Привитая фаза
Cтраница 4
 |
Рабочая поверхность сорбента Синерджи Полар-РП ( Феноме-кекс, США с полярной вставкой в виде эфирной группы. [46] |
Несмотря на то, что в ряде случаев от обычной колонки С1Ямож - но добиться приемлемой стабильности в условиях 100 % водной подвижной фазы ( размер пор должен превышать 22 нм, рабочая температура колонки должна быть ниже 10 С или 5мМ ион парного реагента должно быть добавлено в элюент), последние несколько лет ознаменовались появлением на мировом хроматогра-фическом рынке целого ряда специфических обращенно-фазовых колонок, предназначенных для разделения высокополярных соединений с применением подвижных фаз с высоким содержанием воды. В них полярные функциональные группы такие как, амидная, карбаматная или эфирная, вводятся в алкильную цепочку привитой фазы как можно ближе к поверхности силикагеля. Изначально колонки с полярной вставкой, в частности амидной, использовались благодаря своей способности деактивировать взаимодействия остаточных силанольных групп с основными компонентами пробы. Впоследствии была обнаружена способность данного типа колонок к стабильной работе в условиях водных подвижных фаз ( даже при работе на 100 % водном элюенте привитая фаза находится в смоченном состоянии, а алкильные цепи сохраняют конформационную подвижность и способность взаимодействовать с компонентами пробы), а также улучшенная селективность по отношению к полярным соединениям. [47]
Такая ситуация отражает многообразие явлений, имеющих место при процессе разделения в условиях широкого выбора условий в ОФ ЖХ. Если использовать более полярные модификаторы ( класс III в табл. 24) и сорбаты с умеренной или сильной полярностью, то привитые фазы можно применять наряду с обычными адсорбентами и в НФ-варианте жидкостной твердофазной хроматографии. [48]
При применении сорбентов с аминофазами следует принимать во внимание их реакционную снособносчъ. Не рекомендуется использовать в качестве растворителей и компонентов проб вещества с оксогруппами ( альдегиды и кстоны), так как в этом случае возможно разрушение структуры привитой фазы с образованием оснований Шиффа и необратимая сорбция некоторых компонентов проб. Лминофаза может быть легко окислена, поэтому следует исключить действие на сорбент сильных окислителей. Аналогично при использовании нитрильной привитой фазы следует учитывав реакционную способность пианогруппы. Например, она способна подвергаться гидролизу в кислой или щелочной среде. [50]
В настоящее время разработано множество подходов, применяемых для оценки удерживания, из которых лишь некоторые могут быть рассмотрены в этой главе. В 1985 г. для описания удерживания в ЖХ были необходимы три отдельные модели: а) для традиционной жидкостной адсорбционной хроматографии ( ЖАХ) на немодифицированных сорбентах, таких как силикагель, и полимерных привитых фазах; б) для неполярных привитых фаз ( жидкостная распределительная хроматография); в) для ЖХ с обращенными фазами ( ОФ ЖХ) на неполярных фазах. [51]
Радикальных изменений в порядке элюирования органических веществ в режиме распределительной хроматографии при замене одной неподвижной фазы на другую не происходит. Причина в том, что молекулы сорбата вступают во взаимодействие с НФ не непосредственно, а только через молекулы сольватированного растворителя, которого тем больше, чем больше сольватируюи ис способности растворителя и больше сольватируемость полярных групп привитой фазы. Хотя природа привитых полярных групп ( нитрил, амин, диол) заметно различается, нивелирующее действие сольватационных слоев полярных компонентов подвижной фазы на границе раздела фаз сглаживает эти различия. Поэтому улучшение разрешения заменой модификатора подвижной фазы, молекулы которого по иному сольватируют полярную группу сорбата и привитой фазы, добиться значительно легче, чем заменой сорта привито-фазного сорбента. Изменение объемной доли модификаторов, использование различных добавок в подвижную фазу при сохранении той же привитой полярной груш [ Ы позволяет получить существенно более значимый результат. [52]
Таким образом, к числу основных параметров, контролирующих высоту, эквивалентную теоретической тарелке, относятся: объемная скорость, диаметр частиц сорбента ( длина диффузионного пути), характер заполнения колонки, геометрия заполнения и коэффициент диффузии. Иначе говоря, размывание в колонке уменьшается, и эффективность повышается, когда используют более мелкий сорбент, более равномерный по составу ( узкая фракция), более плотно и равномерно упакованный в колонке, при использовании более тонких слоев привитой фазы, менее вязких растворителей и оптимальных скоростей потока. [53]
В настоящее время разработано множество подходов, применяемых для оценки удерживания, из которых лишь некоторые могут быть рассмотрены в этой главе. В 1985 г. для описания удерживания в ЖХ были необходимы три отдельные модели: а) для традиционной жидкостной адсорбционной хроматографии ( ЖАХ) на немодифицированных сорбентах, таких как силикагель, и полимерных привитых фазах; б) для неполярных привитых фаз ( жидкостная распределительная хроматография); в) для ЖХ с обращенными фазами ( ОФ ЖХ) на неполярных фазах. [54]
Сорбенты с привитыми фазами характеризуются параметрами, определяющими удерживание и селективность. Среди таких параметров наиболее важными являются тип и концентрация привитого органического модификатора и концентрация оставшихся на поверхности силикагеля силанольных групп. Для приготовления привитой фазы поверхность исходного силикагеля химически обрабатывают так, чтобы обеспечить максимальную концентрацию силанольных групп. Типичное значение Сон достигает 7 - 9 мкмоль / м2, что соответствует 4 - 5 силанольным группам на 1 нм2 поверхности силикагеля. Верхний предел определяется размером молекул органического модификатора и их способностью прививаться к силанольным группам. [55]
Если менее полярная подвижная фаза используется в режиме нормально-фазового разделения, ЖСФХ можно трактовать аналогично ЖТХ ( разд. Однако для некоторых видов привитых фаз выбор растворителей может иметь определенные ограничения. [56]
Можно отметить следующие преимущества, обеспечивающие преобладающее использование 1 [ риви [ ых сорбентов на основе силикагеля: механическая устойчивость к высоким давлениям; отсутствие перехода I фивитой фазы в растворитель в процессе хромато. Если в классической I ажвой хроматографии подвижная фаза практически не оказывает влияния на селективность разделения, то в жидкостной хроматографии ее влияние огромно. Так как в разделении весьма активно участвуют как привитая фаза, так и адсорбированные ( абсорбированные) компоненты подвижной фазы, широкий ассортимент сорбентов для ВЭЖХ в большинстве случаев не нужен. Изменением состава подвижной фазы зачастую удается добиться той же селективности, что и за счет применения нового дорогостоящего привитсфазного сорбента. Достаточно иметь в комплекте лаборатории 3 - 4 сорбента и широкий ассортимент растворителей и добавок разного типа. Наиболее распространены привитые алки-ламинные ( 8 - ( СНДМН, возможна вторичная или третичная аминогруппа), алкилдиольныс ( 1 - ( СН2) рСН7СН ( ОН) СН ОН) и алкил-нитрильные ( йЦСН СМ) фазы. [57]
 |
ОФ TCX аминофенолов на различных сорбентах. [58] |
Полученные результаты свидетельствуют о том, что развитие ОФ ТСХ только начинается. Чтобы оценить область применения этого метода, его возможности и ограничения, необходимы систематические исследования. При использовании этого варианта ТСХ важно учитывать три дополнительных фактора: химическую природу привитой фазы, степень силанизации поверхности и введение соли в растворитель. [59]
Страницы: 1 2 3 4