Целлюлаз
Cтраница 2
Нанесение раствора целлюлаз или непосредственно культуральной жидкости на колонку с порошковой целлюлозой осуществляют обычно при пониженной температуре и рН 4 5 - 5 5 в буферном растворе. Десорбцию ферментов с колонки проводят либо при щелочных значениях рН ( 9 - 10), либо при рН 6 5 - 7 с понижением ионной силы элюента до дистиллированной воды. В первом случае наблюдаются значительные потери активности целлюлаз. Второй способ методически более сложный в силу резкого возрастания гидродинамического сопротивления в колонке с целлюлозой при ионной силе алюента, близкой к дистиллированной воде. Метод аффинной хроматографии на целлюлозе весьма эффективен для групповой очистки прочно сорбирующихся ферментов, однако при этом теряется 30 % и более ( в зависимости от источника) целлюлаз с низким сродством к целлюлозе. К недостаткам метода относятся и невозможность его стандартизации, а также ряд методических сложностей, обусловленных недостатками порошковой целлюлозы как сорбента для колоночной хроматографии. [16]
Окрашенный субстрат целлюлаз - области применения / / Биоорган, химия. [17]
Полезное действие целлюлаз весьма разнообразно. Напомним, что из миллионов тонн разнохарактерных органических веществ, которые синтезируются зелеными растениями, значительная часть не пригодна для употребления в пищу или для употребления в качестве корма. Таковы, например, целлюлоза ( клетчатка), пектины и др. Ферменты, осуществляя целлюлолиз, разлагают непригодные для усвоения вещества на более простые, эффективно используемые организмом. [18]
Для фракционирования целлюлаз применяется практически весь спектр методов очистки белков и имеющихся для этого носителей. [19]
Клонирование генов грибных целлюлаз - задача значительно более сложная. В отличие от прокариот ( бактерий) гены эука-риот, в том числе грибов, содержат интроны, не кодирующие полипептидную цепь и удаляемые из мРНК в процессе сплайсинга. [20]
 |
Голова кормящейся тли. Виден хоботок ( стилет, проникающий во флоэму листа. [21] |
У большинства животных целлюлаз нет, поэтому материал клеточных стенок растений препятствует доступу пищеварительных ферментов к клеточному содержимому. Пережевывание пищи травоядными млекопитающими и перетирание ее в мускульных желудках птиц ( например, гусей) - это совершенно необходимые операции, предшествующие пищеварению: они нарушают целостность клеток растительного корма. Плотоядное же животное, напротив, может без особого опасения заглотать свок добычу, не жуя ее. [22]
Клонирование генов грибных целлюлаз - задача значительно более сложная. В отличие от прокариот ( бактерий) гены эука-риот, в том числе грибов, содержат интроны, не кодирующие полипептидную цепь и удаляемые из мРНК в процессе сплайсинга. [23]
Наиболее эффективными продуцентами целлюлаз являются микроскопические грибы. Именно грибы с их высокоразвитым секреторным аппаратом широко используются в промышленности для получения препаратов внеклеточных целлюлаз. Лучшие мутантые штаммы наиболее известного продуцента целлюлаз - плесневого гриба Trichoderma viride ( reesei), секретируют в среду до 30 граммов активных целлюлаз на литр культуральной жидкости. [24]
Вторым перспективным источником целлюлаз являются бактерии. Хотя они секретируют, как правило, значительно меньшие количества внеклеточных целлюлаз, зато гораздо быстрее растут и намного удобнее при генетических манипуляциях. [25]
Чтобы оценить значение целлюлаз, необходимо представить себе роль и значение субстрата, на который они действуют. Высокомолекулярный углевод целлюлоза ( природный полимер) является наиболее распространенным из органических веществ на земле. Ресурсы целлюлозы, главным образом в виде древесины, на нашей планете необъятны. Запасы ее в СССР особенно велики. Строение целлюлозы очень сложно. Не менее 99 % глюкозидных связей в молекуле относятся к этому типу. Известно, что цепь целлюлозы построена из единиц целлобиозы. [26]
Наиболее эффективными продуцентами целлюлаз являются микроскопические грибы. Именно грибы с их высокоразвитым секреторным аппаратом широко используются в промышленности для получения препаратов внеклеточных целлюлаз. Лучшие мутантые штаммы наиболее известного продуцента целлюлаз - плесневого гриба Trichoderma viride ( reesei), секретируют в среду до 30 граммов активных целлюлаз на литр культуральной жидкости. [27]
Вторым перспективным источником целлюлаз являются бактерии. Хотя они секретируют, как правило, значительно меньшие количества внеклеточных целлюлаз, зато гораздо быстрее растут и намного удобнее при генетических манипуляциях. [28]
Большинство исследователей, изучающих целлюлазы, отмечают, что синергизм можно рассматривать как основной результат действия полиферментной целлюлазной системы. [29]
Разрушающие целлюлозу ферменты ( целлюлазы) образуются в результате биосинтетической деятельности микроорганизмов. [30]
Страницы: 1 2 3 4