Реактив - жирар
Cтраница 4
Действие семикарбазида и реактива Жирара на полинуклеотиды чувствительно ко вторичной структуре полимера. Скорость модификации нативной ДНК примерно в 25 раз ниже. Скорость реакции цитозиновых ядер в составе тРНК с семикарбазидом и реактивом Жирара также понижена по сравнению с цитидином. Таким образом, семикарбазид реагирует с тРНК примерно в 5, а реактив Жирара - в 2 5 раза медленнее, чем с цитидином. При участии цитозиновых звеньев полинуклеотида в образовании пар гуанин цитозин модификация этих звеньев идет значительно медленнее, чем в том случае, когда цитозин находится на односпиральном участке полинуклеотида. [46]
Если стероиды восстанавливаются, то их восстановление протекает при практически одном и том же потенциале. При Ег, - 1 54 в ( по отношению к потенциалу дна) восстанавливаются: А4 - андростендион-3 17, А4 - холестенон, дезоксикортикостерон, кортикостерон, 17-оксидегидрокортикостерон, прегненин-17 - ол - З - он, прогестерон, тестостерон. Для аналитического определения стероидов обычно используют их полярографические волны, получаемые на фоне реактива Жирара. [47]
Если стероиды восстанавливаются, то их восстановление протекает при практически одном и том же потенциале. При Е1Г - - 1 54 в ( по отношению к потенциалу дна) восстанавливаются: А4 - андростендион-3 17, Д4 - холестенон, дезоксикортикостерон, кортикостерон, 17-оксидеги дрокортикостерон, прегненин-17 - ол - З - он, прогестерон, тестостерон. Для аналитического определения стероидов обычно используют их полярографические волны, получаемые на фоне реактива Жирара. [48]
В то же время при 89 % - ной модификации семикарбази-дом 174 гиперхромия составляет 20 %, Тт равна 46 С. Нативная тРНК показывает в этом интервале температур гиперхромию, равную 26 %, и Тт 54 С. Такое различие в действии реагентов связано, возможно, с тем, что при модификации реактивом Жирара в полинуклеотид вводится значительное количество положительных зарядов. [49]
 |
Зависимость скорости реакции цитидина с2М раство. [50] |
Изучение кинетики реакции семи-карбазида с цитидином и реактива Жирара с цитидин-5 - фосфатом показывает, что в обоих случаях зависимость скорости реакции от времени описывается уравнением первого порядка, если в смеси присутствует большой избыток гидразида. При этом реактив Жирара оказывается значительно менее реакционноспособ-ным по сравнению с семикарбазидом. Так, при рН 4 2 и 37 С константа скорости реакции цитидина с семикарбазидом и цитидин-5 - фосфата с реактивом Жирара составляет 0 072 и 0 0144 л моль 1 ч - 1 соответственно. [51]
За-окси-прегнанона - 20 - [ 11, 12 - Н ] растворяют в 4 мл муравьиной кислоты ( уд. Полученный остаток без какой-либо очистки растворяют в 1 мл хлороформа и к нему добавляют 3 38 мл 0 87 М раствора надбензоиной кислоты в хлороформе. Спустя И дней при 25 в растворе не остается больше надбензоиной кислоты, и после испарения растворителя получают 1 027 г маслянистого вещества. Разделением при помощи реактива Жирара Т выделяют 595 мг кристаллической, не содержащей кетогруппы фракции и 406 мг кетонной фракции. Первую из них адсорбируют на 100-кратном по весу количестве окиси алюминия ( примечание 2) и оставляют стоять в течение 24 час. [52]
В методе фракционирования, описанном Пинкусомш, мочу подвергают гидролизу по способу Смита и Смита, сокращая, однако, время кипячения до 7 мин. После отгонки эфира остаток растворяют в бензоле и трижды экстрагируют полученный раствор 0 3 М раствором соды для извлечения эстриола. Последний выделяют, подкисляя содовую вытяжку и экстрагируя подкисленный раствор эфиром. Бензольный раствор выпаривают и добавляют реактив Жирара для отделения эстрона от не содержащего кетонной группы эстрадиола. Содержание эстрогенов в каждой из трех фракций определяют биологическим методом. [53]
Страницы: 1 2 3 4