Cтраница 4
Используют метод нисходящей хроматографии ( см. разд. Для проявления опрыскивают N-CN - индикатором ( см. разд. При этом, кроме величины RF, получают и сведения о природе аминокислоты по характерной для нее цветной зоне. [46]
III указывалось, что первичная структура некоторых полипептидных гормонов ( в частности, вазопрессина и меланоцитстимулирующего гормона) у разных биологических видов не вполне одинакова. Такая же видовая специфичность наблюдается и у белков. В препаратах цитохрома с, выделенных от разных видов, также были обнаружены индивидуальные различия, определяющиеся природой аминокислот в ключевом пептидном сегменте. Помимо этих вариаций, обусловленных видовой специфичностью, встречаются также и различия в белках одного и того же вида, возникшие в результате мутаций. Большинство сведений о влиянии мутаций на структуру белка почерпнуто нами из прекрасных работ Ингрэма. Ингрэм и его сотрудники показали, что нормальный гемоглобин взрослого человека и гемоглобин больных таким наследственным заболеванием, как серповидноклеточная анемия, отличаются только тем, что в определенном положении р-цепи остаток глутаминовой кислоты в аномальном гемоглобине заменен валином. Напомним, что молекула гемоглобина состоит из двух пар идентичных цепей: а - и р-цепей в гемоглобине взрослого человека или ос - и у-цепей в гемоглобине плода. [47]
Однако, если гидролизовать ДНФ-белок лишь частично, можно получить ДНФ-пептиды, исследование строения которых дает указания относительно природы аминокислот, расположенных в пептидных цепях вблизи концевых групп. ДНФ-пептиды довольно хорошо поддаются отделению от незамещенных пептидов и аминокислот путем экстракции органическим растворителем из подкисленного раствора и хроматографическим фракционированием на силикагеле. Смеси ДНФ-пептидов, полученные этим способом, гораздо менее сложны, чем продукты частичного гидролиза необработанного белка, так как отделяются только пептиды, содержащие N-концевые группы исходного белка. [48]
Как видно из табл. 5.2, распределение аминокислот по кодонам весьма неравномерно. Трем аминокислотам - лейцину, серину и аргинину - соответствует по шесть кодонов, пяти аминокислотам - глицину, аланину, валину, пролину и треонину - по четыре, изолейцину - три кодона, лизину, аспартату, аспараги-ну, глутамату, глутамину, фенилаланину, тирозину, гйстидину и цистеину - по два, а метионину и триптофану - по одному кодону. Три кодона - UAA, UAG и UGA - не соответствуют ни одной из аминокислот. Они являются сигналами для прекращения синтеза полипептидной цепи: их называют кодонами-терминатора-ми. В восьми случаях природа кодируемой аминокислоты однозначно определяется первыми двумя нуклеотидами кодона: UC - серии, АС - треонин, CU - лейцин, GU - валин, СС - пролин, CG - аргинин, GC - аланин и GG - глицин. [49]