Cтраница 3
Зная нуклеотидную последовательность гена, можно определить, какую функцию выполняет его продукт в норме, как нарушается эта функция в результате мутации, в какой степени различные мутации в разных экзонах ответственны за проявление заболевания. [31]
![]() |
Схема определения концевых групп. [32] |
РНК, нуклеотидная последовательность - порядок, в котором нуклеотидные звенья расположены в полинуклеотидной цепи. От этого порядка зависит ее первичное строение. [33]
Ниже приведены нуклеотидные последовательности гена Е2 и аминокислотная последовательность белка шелка. Последовательность между нуклеотидами 972 и 973 не пронумерована, поскольку она не является кодирующей и относится к интрону. [34]
Если известна нуклеотидная последовательность клонированного гена, то в ее составе легко найти районы открытых рамок трансляции, предназначенных для кодирования полипептида. Подставляя кодирующие области гена ( экзоны) под сильный прокариоти-ческий промотор, в клетках бактерий удается наработать соответствующий белок в заметных количествах. Удобно воспользоваться искусственным гибридным геном, который активно экспрессируется в бактериальных клетках и содержит не только экзоны исследуемого гена, но и, например, участок гена бактериальной р-галакто-зидазы, придающей химерному белку ферментативную активность. [35]
При этом нуклеотидная последовательность измененного гена на 96 5 % совпадала с таковой у гена дикого типа. Трансгенные растения, в которых экспрессировался такой слабо модифицированный ген, синтезировали в 10 раз больше токсина, чем растения, трансформированные геном дикого типа. [37]
Если известна нуклеотидная последовательность клонированного гена, то в ее составе легко найти районы открытых рамок трансляции, предназначенных для кодирования полипептида. Подставляя кодирующие области гена ( экзоны) под сильный прокариоти-ческий промотор, в клетках бактерий удается наработать соответствующий белок в заметных количествах. Удобно воспользоваться искусственным гибридным геном, который активно экспрессируется в бактериальных клетках и содержит не только экзоны исследуемого гена, но и, например, участок гена бактериальной р-галакто-зидазы, придающей химерному белку ферментативную активность. [38]
![]() |
Схематическое изображение основных этапов репликации ДНК. Существует некоторая неопределенность относительно точного места действия ДНК-гиразы. [39] |
Благодаря этому нуклеотидные последовательности цепей ДНК оказываются доступными для репликативной системы. ДНК-полимераза может непосредственно удлинять ведущую цепь, добавляя к ее З - концу новые нуклеотиды. Другие специфические белки помогают примазе получить доступ к матрице для отстающей цепи. В результате примаза получает возможность связываться с отстающей цепью и синтезировать РНК-затравки для фрагментов Оказаки. [40]
Если известна нуклеотидная последовательность клонированного гена, то в ее составе легко найти районы открытых рамок трансляции, предназначенных для кодирования полипептида. Подставляя кодирующие области гена ( экзоны) под сильный прокариоти-ческий промотор, в клетках бактерий удается наработать соответствующий белок в заметных количествах. Удобно воспользоваться искусственным гибридным геном, который активно экспрессируется в бактериальных клетках и содержит не только экзоны исследуемого гена, но и, например, участок гена бактериальной р-галакто-зидазы, придающей химерному белку ферментативную активность. [41]
Тщательный анализ нуклеотидной последовательности разных тРНК показал, что все они содержат одинаковый 5 -концевой нуклеотид - ГМФ - со свободной 5 -фосфатной группой. Адапторная функция молекул тРНК заключается в связывании каждой молекулы тРНК со своей специфической аминокислотой. Однако, поскольку между нуклеиновой кислотой и специфической функциональной группой аминокислот нет соответствия и сродства, эту функцию узнавания, точнее, посредника между тРНК и аминокислотой, должна выполнять белковая молекула фермента. [42]
Для определения нуклеотидной последовательности клонированных ДНК используются разные подходы. [44]
Для определения нуклеотидной последовательности протяженных клонированных сегментов сначала подбирают синтетический олигонук-леотидный праймер, комплементарный участку, соседствующему со вставкой, и с помощью диде-зокси-метода секвенируют первые 250 - 300 нуклеотидов. [45]