фактора роста, пять остальных экзонов формируют протеазный домен. [38]
Как видно из схемы 2, фибринолиз протекает в 3 фазы. В I фазу образуется кровяной активатор плазминогена, во II фазу он и другие стимуляторы превращают плазминоген в плазмин и в III фазу плазмин расщепляет фибрин до пептидов и аминокислот. Эффективность фибринолиза определяется тем, что при свертывании крови фибрин адсорбирует плазминоген, который превращается в плазмин в сгустке. [39]
Его смешивают с интерфероном, сушат и отливают в цилиндры диаметром 1 мм, которые вводятся подкожно. Оптимальная концентрация интерферона в крови сохраняется до 4 недель. Разработанная система перспективна для введения гормона роста человека, фактора стимуляции гранулоцит-макрофагов и активации тканевого плазминогена. [40]
На специфических иммуно-сорбентах установлены структурные различия между ядерной и митохондриалыюй глутаматдегидрогеназамн. Уаймен и Уоллен [1290] с помощью аффинной хроматографии исследовали соотношения между структурами глутаминовой ( А) и лизиновой ( В) форм плазминогена человека и их взаимодействие с N-концевым активационным пептидом. N-Концевой активационный пептид хро-матографировали на сефарозе с ковалентно связанным плазмино-геном В; 1 0 мкмоль иммобилизованного плазминогена В сорбировал 0 27 мкмоль этого пептида. Адсорбированный пептид мог быть элюирован буфером, содержащим 0 005 моль / л е-аминокапроновой кислоты. Вывод о ее специфическом действии следует из использования для элюирования достаточно низкой концентрацией. При нанесении N-концевого активационного пептида на сефарозу с присоединенным плазминогеном А сорбируется только 0 10 мкмоль. [41]
Для того чтобы установить, какая часть активационного пептида ответственна за специфическое взаимодействие, Уаймен и Уоллен [1290] нанесли триптический гидролизат 1 мкмоль активационного пептида на колонку с плазминоген В-сефарозой. Из пяти пептидов, образующихся после гидролиза трипсином, сорбируется только гептапептид Ala-Phe-Glu-Tyr-His-Ser-Lys, который занимает 41 - 51-положение 81-членного N-концевого пептида. Следовательно, данный пептид ответствен за взаимодействие, которое, по-видимому, имеет важное значение для конформационного состояния молекулы плазминогена. [42]
Его отличительной особенностью являются длительная циркуляция в организме, медленнее выведение и отсутствие связывания с антипротеазами с последующей нейтрализацией. Он обладает значительно большим сродством к фибрину, чем к фибриногену, что обеспечивает его избирательное взаимодействие с фибрином. Таким образом, плазминоген имеет ведущее значение в растворении венозных тромбов. Плазминоген может и должен быть отнесен к фибринолитикам нового поколения. Еще одним его преимуществом является эффективность действия при гипо-плазминогенемии, когда применение активаторов типа стрептазы будет бесполезным из-за отсутствия тканевого плазминогена. Первое исследование лечебного действия плазминогена было проведено В. В. Никольской в 1985 г. в эксперименте на кроликах с созданной автором моделью тромбоза конъюнктивальных, сосудов при помощи подконъюнктивального введения тромбина. Тромбоз сосудов в зоне введения тромбина образовался через 5 мин, при этом определялось явное снижение фибринолитиче-ской активности слезной жидкости. Через 4 ч после моделирования тромбоза вводился субконъюнктивально плазминоген, который вызывал лизис тромба, что отчетливо регистрировалось пр фотографировании на щелевой лампе. [43]
Ассимиляция и нейтрализация гистамина эозинофилами уменьшает изменения в очаге воспаления. При аллергических состояниях, глистной инвазии и антибактериальной терапии количество эозинофилов возрастает. Это связано с тем, что при данных состояниях разрушается ( дегранулирует) большое количество тучных клеток и базофилов, из которых освобождается очень много гистамина, для нейтрализации которого необходимы Эозинофилы. Одной из функций эозинофилов является выработка плазминогена, что определяет их участие в процессе фибри-нолиза. [44]
Используются в медицине ингибиторы протеиназ, в частности плазмина и трипсина. Если плазминоген крови активируется слишком интенсивно и в ней возникает слишком много плазмина, то при этом сильнодействующий фермент разрушит и фибриноген, и другие факторы из системы свертывания крови. При этом свертываемость крови сильно снижается и это часто является причиной обескровливания больных. Синтетический ингибитор - е-аминокапроновая кислота - тормозит активацию плазминогена в плазмин, а при более высоких концентрациях - и действие плазмина, предотвращая этим опасные изменения. Так называемый фактор Кунитца и Нортропа ( инипрол) тормозит действие трипсина и химотрипсина. Ингибиторы подобного рода защищают организм от ферментной интоксикации. [45]
Страницы: 1 2 3 4