Затем водный слой

Cтраница 4

NaOH до щелочной реакции и производят перегонку с водяным паром до тех пор, пока дистиллят не перестанет переходить мутным. После этого добавляют 5 мл эфира и снова встряхивают. Водный слой выливают в стакан, а эфирный слой - в коническую колбу. Затем водный слой переносят обратно в делительную воронку и повторяют экстрагирование с новой порцией эфира ( 5 мл), которую по окончании экстрагирования соединяют с ранее полученной. [46]

Смешивают в делительной воронке 1 часть раствора гидроксиламина солянокислого с 9 частями раствора натрия уксуснокислого. К полученной смеси добавляют - - 2 мл раствора батофенантролина и - 5 мл изоамилового спирта, тщательно встряхивают в течение 2 минут. После отстаивания водный слой сливают в чистый стакан, а слой изоамилового спирта отбрасывают. Затем водный слой переливают в ту же делительную воронку и повторяют промывку смеси раствором батофенантролина и изоамиловым спиртом. Смесь отмывают от железа до тех пор, пока слой изоамилового спирта не перестанет окрашиваться в розовый цвет. [47]

Градуированная пробирка. [48]

Берут две параллельные пробы по 100мл каждого стандартного раствора, осторожно по стенке вливают в две делительные воронки. Туда же добавляют 5 мл хлороформа и делительные воронки равномерно встряхивают в течение 5 мин. В случае плохого разделения слоев добавляют 5 г хлорида натрия. Выдержав полученную смесь ( но не более 3 мин), хлороформный слой количественно переносят в градуированные на 0 2 мл пробирки. Затем водный слой подвергают повторной экстракции в течение 2 мин, добавляя 2 мл хлороформа; начиная с пятой пробы стандартной шкалы для повторной экстракции берут 5 мл хлороформа. После отстаивания хлороформный слой сливают в те же пробирки. [49]

Из очищенного фага РНК экстрагируют точно так же, как и РНК вируса табачной мозаики. Препарат фага смешивают с 0 1 объема 20 % - ного додецилсульфата натрия и 0 1 мг бентонита на каждые 1ОО единиц оптической плотности при 260 нм. Затем эту суспензию смешивают с равным объемом свежеперегнанного фенола, насыщенного SSC - буфером, энергично перемешивают 15 мин при комнатной температуре и центрифугируют при небольшой скорости, чтобы расслоить эмульсию. Верхний водный слой отсасывают и еще дважды экстрагируют фенолом. Затем водный слой дважды экстрагируют эфиром и осаждают 32 Р - РНК, добавляя 2 5 объема 95 % - ного спирта. [50]

Следует обратить внимание на интенсивность протекания реакции взаимодействия фенола и формальдегида. При обычных условиях смесь нагревают до 90 - 95 С. Когда бурная реакция закончится, колбу снова помещают в горячую водяную баню и продолжают нагревание до тех пор, пока смесь не разделится на два устойчивых слоя. Когда будет установлено, что реакция взаимодействия фенола с формальдегидом закончена, прекращают нагревание и дают отстояться водному слою. Затем водный слой сливают, а смолу быстро ( до остывания) переливают в фарфоровую чашку и сушат вначале на водяной, а потом на песчаной бане при постоянном перемешивании стеклянной палочкой при температуре не выше 130 - 160 С. Сушку прекращают, когда застывшая на палочке капля смолы будет легко размельчаться. После этого смолу выливают на железный лист, охлаждают, измельчают в ступке и подвергают различным испытаниям. [51]

Для анализа 1 г металлической ртути помещают в кварцевый тигель емкостью 15 - 20 мл и растворяют в 2 мл концентрированной азотной кислоты. Раствор выпаривают досуха, а затем сухой остаток растворяют в 5 мл 10 % - кого раствора соляной кислоты. Полученный раствор переносят в кварцевую делительную воронку емкостью 50 - 75 мл, споласкивают тигель 5 мл дистиллированной воды, промывные воды также переносят в делительную воронку, добавляют в не 10 мл изоамилового спирта и встряхивают в течение 2 мин. После отстаивания отделяют спиртовый слой, содержащий ртуть в виде металлогалогенод-ных кислот HHgCl3 или H2HgCl4, от водного слоя, в котором находятся соли примесей и еще значительное количество ртути в виде сулемы. Затем водный слой помещают в кварцевую чашку и выпаривают до начала кристаллизации солей. После этого в раствор прибавляют 2 мл концентрированной азотной кислоты и выпаривают досуха. Сухой остаток нагревают яа плитке с закрытой спиралью при - 200 С, что способствует удалению остатков ртути в виде сулемы. После отгонки сулемы чашку, в которой производили выпаривание, споласкивают 1 мл концентрированной азотной кислоты и снова выпаривают досуха. [52]

Раствор помещают в делительную воронку, приливают 2 капли раствора тимолового синего и затем по каплям 10 % - ный раствор аммиака до образования голубой окраски. Добавляют 2 - 3 мл раствора дитизона, взбалтывают 1 мин. Повторяют экстракцию дитизоном до тех пор, пока зеленый цвет хлороформного слоя перестанет изменяться. После этого водный слой подкисляют 2 каплями 6 N НС1, экстрагируют хлороформом по 5 мл каждый раз и продолжают экстракцию до тех пор, пока последний не перестанет окрашиваться. Затем водный слой нагревают до удаления запаха хлороформа и сохраняют в склянке с притертой пробкой. [53]

Страницы: 1 2 3 4