Изоэлектрическая точка - белок
Cтраница 3
Во втором варианте приборов камерного типа применяется забуференный раствор, так что в ходе процесса не возникает различий в значениях рН и белки либо движутся в разных направлениях, если рН раствора находится между изоэлектрическими точками белков, либо перемещаются в одном направлении с разными скоростями. Теорелл [300, 301] сконструировал несколько моделей таких приборов и успешно проводил в их отделение белков от примесей полисахарида [302]; однако он установил, что отделение одних белков от других осуществляется с большим трудом. [31]
В изоэлектрической точке белки наименее устойчивы в растворе и легко выпадают в осадок. Изоэлектрическая точка белка в сильной степени зависит от присутствия в растворе ионов солей; в то же время на ее величину не влияет концентрация белка. [32]
Большинство природных белков содержит значительные количества ( 25 - 30 %) дикарбоновых аминокислот ( глютаминовой и аспарагиновой) и, следовательно, относятся к кислым белкам. Изоэлектрическая точка кислых белков лежит в слабокислой среде, основных - в слабощелочной среде. В табл. 39 приводятся изоэлектрические точки некоторых белков. [33]
Большинство природных белков содержит значительные количества ( 25 - 30 %) дикарбоновых аминокислот ( глутаминовой и аспарагиновой) и, следовательно, относятся к кислым белкам. Изоэлектрическая точка кислых белков лежит в слабокислой, основных - в слабощелочной среде. В табл. 42 приводятся изоэлектрические точки некоторых белков. [34]
Если считать изоэлектрической точкой белка такую величину рН, при которой Z 0, то, за исключением случая, когда изоионная точка находится при рН 7, раствор белка не может быть одновременно изоэлектрическим и изоионным. [35]
При этом транспортная РНК, поверхность молекулы которой имеет совсем иной характер, чем у белков, ведет себя так же, как и белки. Более того, изоэлектрические точки белков, фигурирующих на рис. 9.3, сильно различаются. Скорее всего это может быть обусловлено гидродинамическим взаимодействием молекул растворенного вещества с растворителем, что также указывает на неспецифическую природу явления ЯМР-д протонов. Исходя из самого общего рассмотрения механизмов магнитной релаксации [14], можно сделать вывод, что наблюдаемая релаксация протонов растворителя должна возникать в основном в результате магнитных биполярных взаимодействий данного протона либо с соседним протоном той же молекулы воды, либо с протонами гидратиро-ванного растворенного белка, либо вследствие проявления обоих эффектов. В первом случае каждая молекула воды ( в среднем) ощущает вращательное движение белковых молекул в результате дальнодействующего процесса гидродинамического характера или в результате того, что часть времени она находится в состоянии какого-то связывания с растворенным белком и подвергается реориентации вместе с ним. Отсутствие зависимости объясняется тем, что ядра 2Н и 17О релаксируют в результате квад-рупольных взаимодействий ( причем имеет значение величина градиента электрических полей этих ядер), а не под влиянием взаимодействий с другими ядрами. [36]
Для того чтобы белковая молекула оставалась неподвижной в электрическом поле ( условие изоэлектрической точки), необхо -, димо сообщить ей дополнительно ( s - п) положительных зарядов, что достигается в более кислых растворах, из которых поглощение ионов Н выше. Таким образом, изоэлектрическая точка белка при избыточной адсорбции аниона соли смещается в кислую сторону. [37]
При денатурации белка наблюдается смещение изоэлектрической точки его. Характерно, что изоэлектрическая точка белков при солевой и тепловой денатурации смещается в разные стороны. [38]
Для белков с относительно малым числом зарядов высокомолекулярных частиц, несмотря на ряд затруднений, осмотическое определение молекулярного веса можно проводить различными способами. Его либо измеряют в изоэлектрической точке белка ( в которой совсем не проявляется эффект Доннана и для которой я; 0), либо вычисляют л /, исходя из экспериментально определяемого значения потенциала мембраны. [39]
 |
Диаграммы электрофоретического анализа по Тизелиусу. [40] |
Прямые методы сводятся к наблюдению за поведением частиц в электрическом поле при электрофорезе. В буферном растворе со значением рН, равным изоэлектрической точке белка, последний электронейтрален и перемещаться в электрическом поле не будет. Наблюдения за электрофорезом приводят либо макроскопически в особых электрофоретических аппаратах, либо микроскопически в кювете ультрамикроскопа. [41]
Прямые методы сводятся к наблюдению за поведением частиц в электрическом поле при электрофорезе. В буферном растворе со значением рН, равным изоэлектрической точке белка, последний электронейтрален и не перемещается в электрическом поле. Эти наблюдения проводят либо макроскопически в особых электрофоретических аппаратах, либо микроскопически в кювете ультрамикроскопа. Помимо прямых методов наблюдения изоэлектрического состояния белков существуют и косвенные методы, которые сводятся к наблюдению максимума или минимума того или иного физического свойства, изменяющегося с изменением дзета-потенциала испытуемого раствора. Все эти методы подробно описаны в соответствующих руководствах. [42]
Фронтальный электрофорез - единственный метод, позволяющий определять подвижность и изоэлектрическую точку белка с очень высокой точностью. [43]
Фронтальный электрофорез - единственный метод, позволяющий определять подвижность и изоэлектрическую точку белка с очень высокой точностью. [44]
 |
Влияние реакции среды на. [45] |
Страницы: 1 2 3 4