Время - хроматографирование
Cтраница 4
Основным узлом приставки является печь, обогреваемая электрической спиралью и помещенная в защитный кожух. Сорбционная трубка вставляется внутрь печи так, чтобы газ-носитель проходил через нее в направлении, противоположном направлению воздуха при отборе пробы. Приставка включает двухпозици-онный шестиходовой обогреваемый газовый кран, который позволяет направлять поток газа-носителя в аналитическую колонку через капилляр, служащий для улавливания элюирован-ных с сорбента примесей, или минуя его. Такая конструкция дает возможность сократить продолжительность цикла анализа за счет того, что десорбция может производиться во время хроматографирования предыдущего образца. [46]
Аскорбиновую кислоту, растворенную в смеси 3 г метафосфорной кислоты, 8мл уксусной кислоты и 92 мл воды, наносят в виде пятна диаметром точно 10 мм. Для хроматографирования применяют w - бутанол с уксусной кислотой и водой ( 4: 1: 5), время хроматографирования составляет 4 час. При этом фронт растворителя должен быть удален от линии старта приблизительно на 15 см. После сушки на воздухе хроматограмму проявляют индофенольным реактивом ( Д 171) и вновь сушат на воздухе. Площади пятен 2, 3, 5, 6 измеряют планиметром или, лучше, миллиметровой бумагой и наносят на диаграмму на ось ординат, тогда как по оси абсцисс откладывают количество ( цг) аскорбиновой кислоты. На основании средней величины этих трех значений определяют на прямой содержание аскорбиновой кислоты в 5 лл образца. Третий рабочий контроль состоит в сравнении углов наклона прямых с результатами, полученными из обоих хроматограмм. [47]
Поэтому нередко имеет смысл использовать скорость элюции, в 5 - 6 раз большую оптимальной, и ценой незначительного расширения зон существенно уменьшить продолжительность опыта, но нельзя допускать, чтобы скорость элюции была намного ниже оптимальной. Можно показать, что оптимальная скорость элюции оказывается тем больше, чем выше значения коэффициентов диффузии вещества и чем меньше диаметр гранул. Уменьшение диаметра гранул снижает дисперсию зоны, улучшает разрешение пиков ( см. ниже), позволяет повысить скорость и сократить время хроматографирования. Однако при этом растет гидравлическое сопротивление колонки, возникает необходимость вести элюцию при повышенном давлении и встают связанные с этим проблемы сжимаемости неподвижной фазы. Подробнее эти вопросы будут рассмотрены ниже; их. [49]
Если общий объем раствора, который надо нанести, дает пятно диаметром более 10 мм, раствор наносят частями, высушивая каждый раз перед нанесением следующей порции. Если на одной полоске бумаги необходимо получить несколько хроматограмм, то расстояний между точками нанесения растворов на карандашной линии должны быть не менее 3 см. Вносят бумагу в камеру, закрывают крышку и оставляют стоять на 90 мин. Затем в лодочку для растворителя через отверстие в крышке вносят в достаточном количестве подвижную фазу, указанную в статье, закрывают камеру и хроматографируют до указанного расстоя-нили или в течение определенного времени. Вынимают бумагу из хроматографической камеры и высушивают на воздухе. Во время хроматографирования и высушивания бумагу следует защищать от яркого света. [50]
 |
Тонкослойные хромато-граммы в форме клиновидных полос.| Шаблоны из плексигласа ( толщина 2 - 3 мм для разметки контура. [51] |
Были проверены различные формы язычков и их расстояния друг от друга. Изображенные на рис. 34 и 35 формы дали наилучшие результаты. Его кладут близко к нижнему краю пластинки для ХТС и очерчивают пятиугольник, затем из верхних углов проводят продольные линии, применяя для этого шаблон для надписей. Вследствие сужения полосы в месте, где подается растворитель, время хроматографирования увеличивается. [52]
Если одни авторы считают, что величина Rf не зависит от времени протекания подвижной фазы через бумагу, то другие полагают, что такая зависимость существует. Кроме того, известно, что даже при использовании одного и того же растворителя различным катионам соответствует различная продолжительность хроматографировання. В противоположность этому величина Rf в случае Мн с увеличением времени хроматографирования увеличивалась незначительно, для Со увеличивалась сильнее, для Си различия в величинах R, также были велики. [53]
В применении ЭВМ к газовой хроматографии различают два подхода. В первом случае сырые газохроматографические данные вручную или автоматически переносятся на промежуточный носитель информации - магнитную ленту, перфоленту или перфокарты, а затем вводятся в ЭВМ, которая производит их обработку. Альтернативой является непосредственная электрическая связь ЭВМ с одним или несколькими ( до нескольких десятков) хроматографами, так называемый режим on-line. При этом получение и обработка данных, а также контроль работы хроматографа осуществляются в течение всего времени хроматографирования. Говорят, что машина работает в режиме real-time - реальном масштабе времени. [54]
При выборе сорта хроматографической бумаги для разделения углеводов, аминокислот и других веществ руководствуются результатами ее испытания, которое проводят на чистых растворах смесей интересующих веществ, применяя соответствующие растворители. Скорость разделения смесей веществ зависит не только от сорта хроматографической бумаги, но также и от направления в ней волокон целлюлозы. Полоска хроматографической бумаги во время анализа играет роль колонки из набухших волокон целлюлозы. Между волокнами во время хроматографирования движется растворитель с анализируемой смесью веществ. Волокна целлюлозы в листе бумаги расположены в определенном порядке, поэтому в полоске бумаги их расположение зависит от того, как она вырезана. Площадь, занимаемая веществом, выделенным во время хроматографирования, будет больше, если разделение проводят на полоске с продольным расположением волокон. Это влияние структуры бумаги необходимо учитывать при хроматографических анализах и особенно при количественном определении компонентов. [55]
Страницы: 1 2 3 4