Cтраница 3
Для решения различных задач желательно иметь аффинные сорбенты как с денатурированными ( однонитевыми) ДНК или РНК, так и с нативными двунитевыми молекулами. Условия их химического взаимодействия с матрицей различны - во втором случае часть аминогрупп оснований участвует в образовании водородных связей между комплементарными нитями. [31]
Очистку белков и нуклеиновых кислот на аффинных сорбентах часто ведут не на колонках, а в объеме - методами центрифугирования и декантации. Эти методы рассмотрены ниже наряду с аффинной хроматографией на колонках. [32]
В ряде случаев необходимо или удобно получать аффинные сорбенты для конкретной цели. [33]
Полная нерастворимость существенна не только для предотвращения потерь аффинного сорбента, но главным образом для предотвращения загрязнений изолируемого вещества растворившимся носителем. [34]
![]() |
Аффинная хроматография 1251-меченого токсина из Vibrio cholerae на фетуин-агарозе ( а и на ганглиозиддиаминодипропиламино-агарозе ( б. [35] |
Ганглиозиды, связанные с нерастворимыми носителями, служат аффинными сорбентами холерного токсина. Этот токсин связывает также некоторые гликолротеины, такие, как фетуин и тироглобулин. [36]
Выбрав таким образом буфер, в него переводят как аффинный сорбент, так и вносимый на него препарат. Последнюю операцию легко осуществить диализом или гель-фильтрацией, а иногда и просто разбавлением. [37]
Не удивительно поэтому, что популярность и сфера применения аффинных сорбентов с групповой специфичностью в последние годы быстро увеличиваются, а вместе с ними растет и список таких сорбентов, поставляемых в готовом виде. Нам необходимо познакомиться с торговыми наименованиями, особенностями и областями использования важнейших из них. Иногда эти параметры будут очерчиваться самой сферой применения сорбентов; во всяком случае, их нетрудно найти в каталогах фирм, которые мы упомянем. Рубрикация дальнейшего изложения построена по наименованиям самих лигандов. [38]
В этом разделе мы рассмотрим несколько примеров такого использования аффинных сорбентов с групповой специфичностью, когда элюцию вели раствором субстрата, осуществляя конкурентную десорбцию вещества. [39]
![]() |
Очистка рецептора для 3 5 3 -трииодтиронина ( Т3 на колонке сефарозы с иммобилизованным гормоном ( текст ILatham et al., 1981 ]. [40] |
В этой работе интересно отметить подбор оптимального соотношения количества аффинного сорбента и белкового раствора. Недостаток сорбента, естественно, ведет к неполной экстракции рецептора, а избыток затрудняет конкурентную элюцию свободным гормоном и требует использования повышенной концентрации дорогостоящего препарата. [41]
Высокомолекулярные аффинные лиганды обычно открывают больше возможностей для приготовления аффинных сорбентов. Ряд очень активных аффинных сорбентов получен при прямом присоединении белка к нерастворимому носителю ( многочисленные примеры приведены в гл. Однако в этом случае очень важным является условие, чтобы присоединение белка к нерастворимому носителю не приводило к изменению его натив-ной конформации. [42]
Носителем для иммобилизации аффинных лигандов служил силикагель, поскольку получаемые аффинные сорбенты на этом носителе могут работать в условиях высокого давления. [43]
Однако не исключена возможность столь прочной многоточечной посадки белка на аффинный сорбент, что его будет трудно снять. [44]
Кроме носителей для связывания аффинных лигандов эти фирмы производят также готовые аффинные сорбенты, как это уже отмечалось в разд. [45]