Cтраница 2
С помощью иммуноэлектрофореза производится идентификация компонентов белковых смесей, прежде всего сыворотки крови. Он весьма полезен при диагностике пара-протеинемий и иммунодефицитных диспротеинемий. Этим методом осуществляется контроль чистоты белковых препаратов ( определение примесей), а также анализ белков из тканей и жидкостей организма. [16]
Зная константы ассоциации и количественный состав белковой смеси из хроматографического эксперимента нетрудно найти молекулярную массу белка, используя одну из ранее упоминавшихся калибровочных зависимостей. [17]
Как указывалось выше, зонный электрофорез белковых смесей с использованием емкого носителя, обычно крахмальных блоков, обладает исключительно высокой разрешающей способностью и позволяет почти количественно выделить нужный белок. Эта особенность метода зонного электрофореза делает его исключительно эффективным при решении проблемы очистки белков. [18]
![]() |
Схема образования концентрационных границ при электрофорезе. [19] |
По аналогии с реальным случаем электрофореза белковой смеси мы условно называем буферным раствор электролита, ионы которого имелись по обеим сторонам первоначальной границы, несмотря на исходное предположение о том, что все электролиты полностью диссоциированы. [20]
Фронтальный электрофорез широко применялся для анализа белковых смесей, особенно белков сыворотки крови, а также смесей, экстрагированных из самых различных органов и тканей животных и растений. Качество разделения и точность определения состава резко зависят от состава, рН и ионной силы буфера. Важным правилом является такой выбор рН, когда все компоненты смеси заряжены одноименно - это уменьшает опасность ассоциации компонентов и выпадения осадка. [21]
![]() |
Схема образования концентрационных границ при электрофорезе. [22] |
По аналогии с реальным случаем электрофореза белковой смеси мы условно называем буферным раствор электролита, ионы которого имелись по обепм сторонам первоначальной границы, несмотря на исходное предположение о том, что все электролиты полностью диссоциированы. [23]
Фронтальный электрофорез широко применялся для анализа белковых смесей, особенно белков сыворотки крови, а также смесей, экстрагированных из самых различных органов и тканей животных и растений. Качество разделения и точность определения состава резко зависят от состава, рН и ионной силы буфера. Важным правилом является такой выбор рН, когда все компоненты смеси заряжены одноименно - это уменьшает опасность ассоциации компонентов и выпадения осадка. [24]
Схема использования молекулярных сит для разделения белковых смесей сводится к следующему. Из гранул сефадекса готовят колонку и пропитывают растворителем. Белковый раствор медленно вводят в колонку. Его объем обычно во много раз меньше объема колонки. После исчерпания белкового раствора через колонку пропускается ток растворителя. Быстрее всего внутрь гранул диффундируют молекулы наименьших размеров. Часть из них диффундирует обратно, но в результате повторяющихся заходов в гранулы они двигаются через колонку значительно медленнее тока жидкости. [25]
Следует различать выделение одного из компонентов сложной белковой смеси и разделение последней на все составляющие ее компоненты. Хроматография на целлюлозных ионитах с успехом применяется для разрешения обеих указанных задач. Очень часто белки предварительно концентрируют и разделяют на крупные фракции обычными методами, а затем хроматографируют. [26]
Попытка выйти на рынок пищевых добавок или белковых смесей была признана бессмысленной, так как производство новых продуктов на старом оборудовании заведомо приведет или к проблемам с качеством, или к нерентабельной деятельности из-за высокой себестоимости. Поэтому было решено: если и приобретать новое оборудование, то такое, на котором можно производить продукцию, которую хорошо знают покупатели и точно будут ее покупать по конкурентоспособным ценам. [27]
Часто для определения одного или нескольких компонентов белковой смеси оказываются пригодными специфические ( химические или биологические) методы. Они могут применяться как для контроля степени фракционирования ( совместно с менее специфическим методом определения общего содержания белка), так и для обнаружения гетерогенности белка. [28]
Попытка выйти на рынок пищевых добавок или белковых смесей была признана бессмысленной, так как производство новых продуктов на старом оборудовании заведомо приведет или к проблемам с качеством, или к нерентабельной деятельности из-за высокой себестоимости. Поэтому было решено: если и приобретать новое оборудование, то такое, на котором можно производить продукцию, которую хорошо знают покупатели и точно будут ее покупать по конкурентоспособным ценам. [29]
В некоторых случаях получение чистого белка из белковых смесей облегчается путем избирательной денатурации сопутствующих белков. [30]