Cтраница 4
Строятся графики КД для трех белков ( рибонуклеаза, лизоцим и миогло-бин), для которых доли а - и Р - и неупорядоченной форм х, у, г известны из рентгеновских данных. [46]
При изучении последовательности расположения 124 аминокислотных остатков молекулы рибонуклеазы нельзя использовать частичный кислотный гидролиз, как в случае инсулина и более низкомолекулярных пептидов, так как при этом получается слишком большой набор фрагментов и проблема воссоздания из них структуры белка становится практически невыполнимой. [47]
Таким образом, исчерпывающая обработка рибонуклеиновой кислоты рибонуклеазой приводит к получению пиримидиновых нуклеозид-3 - фосфатов и олигонуклеотидных продуктов с концевой 3 -фосфатной группой. [48]
Более того, комплекс устойчив к гидролизу рибонуклеазой, дезоксирибонуклеа-зой или смесью этих ферментов. [49]
Гидролиз примерно 20 мкг 32Р - РНК рибонуклеазами Т1 или А ( 1 мкг) воли в капилляре, в объеме 3 - 5 мкл; на старт полоски ацетилцеллюлозы наносили всю инкубационную смесь. [50]
Далее следует гидролиз транспортной РНК аланина снова рибонуклеазой TI, но в мягких условиях, что приводит к гораздо более длинным фрагментам ( а - k на схеме, см. стр. Поскольку принцип понятен, подробности здесь опускаются. [51]
Аналогично полиадениловая кислота расщепляется диэстера-зой селезенки ( или рибонуклеазой Т2) до смеси аденозин - З - фосфата и устойчивых к ферменту олигонуклеотидов, содержащих исключительно 2 - 5 -межнуклеотидные связи. Синтетические гомопо-лимеры инициируют ферментативную полимеризацию нуклеозид-5 - пирофосфатов под действием полинуклеотидфосфорилазы. [52]
Для ряда белков, например для некоторых ферментов ( рибонуклеаза и др.) и гормонов ( инсулин и др.), установлено количество полипептидных цепочек в молекуле, их длина, размеры и даже порядок расположения аминокислот в цепочках. [53]
Тактика минимальной защиты эффектно продемонстрирована Хирш-маиом при полном синтезе S-белка рибонуклеазы А. Пептидная цепь из 103 аминокислот содержит все трифункциоиальиые аминокислоты, исключая триптофан, в которых были защищены только е-амиио - и тиольиые группы. Само собой разумеется, что опасность побочных реакций при минимальной защите велика, поэтому фрагменты после их синтеза должны быть очень тщательно очищены. Деблокирование защитных функций обычно протекает без осложнений. [54]