Cтраница 4
Иногда производные хроматографируют, чтобы добиться падежной идентификации; например, у стероидных спиртов значения Hf должны совпадать с значениями Rf их ацетатов. После устранения влияния карбоксильных групп в порфпринах ( этерификацией) па процесс хроматографии начинают оказывать влияние другие структурные особенности молекулы. К наибольшим успехам к области химии белков принадлежит разработка метода структурного анализа, в котором концевые аминокислоты превращаются в характерные производные, которые и подвергают хрома-тографированию ( см. стр. [46]
Ограничимся для простоты случаем одномерной диффузии и примем, что неподвижная фаза расположена в виде тонкого слоя вдоль потока газа или жидкости. Такая модель точно соответствует газовой капиллярной хроматографии и приближенно может быть использована для описания процесса хроматографии в колонке, наполненной зернистым слоем сорбента. [47]
Существенное влияние на эффективность разделения оказывает геометрия твердого носителя: размеры пор и их распределение. Однако основные возможности изменения селективности разделительных систем связаны с вариациями химической природы твердого носителя и элюента, который в процессе хроматографии разделяется на сорбированную на твердом носителе неподвижную фазу и подвижную фазу, движущуюся на пластинке. [48]
Приготовление водных буферных растворов ( 4 л. [49] |
В табл. 5 приведены данные по составу буферных смесей. Обращается внимание на обязательное удаление из воды С02, иначе при уменьшении рН углекислота в виде пузырьков будет выделяться в колонке и нарушать тем самым процесс хроматографии. Для удаления С02 достаточно перед приготовлением буферных растворов барботировать через воду азот. [50]
Равновесия адсорбции, первоначально очень сильно сдвинутые в сторону образования комплексов, могут измениться таким образом, что фракционируемые вещества начинают мигрировать по колонке с различной скоростью, что характерно для процесса динамической хроматографии. [51]
Для препаративного фракционирования рекомендуется использовать сферические ионообменники. Ими легче заполнять колонку, они быстро оседают при отмывании декантацией и обеспечивают постоянную скорость протекания раствора через колонку в отличие от волокнистых и гранулярных носителей, которые вызывают снижение скорости протекания в процессе хроматографии. [52]
В последнее время наметилась тенденция использовать в качестве сорбентов различные органические материалы синтетического происхождения в отличие от прочно укоренившихся в практике минеральных носителей. В хроматографические операции вовлекаются многие виды полимерных веществ: полистирол, полиакрилонитрил, полиакриламид, полиэфиры, полиуретаны, полиамиды, поливинилпирролидон и др. Такое расширение набора сорбентов можно только приветствовать, так как это позволяет решать более узкие задачи с помощью специализированных и специфических по свойствам сорбентов. Механизм процесса хроматографии на этих вновь вводимых в практику полимерных сорбентах остается недостаточно выясненным. [53]