Cтраница 1
Неспецифическая сорбция является осложняющим фактором в аффинной хроматографии. Это уже неоднократно подчеркивалось и детально рассматривается в разд. Например, в агаре - одном из наиболее часто используемых носителей-как отмечают Порат и др. i [55], два типа групп ответственны за сорбцию, а именно моносульфатные эфирные и карбонильные группы. [1]
Неспецифическая сорбция уже обсуждалась на ряде примеров ( разд. [2]
![]() |
Кривые титрования 6-амино. [3] |
Преимущественно неспецифическая сорбция нуклеотидов на целлюлозе с повышенным содержанием примесей лигнина отмечалось в разд. [4]
Метод неспецифической сорбции на ионитах используется чаще всего для очистки различных производственных растворов. [5]
![]() |
Влияние длины пространственной ножки на связываемость некоторых дегидрогеназ на № - ш-аминоалкил - АМР-сефарозе. [6] |
Мешающее влияние неспецифической сорбции в биоаффинной хроматографии обсуждается подробно в разд. Неспецифической сорбции можно лучше всего избежать, если использовать гидрофильные пространственные группы, получение которых описано в разд. [7]
Другим источником неспецифической сорбции агарозой является сера [35], которая может быть почти полностью удалена щелочной десульфуризацией в присутствии борогидрида натрия с последующим восстановлением алюмогидридом лития в диоксане. [8]
Гели с неспецифической сорбцией не следует использовать для аффинной хроматографии. [9]
Адсорбционная энергия для неспецифической сорбции АОнеспец складывается из энергии гидрофобных, гидрофильных или даже ионных взаимодействий и сопоставима с адсорбционной энергией в обычной хроматографии. Она очень сильно зависит от природы нерастворимого носителя и белка. AGHecneU должна быть по возможности низкой, потому что она включает также сорбцию молекул, которые образуют неспецифические комплексы с аффи-нантом. [10]
Сорбент должен проявлять минимальную неспецифическую сорбцию. Это трудно осуществить, если носитель сильно адсорбирует молекулы аффинного лиганда. Подобным образом, если выделяют вещества, образующие специфический и обратимый комплекс со связанным аффинным лигандом, важно, насколько это возможно, чтобы только эти вещества задерживались на колонке с нерастворимым аффинным сорбентом и только в виде специфического комплекса со связанным аффинным лигандом. Это является одной из причин, почему носители, которые содержат ионогенную группу, такие, как сополимер этилена с малеиновым ангидридом, у которого остается ряд свободных кар-боксильных групп после присоединения аффинного лиганда, никогда не будут столь широко применяться в аффинной хроматографии, как нейтральная агароза. [11]
![]() |
Профиль элюирования ацетилхолинэстеразы на колонке с аффинным сорбентом. [12] |
Возможно, это объясняется неспецифической сорбцией сопутствующих белков на группировке четвертичного аммониевого основания, обладающей ионообменными свойствами. [13]
При использовании исходного раствора чистого КоА неспецифическая сорбция маловероятна, чем и объясняется отсутствие соли в буфере при посадке кофермента и упрощенный характер промывки готового сорбента. [14]
![]() |
Эффективность различных элюирующих систем для десорбции лактат-дегидрогеназы из сердца быка, связанной на колонке ( 40X15 мм с AMP-се. [15] |