Первичная структура - белок
Cтраница 3
При определении первичной структуры белков и нуклеиновых кислот ( см. § 7.7 и 7.8) необходимо расщепление исходных молекул на фрагменты меньшего размера, причем для получения гомогенных фрагментов нужно провести расщепление по строго определенным точкам. Это в основном достигнуто в случае белков вследствие применения специальных протеаз, таких, как трипсин, химотрипсин, эластаза, а в случае нуклеиновых кислот - с помощью специальных эндонуклеаз-рестрикции. Химический синтез генов позволяет достигнуть полинуклеотидов длиной в несколько десятков или одной-двух сотен нуклеотид-ных остатков. [31]
Стратегия изучения первичной структуры белка, особенно на первых этапах, всецело определяется его аминокислотным составом и молекулярной массой. Дальнейший план исследования зависит от полученных результатов и должен подвергаться постоянной коррекции. [32]
 |
Схема установления первичной структуры трипсина. Окрашены участки полипептидной цепи, структура которых определена с помощью секвенатора. [33] |
В изучении первичной структуры белков достигнут значительный прогресс. Ежегодно устанавливается полная структура около 100 новых белков. Определены аминокислотные последовательности таких сложных ферментов, как гликогенфосфорилаза и Р - галактозидаэа, содержащих соответственно 841 и 1021 аминокислотных остатков в одной полипептидной цепи. [34]
Параллельное изучение первичных структур белка н ДНК было использовано, в частности, при определении аминокислотной последовательности Р - и р - субъединиц ДНК-зависнмой РНК-полимеразы E. [35]
Второстепенное значение точной первичной структуры белка для вида непосредственно доказывается сопоставлением 44 - х белков человека и шимпанзе. Чем же определяется на молекулярном уровне различие видов. [36]
Информация на первичную структуру белка заложена в нуклеотидной последовательности одной из двух нитей молекулы ДНК. Передача информации от ДНК происходит через м - РНК, молекулы которой образуются на определенных участках ДНК - цистронах, или генах, по принципу снятия копии. [37]
Итак, основа первичной структуры белка представляет собой цепочку пептидных связей ( фиг. [38]
Общая стратегия определения первичной структуры белка включает несколько этапов. Необходимо: ( а) провести количественный анализ гидролизата для того, чтобы определить мольное соотношение имеющихся аминокислот ( см. разд. А / - конец) и карбоксильную группу ( С-конец) ( см. разд. [39]
Если в состав первичной структуры белка входит остаток иминокислоты - пролина (8.2), то соответствующая пептидная группа не имеет водорода, так как у пролина атом азота удерживает только один атом водорода, который отщепляется при образовании пептидной связи с выделением молекулы воды. Атом азота такой пептидной группы не может образовать водородную связь с атомом кислорода соседней группы. Поэтому в месте расположения пролина структура а-спирали нарушается - происходит излом спирали. [40]
Ген ответствен за первичную структуру белка, выполняющего свою биологическую функцию. Эта биологическая функция определяется пространственным строением макромолекулы белка. В свою очередь, как о том свидетельствует множество фактов, закручивание белковой цепи в глобулу фиксированного строения продиктовано ее первичной структурой, генетически закодированной последовательностью аминокислот. [41]
Ген ответствен за первичную структуру белка, BI полняющего свою биологическую функцию. Эта биол гическая функция определяется пространственным стро нием макромолекулы белка. В свою очередь, как о тс свидетельствует множество фактов, закручивание белк вой цепи в глобулу фиксированного строения продикт вано ее первичной структурой, генетически закодирова ной последовательностью аминокислот. [42]
Последовательность аминокислот в первичной структуре белка является специфической видовой характеристикой данного белка. [43]
Анализ данных о первичной структуре белков позволяет сделать следующие общие выводы. [44]
Тонкие различия в первичной структуре родственных белков часто удается выявить методом отпечатков пальцев. Метод этот состоит в том, что белок подвергают частичному перевариванию с помощью одного или нескольких протеолитических ферментов, а затем разделяют продукты гидролиза и идентифицируют их, пользуясь для этого либо электрофорезом, либо хроматографией на бумаге. Детальное изучение этих пептидных карт показывает, что все пептидные пятна, за исключением одного, идентичны. Таким способом генетически измененный структурный элемент выявляется очень легко, и для установления природы структурного изменения нет надобности устанавливать полную аминокислотную последовательность всей молекулы. Действительно, в ряде случаев весьма определенные указания относительно природы имеющегося замещения можно получить просто исходя из результатов анализа аминокислотного состава соответствующих пептидов, выделенных из двух белков. Но, конечно, однозначные доказательства замены одной аминокислоты на другую получают только после установления аминокислотной последовательности анализируемых пептидов. [45]
Страницы: 1 2 3 4