Рибонуклеаза
Cтраница 3
Рибонуклеаза Tj - специфическая рибонуклеаза, впервые обнаруженная в ас-пергилловых грибах. Она специфически гидролизует фосфодиэфирные связи в РНК между З - ГМФ - и 5 - ОН-группами соседних нуклеотидов. Этот весьма термостабильный и устойчивый в кислой среде фермент широко применяется ( благодаря специфичности действия) при исследовании первичной структуры РНК. [31]
Нуклеазы ( дезоксирибонуклеаза, рибонуклеаза) способны разжижать гнойные массы вследствие деполимеризации дезоксирибонуклеи-но-вых кислот и дезоксирибонуклеопротеидов, которые входят в их состав. [32]
Анфинсен показал, что денатурированная рибонуклеаза ( гл. [33]
При фракционировании пептидов из окисленной рибонуклеазы [27-29] для элюирования были использованы те же растворы, что и для хроматографии аминокислот: они содержали BRIJ-35, но не содержали тиодигликоля. [34]
Типичные кривые для гидролиза окисленной рибонуклеазы трипсином и химотрипсином [16], а также пепсином [17] показаны на фиг. [35]
Анализ кинетики обмена в рибонуклеазе и инсулине, для которых определение скоростей обмена производилось по методу измерения плотности, показывает, что атомы водорода, потенциально способные к обмену, удобно разделить по меньшей мере на три группы: атомы, обменивающиеся быстро, со средней скоростью и медленно. В инсулине из 91 атома водорода, потенциально способного к обмену ( из которых 48 входят в состав остова пептидной цепи), 61 обменивается в течение 1 мин, для 7 наблюдается относительно высокая скорость обмена и 23 обмениваются медленно. Рибонуклеаза содержит 245 атомов водорода, способных к обмену, из которых 119 входят в состав остова полипептидной цепи. Хотя для различных препаратов наблюдаются некоторые отклонения, можно считать, что приблизительно 175 атомов водорода в рибонуклеазе обмениваются быстро, 50 - несколько медленнее и приблизительно 20 - совсем медленно. [36]
Из панкреатической железы была выделена рибонуклеаза, полученная в 1940 г. в кристаллическом состоянии. Она действует на РНК, расщепляя фосфоэфирную связь присоединенного к положению 3 пиримидинового нуклеозида ( см. гл. [37]
 |
Модель пространственной структуры рибонуклеазы А. [38] |
По данным Рихардса [219], рибонуклеаза А при обработке бактериальной протеазой субтилизином расщепляется между остатками А1а - 20 и Ser-21 на так называемый S-nenmud ( 1 - 20) и S-белок с последовательностью 21 - 124, содержащей 4 дисульфидных мостика. Оба компонента после разделения показывают ничтожную биологическую активность. S-пептид и S-белок с помощью невалентных связей собираются в так называемую рибонуклеазу S, обладающую пространственной структурой, близкой к нативной конформации. [39]
Ниже на примерах пептидной цепи окисленной рибонуклеазы и цепей А и В окисленного инсулина показаны места атаки пептидной цепи различными эндопептидазами ( фиг. [40]
Несущественные Н - связи в рибонуклеазе. [41]
Высокоактивная ( и весьма устойчивая) рибонуклеаза присутствует вводных смывах с пальцев человека, живого [182] или мертвого, а также в отпечатках пальцев; инактивация биологически активных рибонуклеиновых кислот может быть иногда результатом соприкосновения рук с материалом при работе. [42]
Из культуральной жидкости Bacillus subtilis выделена кристаллическая внеклеточная рибонуклеаза. Абсолютной специфичности у этих ферментов не обнаружено: одни связи расщеп - - ляются быстрее, чем другие. Фермент расщепляет олигонуклеотиды независимо от природы их концевых групп. [43]
Формула была еще очень далека от истинной формулы рибонуклеазы, так как оставалась невыясненной полная последовательность аминокислот. Но построение этой схемы очень четко сформулировало все вопросы, которые необходимо было решить для того, чтобы иметь представление о всех деталях расположения аминокислотных остатков в рибонуклеазе. [44]
Олигонуклеотиды, полученные при гидролизе РНК рибонуклеазой Ti. Характер разделения некоторых олигонуклеотидов, образующихся при гидролизе РНК рибонуклеазой TI, показан на фиг. Цифры на этой фигуре соответствуют номерам пятен па двумерных электрофореграммах ( фиг. [45]
Страницы: 1 2 3 4