Cтраница 4
Блок и Болинг [14] описывают экстракционную методику выделения некоторых наименее летучих аминов, получающихся при декарбоксилиро-вании - аминокислот. Амины экстрагируют из щелочного раствора эфиром в жидкостном экстракторе и улавливают водным раствором фосфорной кислоты. Кислоту нейтрализуют, а амины экстрагируют из водной фазы 1-бута-нолом. Эта методика разработана для выделения аминов при помощи хроматографии на бумаге, но она в равной мере применима в газовой хроматографии. Амины можно выделять также на ионообменных смолах при помощи метода, аналогичного применяемому для выделения аминокислот ( см. гл. Такие методы подробно описаны ниже. [46]
Еще во времена Пастера было известно, что белки обладают оптической активностью. Впоследствии было установлено, что оптическая активность белков является следствием оптической активности входящих в их состав аминокислот. Далее, требовал решения вопрос, встречаются ли в белках только оптически чистые аминокислоты или могут встречаться также и частично или полностью рацемизованные. Фишер впервые постулировал, что в белках аминокислоты встречаются только в оптически чистом виде. Противоречащие этому представлению факты, например выделение рацемического серина из продуктов гидролиза белков, Фишер объяснил рацемизацией, наступающей в процессе гидролиза белка и выделения аминокислот. [47]
Гидролиз белков кислотой обычно сопровождается разрушением ( в результате окисления) большей части триптофана, окислением цистеина в цистин и некоторым распадом серина и треонина. Щелочной гидролиз имеет то преимущество перед кислотным, что триптофан в этих условиях более стабилен. Однако при щелочном гидролизе имеет место интенсивный распад серина, треонина, цистина, цистеина и аргинина. Кроме того, при щелочном гидролизе наблюдается рацемизация природных аминокислот. Гидролиз белка как кислотой, так и щелочью сопровождается дезамидированием глутамина и аспарагина. Однако ферментативный метод также страдает определенными недостатками: в частности, гидролиз может быть неполным и сам фермент может распадаться с освобождением аминокислот. Выделение аминокислот из белков и получение их с количественным выходом представляет очень сложную задачу, которой занимались многие исследователи. [48]