Cтраница 4
В настоящее время с помощью хроматографии производят полное удаление солей из воды, разделение сложных смесей аминокислот и гидро-лизатов белков, разделение сложных смесей фосфосахаридов, пурино-вых и пиримидиновых оснований, фракционирование белков, очистку антител, выделение стрептомицина, хлортетрациклина и других антибиотиков, а также алкалоидов, гормонов, антиптстаминных веществ. Большой интерес представляет и терапевтическое использование ионообменных смол для регулирования состава ионной среды в желудочно-кишечном тракте, использование их для целей диагностики. [46]
Окись магния, силикаты магния ( например, Florisil), карбонат кальция, а также полистирол и полиамиды имеют свои области применения в адсорбционной хроматографии, главным образом в неполярных растворителях, но в процессах очистки и фракционирования белков и НК они практически не используются. [47]
![]() |
Двухступенчатая очистка одного из негистоновых щелочных белков хроматина тимуса ( белок АК методом гель-фильтрации на биогеле Р-60. [48] |
Приведенный пример является своего рода рекордом, поскольку манипулировать с колонкой четырехметровой длины ( при диаметре 1 5 см) вряд ли найдется много желающих, но он иллюстрирует необходимость существенного увеличения длины колонки в случае постановки перед методом фракционирования белков гель-фильтрацией более сложных задач. [49]
В настоящее время при помощи хроматографии производят полное удаление солей из воды ( получение дистиллированной воды без перегонки), разделение сложных смесей аминокислот и гидро-лизатов белков ( см. рис. 56), разделение сложных смесей фосфоса-харидов, пуриновых и пиримидиновых оснований ( рис. 57), фракционирование белков ( цитохрома, рибонуклеазы, инсулина и др.)) фракционирование нуклеиновых кислот и различных полимеров, отделение пепсина, трипсина, алкогольдегидрогеназы, очистку антител, выделение стрептомицина, хлортетрациклина, полимиксина и других антибиотиков, а также алкалоидов, гормонов, антигиста-минных веществ. Большой интерес представляет также терапевтическое использование ионообменных смол для регулирования состава ионной среды в желудочно-кишечном тракте и для диагностических целей. [50]
Ионообменные целлюлозы получают в виде порошков или в виде ионообменной бумаги. Фракционирование белков большей частью проводят методом колоночной хроматографии на порошковых ионообменных целлюлозах. Для препаративного выделения белков рекомендуются иониты с диаметром зерен 0.30 - 0.15 мм или 0.15 - 0.08 мм. Целлюлозные иониты, выпускаемые фирмой Serva, имеют диаметр частиц 15 - 20 мк, их длина больше в 2 - 5 раз. [51]
При соответствующих условиях ДЭАЭ-сефадекс связывает все белки сыворотки, за исключением фракции IgG. Поэтому фракционирование белков выворотки с помощью этого ионообменника очень удобно для выделения иммунохимически чистого IgG, а также полезно при дальнейшей очистке препаратов IgG, полученных другими способами. [52]
Отделив глобулины фильтрованием, можно оставшуюся в фильтрате так называемую альбуминовую фракцию осадить добавлением сернокислого аммония до полного насыщения. Методом фракционирования белков путем высаливания широко пользуются для получения различных белковых препаратов. [53]