Сорбция - белок
Cтраница 3
 |
Фронтальный анализ глюкози-даз на ТЭАЭ-целлюлозе в 0 07 М фосфатном буфере с рН 6 0. [31] |
Как уже указывалось, сорбцию белков проводят в условиях низкой ионной силы раствора. Значение рН раствора следует выбрать таким, чтобы все белковые компоненты раствора имели одноименный знак свободного заряда. [32]
 |
Фронтальный анализ глюкози-даз на ТЭАЭ-целлюлозе в 0 07 М фосфатном буфере с рН 6 0. [33] |
Как уже указывалось, сорбцию белков проводят в условиях низкой ионной силы раствора. Значение рН раствора следует выбрать таким, чтобы все белковые компоненты раствора имели одноименный знак свободного заряда. При низкой ионной силе ( JA) раствора возможна агрегация противоположно заряженных белков. [34]
По незамещенным силанолам может происходить неконтролируемая сорбция белков или малых молекул, например ионов при так называемой ион-парной хроматографии ( см. ниже), от чего страдают разрешающая способность и воспроизводимость хроматографи-ческого процесса. Во избежание этого силикагель после модификации обрабатывают еще и низкомолекулярным модификатором гидрофобной природы - триметилхлорсиланом. О том, какой эффект дает такая дополнительная обработка, можно судить по следующему примеру. Между тем для ФТГ-Val подобного эффекта не наблюдается. Очевидно, что положительно заряженный остаток аргинина взаимодействует с отрицательным зарядом ионизированной силанольной группы. [35]
 |
Зависимость сорбируемости альбомицина от состава смолы. [36] |
Ввиду этого все дальнейшее изучение сорбции белков проводили в аппарате с мешалкой с использованием сильно измельченной смолы, фракционированной методом седиментации ( осаждение с высоты 20 - 30 см в течение 15 - 30 мин. Путем синтеза с участием различного количества агентов образования поперечных связей были приготовлены две смолы КМТ, одна из которых, находившаяся в Н - форме, имела коэффициент набухания, равный 3 6; другая смола характеризовалась тем же коэффициентом набухания, но находилась в Na-форме. Второй образец катио-нита был получен со значительно большим количеством агента образования поперечных связей, чем первый образец. [37]
 |
Влияние температуры на элюцию инсулина с колонки ДЭАЭ-целлюлозы 0 005 М трис - HCl буфером ( рН 8 0, содержащим 0 3 М. [38] |
Приведенные выше закономерности: повышение сорбции белков с увеличением емкости сорбента и уменьшением ионной силы раствора, а также изменение сорбции белков в зависимости от рН среды согласуются с ионообменным механизмом сорбции белков на целлюлозных ионитах. Однако исследование более простых систем полиэлектролитов показывает, что даже их взаимодействие не может быть объяснено только на основании ионного обмена. [39]
Как уже отмечалось, специфичность сорбции белков карбоксильными высокопроницаемыми биосорбентами зависит не только от объемной концентрации карбоксильных групп в ионите, но и от структуры матрицы, способной к слабым взаимодействиям с белком. [40]
Приведенные выше закономерности: повышение сорбции белков с увеличением емкости сорбента и уменьшением ионной силы раствора, а также изменение сорбции белков в зависимости от рН среды согласуются с ионообменным механизмом сорбции белков на целлюлозных ионитах. Однако исследование более простых систем полиэлектролитов показывает, что даже их взаимодействие не может быть объяснено только на основании ионного обмена. [41]
Ограниченность наших представлений о механизме сорбции кислых белков на оксиапатите с еще большим основанием следует отнести к механизму сорбции основных белков. Вероятно, в ней участвуют кулоновские взаимодействия положительно заряженных остатков аминокислот на поверхности белка с отрицательно заряженными остатками фосфорной кислоты, которые тоже должны быть на поверхности оксиапатита. Об этом говорит более прочная сорбция полилизина и полиаргинина, чем других, более нейтральных полипептидов. Но вполне возможно, что и иные виды взаимодействия здесь играют важную роль. [42]
Имеются данные об использовании гидроокисей и сульфитов для сорбции белков. Так, Саджер и другие проводили очистку протромбина адсорбцией на гидроокиси магния. [43]
 |
Хроматография ( а, б и рехроматография ( в, г гемоглобинов человека на КМ - ( а, г и ДЭАЭ - ( б, в целлюлозах. [44] |
От приведенных закономерностей могут быть те или другие отклонения, обусловленные более специфической сорбцией белков. [45]
Страницы: 1 2 3 4 5