Cтраница 4
Если предполагается использование разделительной колонки при температуре, отличающейся от комнатной, необходимо обеспечить, чтобы и предколонка работала при этой же температуре. Однако в 90 % случаев, вероятно, разделение смесей методом жидко-жидкостной хроматографии производят при окружающей температуре. Исключеяие из этого правила составляют те случаи, когда разделение производят в режиме жидко-жидкостной хроматографии с обращенной фазой. Для улучшения растворимости анализируемых веществ в относительно неполярной неподвижной фазе и для увеличения скорости массопередачи температуру колонок в этом варианте хроматографии поддерживают в интервале от 40 до 60 С. [46]
Обычно для этого производят анализ на колонках с различной неподвижной фазой. Если известное вещество и неизвестный компонент имеют одинаковое время удерживания на двух или более колонках, таких, как колонка с р § - оксидипропио-нитрилом и карбоваксом 400, вероятность того, что эти вещества идентичны, намного больше по сравнению с вероятностью правильной идентификации, основанной на сравнении времен удерживания, полученных только на одной колонке. Необходимо отметить, что не следует ограничиваться сравнением хроматограмм, полученных только методом жидко-жидкостной хроматографии. [47]
Однако для аналитических целей этот метод применяется реже, чем новейшие методы газовой или тонкослойной хроматографии. В последнее время, после того, как была усовершенствована методика изготовления колонок и разработана лучшая аппаратура, интерес к этому методу возродился. Теоретические разработки, создание специализированных насадок, чувствительных детекторов, воспроизводимых насосных систем - все это делает высокоскоростную жидко-жидкостную хроматографию высокого давления практическим методом разделения. [48]
Однако для аналитических целей этот метод применяется реже, чем новейшие методы газовой или тонкослойной хроматографии. В последнее время, после того, как была усовершенствована методика изготовления колонок и разработана лучшая аппаратура, интерес к этому методу возродился. Теоретические разработки, создание специализированных насадок, чувствительных детекторов, воспроизводимых насосных систем - вое это делает высокоскоростную жидко-жидкостную хроматографию высокого давления практическим методом разделения. [49]
Жидко-жидкостная хроматография основана на распределении вещества между двумя жидкими фазами. В качестве неподвижной фазы используют воду или органический растворитель. В первом случае подвижной фазой является органический растворитель, во втором - водный раствор. Жидко-жидкостную хроматографию подразделяют на колоночную распределительную и бумажную. [50]
Правильный выбор сорбента и соответствующей элюирую-щей системы - это первый и наиболее важный этап решения поставленной задачи. Поэтому необходимо обстоятельно знать свойства всех типов используемых в ТСХ сорбентов. Однако, если условия выбраны правильно, один из механизмов разделения становится преобладающим. Если разделяемые соединения неполярны, следует создать условия, благоприятные для адсорбционной хроматографии ( применение сорбента с большой адсорбционной способностью), а для разделения полярных ( растворимых в воде) соединений следует использовать принципы, применяемые в жидко-жидкостной хроматографии. Наконец, при работе с ионогенными соединениями следует избрать методику ионообменной хроматографии. Очевидно, что налицо определенная аналогия с колоночной хроматогр-афией. [51]
Эта гибкость определяется в основном выбором распределяющих фаз, используемых для достижения разделения. Чтобы достичь требуемого разделения, которое трудно выполнить другими хро-матографическими методами, в данном случае можно использовать определенное химическое взаимодействие. Жидко-жидкостная хроматография может применяться для разделения самых различных образцов, как полярных, так и неполярных. Чаще всего неподвижная фаза - полярное вещество, в то время как подвижная фаза значительно менее полярна. Эта форма используется для разделения наиболее сильно полярных соединений, так как эти вещества предпочтительнее удерживаются в полярных неподвижных фазах. При разделении неполярных молекул полярность фаз меняется. Этот метод иногда называют жидко-жидкостной хроматографией с обращенной фазой. [52]
Эта гибкость определяется в основном выбором распределяющих фаз, используемых для достижения разделения. Чтобы достичь требуемого разделения, которое трудно выполнить другими хро-матографическими методами, в данном случае можно использовать определенное химическое взаимодействие. Жидко-жидкостная хроматография может применяться для разделения самых различных образцов, как полярных, так и неполя ных. Чаще всегл неподвижная фаза - полярное вещество, в то время как подвижная фаза значительно менее полярна. Эта форма используется для разделения наиболее сильно полярных соединений, так как эти вещества предпочтительнее удерживаются в полярных неподвижных фазах. При разделении неполярных молекул полярность фаз меняется. Этот метод иногда называют жидко-жидкостной хроматографией с обращенной фазой. [53]
Жидко-жидкостная хроматография представляет собой распределительную хроматографию. Анализируемое вещество удерживается за счет распределения между подвижной и неподвижной жидкостями. Необходимым требованием в этом виде хроматографии является нерастворимость неподвижной жидкой фазы в подвижной. Обычно в качестве неподвижной жидкой фазы используют воду, а в качестве подвижной - органические растворители. Одним из видов жидко-жидкостной хроматографии является бумажная хроматография. В качестве неподвижной фазы в бумажной хроматографии применяют воду, удерживаемую волокнами целлюлозы. [54]
Кроме того, существует промежуточный метод разделения, разработанный за последние три года. В этом случае органические функциональные группы неподвижной фазы химически связаны с активными центрами кремний-содержащих веществ. Ло-ки утверждает [1], что несмотря на то что они ведут себя как эффективные растворители, свойства таких растворов не были детально изучены. Если для данной смеси не известно, какой способ разделения лучше использовать, то производят произвольный выбор между жидко-жидкостной и твердо-жидкостной хроматографией. По мнению автора, жидко-жидкостная хроматография обеспечивает более широкие возможности по сравнению с твердо-жидкостной. [55]