Cтраница 4
![]() |
Обобщенная схема вторичной структуры рибосомной 5S РНК. [46] |
Из сравнения нуклеотидных последовательностей 5S РНК различных таксонов особенно хорошо видно, насколько эволюционно консервативны рибосомные РНК. Так, человечья 5S РНК отличается от 5S РНК рептилий всего 2 - 3 нуклеотидными остатками, а от 5S РНК лягушек - 7 - 8 остатками. РНК ржи отличается от таковой томата всего 2, а от 5S РНК фасоли - 5 нуклеотидными остатками. Столь же близки между собой 5S РНК различных видов бацилл. [47]
Результаты определения нуклеотидной последовательности 16S рРНК позволяют рассматривать Archaeoglobus как форму, занимающую промежуточное положение между метаногенами и экстремальными термофилами, метаболизм которых связан с восстановлением или окислением молекулярной серы. [48]
Задача установления нуклеотидной последовательности является весьма сложной; практически она успешно решена пока лишь в случае относительно низкомолекулярных РНК, таких, как тРНК и 5S РНК. Имеющие в настоящее время практическое значение методы установления последовательности нуклеотидов в по-ликуклеотидной цепи основаны на частичном расщеплении полинуклеотидов. Поэтому перед рассмотрением основных принципов, с помощью которых производится установление строения полинуклеотидов, и применением этих принципов к различным типам природных нуклеиновых кислот целесообразно коротко остановиться на используемых методах избирательного расщепления полинукле-отидной цепи. [49]
Для определения нуклеотидной последовательности в олигонуклеоти-дах их гидролизовали нуклеазами, как это будет описано далее, и затем идентифицировали продукты гидролиза. Для анализа пуклеотидов, полученных при гидролизе РНК рибонуклеазой TI, наиболее пригодна панкреатическая РНК-аза, и, наоборот, если РНК гидролизовали панкреатической РНК-азой, для анализа полученных нуклеотидов использовали рибонуклеазу TI. В обоих случаях конечные продукты гидролиза одинаковы: они содержат мононуклеотиды Г, Ц и У и олигонуклеотиды с разным числом остатков А, имеющие на З - конце Г, Ц, или У. Большинство этих продуктов можно разделить с помощью электрофореза при рН 3 5 ( фиг. [50]
Для исследования нуклеотидных последовательностей акцепторного конца т - РНК в лаборатории Д. Г. Кнорре был применен кинетический подход. [51]
Чтобы расшифровать нуклеотидную последовательность целой молекулы ДНК, сначала ее фрагментируют с помощью рестрикти-рующей эндонуклеазы. Во второй аликвоте исходную ДНК расщепляют в других местах, используя другую рестриктирующую эндонуклеазу, и получают второй набор фрагментов. После того как секвенирование всех фрагментов второго набора завершено, сравнение двух наборов дает возможность найти участки перекрывания, необходимые для сборки фрагментов первого набора в правильном порядке. В результате может быть установлена нуклеотидная последовательность интересующей нас природной ДНК. Иногда, для того чтобы устранить неясности в некоторых участках последовательности, оставшиеся после первых двух расщеплений, приходится анализировать третий или четвертый наборы фрагментов. [52]
Участок ДНК, нуклеотидные последовательности двух цепей которого обладают осевой симметрией второго порядка относительно центра. [53]
![]() |
Схема событий, происходящих на границе между двумя генами при транскрипции генома вируса везикулярного стоматита.| Схема репликации / транскрипции генома вируса гриппа. [54] |
Горизонтальные линии - вирус-специфические нуклеотидные последовательности; кружки и примыкающие с ним косые отрезки - 5 -коицевые кал-структуры и олннонуклеотиды, происходящие из клеточных траискриптов; волнистые линии - З - концевые поли ( А) - последова-тельности; жирные стрелки - транскрипция; тонкие стрелки - репликация. [55]
Таким образом, нуклеотидная последовательность ДНК представляет собой закодированную инструкцию, определяющую ( при посредстве мРНК) структуру специфического белка. Представление о передаче информации от ДНК через РНК на белок называют центральной догмой молекулярной биологии. Таким путем происходит перенос информации у всех организмов, у которых генетическим материалом служит ДНК. Этот универсальный процесс передачи информации при репликации ДНК, транскрипции и трансляции представлен на приведенной выше схеме ( стр. Эта схема применима к эукариотам, прокариотам и ДНК-вирусам. [56]
Недавно были установлены нуклеотидные последовательности генов Е1 и Е2, кДНК и аминокислотные последовательности кодируемых ими белков шелка ( Regier J. [57]