Реакция - преципитация
Cтраница 2
Наиболее простой способ исследования растворимых антигенов в реакции преципитации заключается в том, что исследуемый раствор смешивают со специфической иммунной сывороткой, а затем наблюдают образование преципитата. Эта реакция применяется главным образом для определения титров. Только в том случае, когда реакция ставится с иммунной сывороткой, специфичной к данному белку, величина титра может служить характеристикой белкового препарата. [16]
Чтобы определить, в какой из пяти пробирок реакция преципитации действительно проходила в зоне эквивалентности, в надосадочной жидкости каждой пробы ( 1) определяют избыток антигена или антител, добавляя соответственно иммунную сыворотку или раствор антигена ( см. стр. [17]
В основе иммунохимического метода контроля гомогенности исследуемого белка лежит реакция преципитации его с соответствующей антисывороткой, полученной от иммунизированных этим белком животных. Для строгого доказательства гомогенности белка требуется одновременное использование нескольких методов. [18]
При внесении в специфическую иммунную сыворотку растворимого белкового антигена происходит реакция преципитации. Количество преципитирующих антител в неразведенной или в разведенной в 10 раз антисыворотке можно охарактеризовать тем наибольшим разведением антигена, которое еще способно вызвать реакцию преципитации с данной сывороткой; это разведение называется титром преципитинов. [19]
Фракции белка, разделившиеся в крахмальном геле, можно идентифицировать в реакции преципитации со специфической антисывороткой. Для этого Шерлен и Голь [25] предложили комбинировать электрофорез в крахмальном геле с иммунодиффузией в агаровом геле. [20]
Стерическая специфичность сорбционных центров конканавалина А используется в методе гаптенного ингибирования реакции преципитации этого лектина с полисахаридами. Данные об ингибирующем действии моносахаридов, олигосахаридов и модифицированных Сахаров привели нас к выводу, что наибольшей комплементарностью к сорбцион-ным центрам конканавалина А обладает а-о-маннопиранозильный остаток. [21]
В методе иммуноэлектрофореза для определения положения индивидуальных белков на электрофореграмме применяют реакцию преципитации с антисывороткой, помещенной вдоль направления миграции. Более эффективного разделения компонентов можно добиться с помощью метода перекрестного-иммуноэлектрофореза, суть которого сводится к следующему. Узкую полоску геля с разделенными в одном направлении антигенами переносят на пластинку с гелем, содержащим антитела, и проводят дополнительный электрофорез в перпендикулярном направлении. [22]
Определяют те количества антигена и иммунной сыворотки, которые без остатка вступают в реакцию преципитации после их перемешивания, так что надосадочная жидкость после отделения осадка не содержит ни антигена, ни антител. [23]
Размеры н состав комплексов антиген-антитело важны не только потому, что они влияют на реакции преципитации в пробирках: они играют также решающую роль в определении судьбы таких комплексов в организме. Комплексы, образующиеся при эквивалентности или при избытке антител, имеют много выступающих Fc-областей ( рис. 17 - 32) и поэтому прочно связываются с Fc-рецепторами макрофагов и поглощаются этими клетками. Поэтому они слабо связываются с Fc-рецепторами на макрофагах и разрушаются менее эффективно. Вместо этого они часто осаждаются в мелких кровеносных сосудах кожи, почек, суставов и мозга, где активируют систему комплемента, вызывая воспаление и деструкцию ткани. [25]
Если наслоить раствор антигена на специфическую антисыворотку, то на границе раздела двух слоев происходит реакция преципитации. [26]
Для сенсибилизации используют коллоидные растворы бактериальных АГ, полученные с помощью различных способов гидролиза ( см. реакции преципитации) микробной массы. [27]
В лаборатории Паулинга на основании исследования влияния сотен различных гаптенов и стереохимически сходных с ними веществ на реакции преципитации противосывороток, приготовленных против большого числа азопроизводных белков, была развита теория дополнительности в реакции антиген - антитело. Помимо использования для серологических исследований, соли диазония широко применялись для введения соединений, представляющих интерес с точки зрения физиологии или фармакологии. Несмотря на общеизвестность реакции сочетания белков с соединениями диазония, мы мало что можем сказать о физических свойствах измененных таким образом белков, хотя часто для этой цели можно было бы применять спектроскопические методы. Во многих случаях в реакцию сочетания с азосолью вступает вся сыворотка целиком, а не один только чистый белок. [28]
Иммуноэлектрофорез ( метод Грабара) представляет собой чрезвычайно избирательный способ идентификациию и разделения белков, сочетающий электрофорез и чувствительнейшую иммунохимическую реакцию преципитации. [29]
Воздействие антитела при встрече его с антигеном выражается в том, что происходит слипание макромолекул белков друг с другом с образованием осадка ( реакция преципитации) или склеивание бактерий или вирусных частиц друг с другом ( реакция аглютинации), или разрушение ( лизис) бактериальных клеток, или, наконец, когда бактерии захвачены фагоцитами, чувствительность их повышается и они гибнут внутри фагоцитов. Появление антител в крови изучено на выделенных из крови сыворотках и даже на очищенных белковых фракциях - у гл булинах. Основные виды воздействия антисывороток на бактериальные или другие антигены ( например, упомянутые реакции преципитации, аглютинации и другие подобные феномены) называются серологическими реакциями. [30]
Страницы: 1 2 3 4