Аффинная хроматография

Cтраница 2

Аффинная хроматография НК на сорбентах, лигандами которых являются тоже нуклеиновые кислоты, базируется на их комплементарном взаимодействии с образованием достаточно прочных двуни-тевьтх структур - двунитевых ДНК и РНК или ДНК-РНК-гибридов. Такие структуры образуются и надежно сохраняются лишь тогда, когда строго комплементарные участки имеют протяженность в десятки нуклеотидных звеньев. Разумеется, как иммобилизованная НК, так и очищаемая должны быть однонитевыми, а условия связывания с сорбентом должны быть благоприятными для их гибридизации. [16]

Принцип аффинной хроматографии, использующий аффинанты, ковалентно связанные с нерастворимой матрицей, известен более 20 лет. Кемпбелл и др. [6] были, вероятно, первыми ( 1951 г.), в чьих работах этот принцип получил практическое приложение для выделения антител на колонке с целлюлозой с ковалентно присоединенным антигеном. Для выделения ферментов аффинная хроматография впервые была применена в 1953 г. Лерманом [15], который выделил тирозиназу на колонке с целлюлозой, эфирно связанной с остатками резорцина. [17]

Схема биоспецифической адсорбции ( А, элюирования деформирующим буферным раствором ( 5 и биоэлюирования растворимым конкурентным лигандом ( В. [18]

Использование аффинной хроматографии тем не менее не ограничивается только выделением биологически активных веществ. [19]

Применение аффинной хроматографии для изучения взаимодействий в биологических комплексах кажется весьма обещающим. [20]

Эффективность различных элюирующих систем для десорбции лактат-дегидрогеназы из сердца быка, связанной на колонке ( 40X15 мм с AMP-се. [21]

Эффективность аффинной хроматографии снижается в основном из-за неспецифической сорбции инертных веществ. Неспецифические эффекты, как правило, очень слабы и проявляются главным образом во взаимодействующих системах с низким сродством. [22]

Развитие аффинной хроматографии сопровождается увеличением количества продажных иммобилизованных аффинных лигандов. Можно полагать, что то же ожидает и другие хроматографические материалы. Точно так же как сегодня в очень редких лабораториях готовят ДЭАЭ - и КМ-целлюлозу, совершенно закономерно, что будет постепенно увеличиваться использование продажных биоспецифических сорбентов. Это справедливо прежде всего для сорбентов с групповой специфичностью или сорбентов специфических к веществам, постоянно получаемым в лабораториях, и обусловлено специфической природой аффинной хроматографии. Из разнообразия биологически активных веществ следует, что необходим очень широкий ассортимент специфических сорбентов; поэтому много научных работников, по-видимому, будут вынуждены сами готовить специальные высокоэффективные сорбенты. [23]

Аффинная хроматография неочищенного куриного овомукоида на колонке с сефарозой, со связанным химотрипсином. [24]

Методом аффинной хроматографии на сефарозе, ковалентно связанной с химотрипсином, Файнштейн [21] выделил куриный ингибитор из неочищенного овомукоида в одну стадию. [25]

Разновидность количественной аффинной хроматографии - фронтальный анализ [10]; он основан на понятии плотности L0 аффинного лиганда на единицу длины колонки с агарозой. [26]

В колоночной аффинной хроматографии достаточно сильное взаимодействие выделяемых веществ с иммобилизованным аффинным лигандом приводит к концентрированию вещества и его медленной миграции вниз по колонке. Этот процесс зависит от концентрации лиганда и почти не зависит от начальной концентрации свободных макромолекул. [27]

Для аффинной хроматографии гликопротешшв в качестве аффинных лигандов используются антитела или лектины. Использование антител как аффинных лигаидов рассмотрено в разд. [28]

Для аффинной хроматографии веществ, слабо растворимых в воде, можно использовать также растворы в 50 % - ном диметилформамиде или в 50 % - ном этиленгликоле. [29]

Примером является аффинная хроматография полисом, рибосом, интактных клеток, органелл или мембранных фракций. [30]

Страницы: 1 2 3 4